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Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.
1. Camundongos usados para o experimento
- Use camundongos machos e fêmeas de 8 semanas de idade no fundo B6.
2. Procedimento cirúrgico para remoção do linfonodo de drenagem inguinal
- Eutanásia de camundongos usando asfixia por CO2 seguida de luxação cervical.
- Imobilize os camundongos no estágio de acrílico com fita adesiva e aplique óleo mineral com um cotonete na pele abdominal para evitar a deposição de pelos ao redor da incisão (Figura 1B). A remoção de pêlos não é necessária.
- Realizar uma incisão na linha média com tesoura curva de microcirurgia (11,5 cm) e pinça curva de microcirurgia (12,5 cm) no abdômen do púbis até o apêndice xifóide (Figura 1C).
- Dissocie a musculatura abdominal da pele (Figura 1D).
- Faça incisões horizontais na pele na parte superior e inferior da linha de incisão vertical para criar retalhos cutâneos no lado de interesse (de acordo com o lado da injeção da mistura de anticorpos) e aba a pele para visualizar o linfonodo (Figura 1E).
- Cole o retalho cutâneo na placa de acrílico (Figura 1F).
- Remover o linfonodo de drenagem inguinal com pinça curva de microcirurgia (Figura 1F). Os gânglios linfáticos aparecerão como esferas translúcidas, geralmente bilobulares, sob a pele.
