Artigo de método

Diferenciação de células estromais da medula óssea de camundongos in vitro em adipócitos

8 de julho de 2025

Neste artigo

Resumo

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Fonte: Maridas, D. E. et al., Isolamento, Cultura e Diferenciação de Células Estromais da Medula Óssea e Progenitores de Osteoclastos de Camundongos.J. Vis. Exp.(2018)

Este vídeo demonstra a diferenciação das células estromais da medula óssea (BMSCs) em adipócitos. No processo de duas etapas, na presença de fatores de crescimento e hormônios específicos, as BMSCs indiferenciadas primeiro se diferenciam em pré-adipócitos. A segunda etapa envolvendo o tratamento com glicose e insulina leva à formação de adipócitos maduros com múltiplas gotículas lipídicas.

Protocolo

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Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Preparação dos tubos de coleta

  1. Faça o meio de cultura BMSC suplementando o α mínimo essencial do meio (MEM α) com 10% de soro fetal bovino e 1% de penicilina/estreptomicina.
  2. Coloque 100 μL de meio de cultura BMSC em tubos de microcentrífuga de 1,5 mL. Normalmente, 3 ossos cabem em um único tubo, portanto, prepare-se adequadamente.
  3. Corte as extremidades das pontas da pipeta de 200 μL o suficiente para que caibam nos tubos da c....

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Divulgações

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Não há conflitos de interesse declarados.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Pontas de pipeta de 200μL Rainin17014401
Tubos de centrífuga de 1,5 mLEUA Científico1615-5500
Tubo cônico de 15mL VWR89039-668
Tubo cônico de 50mLVWR89039-660
Solução salina tamponada com fosfato (PBS) Sigma-Aldrich21-040-CM
etanolCiência Fisher04-355-451
Ferramentas de dissecação
Filtros de 70μmFalcão BDRolamento 352350
0,25% de tripsinaGibco25200
KimwipeVWR82003-820
MEMαGibcoRolamento 12571
Soro fetal bovinoVWRRolamento 97068-085
Penicilina/estreptomicinaInvitrogen15140-122
DMEM Glicose Alta Sigma-AldrichD5796
RosiglitazonaCayman ChemicalRolamento 717410
insulinaSigma-AldrichI6634
A IBMXSigma-AldrichI5879
dexametasonaSigma-AldrichD4902
Microscópio inversor Axio ObserverZeiss

Reimpressões e permissões

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Etiquetas

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