Fotometria de massa para estudar interações antígeno-anticorpo em um nível de molécula única

Neste artigo

Resumo

Fonte: Wu, D. et. al., Determinação rápida da afinidade anticorpo-antígeno por fotometria em massa. J. Vis. Exp.(2021)

Neste vídeo, demonstramos o uso da fotometria de massa para estudar as interações antígeno-anticorpo em uma câmara de fluxo. A luz focalizada se espalha de forma diferente com base na massa das moléculas. Um detector coleta a luz espalhada e gera o padrão de interferência como pontos de intensidades variadas, que se correlacionam com as massas moleculares.

Protocolo

1. Preparar as câmaras de fluxo

Limpe as lamínulas de vidro
1. Usando frascos de lavagem com água destilada, etanol e isopropanol, enxágue as lamínulas de 24 mm x 50 mm na seguinte ordem: água, etanol, água, isopropanol, água. Seque as lamínulas com uma corrente de nitrogênio limpo. É importante enxaguar as lamínulas de cima para baixo, segurando o canto inferior com uma pinça de ponta macia. Seque a lamínula na mesma direção para evitar a transferência de contaminação da pinça (Figura 1A).
2. Da mesma forma, enxágue as lamínulas de 24 mm x 24 mm com água destilada, etanol e água destilada. Seque as lamínulas com uma corre....

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Resultados

figure-results-1
Figura 1: Preparação e carregamento da câmara de fluxo MP. (A) Posição de retenção da lamínula para o procedimento de limpeza. (B) Alinhamento da lamínula de 24 x 24 mm (camada intermediária) e da fita dupla face (camada superior) na superfície da folha de alumínio (camada inferior, não mostrada). As linhas tracejadas azuis mostram a localização das linhas de corte. .......