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Artigo de método

Ensaio de imunofluorescência para avaliar o efeito de proteínas-alvo no crescimento de neuritos

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8 de julho de 2025

Neste artigo

Resumo

Fonte: Chan, W., W., R. et al. Um ensaio baseado em proteína de fluorescência verde aprimorada para estudar o crescimento de neuritos em neurônios primários. J. Vis. Exp. (2019).

Neste vídeo, demonstramos um ensaio de imunofluorescência baseado em EGFP para identificar a eficácia das proteínas-alvo no crescimento de neuritos de neurônios corticais primários. Os neurônios primários são transfectados com uma proteína fluorescente, EGFP, e uma proteína-alvo e, em seguida, um imunoensaio é realizado para investigar o efeito da proteína-alvo no crescimento de neuritos.

Divulgações

Não há conflitos de interesse declarados.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Lamínulas circulares de 18 mmThermo CientíficoCB00180RAEsterilize antes de usar
Citocalasina DInvitrogenPHZ1063Dissolvido em DMSO
Kit Maxi Plasmídeo EndoFreeQIAGENRolamento 12362
Meio de montagem de fluorescênciaDakoS302380
Reagente de Transfecção de Lipofectamina 2000Invitrogen11668019
ParaformaldeídoSigma-AldrichPág. 6148
pEGFP-C1Clontech#6084-1
pCI FE65Consulte as referências 8 e 15
Tablets PBSGibco18912014
Penicilina-estreptomicinaGibco15140122
Bromidrato de poli-D-lisinaSigma-AldrichPág. 7280
espátulaSigma-AldrichS4147
Tripsina-EDTA (0,05%), vermelho de fenolGibco25300062

Etiquetas

Neurônios Corticais PrimáriosTransfecção de EGFPAnálise de Proteína AlvoMicroscopia de FluorescênciaImageJ NeuronJFixação com ParaformaldeídoRevestimento com Poli-D-LisinaMedição de Projeções Neuronais