Method Article

Imagem de fase quantitativa tridimensional para caracterização de subtipos de linfócitos

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fonte: Yoon, J. et al. Identificação sem rótulo de subtipos de linfócitos usando imagens de fase quantitativa tridimensionais e aprendizado de máquina. J. Vis. Exp.(2018)

Este vídeo demonstra a identificação sem rótulos da morfologia e bioquímica dos linfócitos por meio de imagens quantitativas de fase 3D. Essa técnica permite uma análise minuciosa dos linfócitos, descobrindo suas estruturas e propriedades internas sem a necessidade de procedimentos de marcação.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Citometria de fluxo e classificação de subtipos de linfócitos

NOTA: A classificação de linfócitos dependendo do tipo de célula é essencial para estabelecer os rótulos de tipo de célula verdadeiros (ou seja, corretos) para treinar e testar um classificador de tipo de célula em aprendizado supervisionado. A citometria de fluxo, um método padrão-ouro, é usada para identificar e separar linfócitos.

  1. Faça uma mistura de anticorpos de coloração de marcadores de superfície em 100 μL de meio RPMI-1640 fresco [com 10% de FBS, 0,1 μg de CD3e (17A2), CD8a (53-6,7), CD19 (1D3), CD45R (B220, RA3-6B2) e NK1.1 (PK13....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Não há conflitos de interesse declarados.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Citometria de fluxoBD BiociênciasÁria II ou III
Câmara de imagemTomocube, Inc.TomoDish
HolotomografiaTomocube, IncHT-1H
Software de imagem holotomográficaTomocube, Inc.TomoStudio
Software de processamento de imagensObras de MatemáticaMatlab R2017b
Tubo de centrífuga cônico FalconThermoFisher Scientific14-959-53UMA15 mL
Solução salina tamponada com fosfatoSigma-Aldrich806544-500ML
Tampão de lise de cloreto de amônio-potássioThermoFisher ScientificA1049201
RPMI-1640 médioSigma-AldrichR8758
Soro fetal bovinoThermoFisher Scientific10438018

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Three Dimensional Quantitative Phase ImagingLymphocyte SubtypesRefractive Index TomogramDigital Micromirror DeviceDiffraction Tomography AlgorithmHologram ReconstructionLabel Free ImagingCell Morphology AnalysisBiochemical CharacterizationLymphocyte Imaging

Related Articles