Isolamento de linfócitos de um adesivo de Peyer de camundongo

Resumo

Fonte: Yazicioglu, Y. F., et al. Desvendando os principais atores da imunidade humoral: protocolo avançado e otimizado de isolamento de linfócitos dos adesivos de Murine Peyer. J. Vis. (2018)

Neste vídeo, demonstramos o isolamento de linfócitos de um adesivo de Peyer de camundongo colhido. Os linfócitos isolados podem ser usados para análise posterior.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Excisão cirúrgica e etapas de preparação do tecido:

1. Remoção cirúrgica do intestino delgado (SI)
   1. Eutanasiar camundongos usando asfixia por CO₂ ou qualquer método equivalente aprovado pelo comitê institucional de ética animal.
   2. Transfira o mouse para uma área dedicada para excisão cirúrgica. Coloque o traseiro para baixo e hlimpe o abdômen com etanol 70%. Realize uma laparotomia cortando a pele abdominal e o peritô....

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Placas de 6 poços, 12 poços e 96 poços	Falcão / Corning	353046,353043/3596
Tubos cônicos de 50 ml	falcão	3520
Filtro de células de 40 μm	falcão	Rolamento 352340
10 ml de êmbolo-seringa	Exel INT	26265
RPMI	Corning	15-040-CV
Pbs	Corning	21-040-CM
FBS	Biológicos de Atlanta	S11150
Agitador orbital	VWR	Modelo 200
Tesoura de extremidade curva
Pinça serrilhada fina
Tesoura curva pequena