Imunodiagnósticos

Este vídeo demonstra um procedimento para analisar a eferocitose mediada por macrófagos peritoneais de timócitos apoptóticos de camundongos por microscopia de fluorescência.

Este vídeo mostra uma estratégia de controle de citometria de fluxo utilizando um painel multicolorido para analisar a viabilidade celular e marcadores específicos de anticorpos anti-humanos conjugados com fluorescência. Essa abordagem torna possível determinar com precisão a porcentagem de populações de células infectadas por Mycobacterium tuberculosis.

Este vídeo demonstra a coloração e preparação de células bacterianas para estudos imunológicos usando corante fluorescente vermelho. As bactérias coradas são diluídas e ressuspensas em um meio de crescimento para atingir a concentração bacteriana desejada para a infecção da célula hospedeira, representando a multiplicidade de infecção.

Este vídeo demonstra a detecção da interação da vitronectina com proteínas de superfície bacteriana. A análise por citometria de fluxo mede o sinal de fluorescência de anticorpos marcados com fluorescência ligados à vitronectina, confirmando sua presença na superfície bacteriana. Essa técnica fornece informações sobre as interações patógeno-hospedeiro e possíveis terapias de infecção bacteriana.

Este vídeo demonstra a avaliação da fosforilação intracelular de proteínas induzida por citocinas estromais em células leucêmicas. Essas proteínas fosforiladas intracelulares são quantificadas usando a técnica de citometria de fosfofluxo.

Neste vídeo, demonstramos o teste para avaliar a ativação de basófilos na presença de um alérgeno de teste usando citometria de fluxo.

Este vídeo demonstra uma técnica para extração de ácido nucleico de sangue humano total usando partículas de vidro magnético (MGPs) - pequenas esferas magnéticas revestidas com sílica. Ao lisar as células sanguíneas usando um tampão de lise, os ácidos nucléicos liberados se ligam à superfície dos MGPs revestidos de sílica, extraindo as moléculas da amostra.

Este vídeo demonstra a exocitose de mastócitos induzida por um reagente ativador que inclui um ionóforo de cálcio, iniciando a liberação de grânulos secretores contendo a proteína repórter fluorescente NPY-mRFP. Posteriormente, avaliamos quantitativamente a exocitose medindo o NPY-mRFP liberado usando um leitor de placa de fluorescência.

Este vídeo demonstra o método para analisar o metabolismo energético em células NK humanas ativadas usando um analisador de fluxo extracelular. Diferentes inibidores dos complexos da cadeia de transporte de elétrons afetam a síntese de ATP, que é medida por meio da taxa de consumo de oxigênio ou OCR, fornecendo informações sobre o metabolismo celular e a bioenergética.

Este vídeo demonstra a atividade lítica das células natural killer contra as células-alvo coradas com fluorescência. O método permite a medição da citotoxicidade induzida por células NK colorindo células mortas e usando um citômetro de fluxo para quantificar células-alvo vivas e mortas.

Este vídeo demonstra a detecção do fator Rhesus (Rh) em amostras de sangue usando um instrumento de levitação magnética. O campo magnético alinha e levita contas e células sanguíneas com base na densidade. O tratamento das amostras com anticorpos anti-Rh resulta na formação de complexos de células grânulas de densidade intermediária, permitindo a diferenciação de glóbulos vermelhos Rh-positivos e Rh-negativos.

Este vídeo demonstra uma técnica in vitro para estudar a formação de sinapses imunes entre células T humanas primárias e bicamadas lipídicas suportadas (SLB). As proteínas da superfície das células T interagem com os respectivos ligantes imobilizados no SLB para formar uma sinapse imune, seguida pelo movimento dos grânulos líticos em direção à sinapse, que é visualizado por meio de microscopia de fluorescência.

Este vídeo demonstra um método de conversão de células dendríticas (DCs) em DCs tolerogênicas (TolDCs) usando um agente farmacológico imunomodulador. Essa conversão é confirmada pela avaliação da função TolDC por meio de seu efeito imunossupressor nas células T CD4+.

Este vídeo demonstra um método de decaging de um complexo de histocompatibilidade peptídeo maior fotoativável usando irradiação UV. O processo de decaging expõe a sequência de peptídeos nativos, permitindo a ativação precisa das células T.

Este vídeo demonstra uma técnica para a detecção de tuberculose extrapulmonar. Nanossondas superparamagnéticas de óxido de ferro (SPIO), conjugadas a anticorpos específicos para Mycobacterium, são injetadas em um camundongo previamente infectado com Mycobacterium bovis BCG, marcando o granuloma e proporcionando um melhor contraste de imagem para sua detecção.

Este vídeo demonstra um método para estudar a captação e o transporte retrógrado de nanocorpos funcionalizados para entender suas vias de tráfego intracelular. Ao introduzir sulfato radiomarcado e utilizar técnicas de isolamento e detecção, este método permite o estudo da captação endocítica e da chegada da rede trans-Golgi de proteínas de carga.

Este vídeo demonstra o ensaio de quimiotaxia de neutrófilos usando um método all-on-chip. O método permite o isolamento direto de neutrófilos do sangue total por seleção imunomagnética negativa seguida de ensaio de quimiotaxia em um chip microfluídico.

Este vídeo demonstra a avaliação de múltiplas ativações de caspase em macrófagos derivados da medula óssea por meio da estimulação com o vírus influenza. Após a lise dos macrófagos, inativação do lisado pelo calor e centrifugação, as caspases intracelulares são coletadas para análise imunológica subsequente.

Este vídeo ilustra um ensaio multiplex baseado em esferas para analisar citocinas em lágrimas humanas. O método permite a análise simultânea de múltiplas citocinas de uma única amostra, proporcionando maior sensibilidade para estudar as respostas imunes em várias condições fisiopatológicas.

Este vídeo demonstra um método para avaliar a aloreatividade em populações mistas de células T, observando interações com células dendríticas portadoras de aloantígenos, levando à formação de sinapses imunológicas. A coloração diferencial e a quantificação de dublês contendo sinapses por citometria de fluxo revelam aloreatividade de células T.

Este vídeo demonstra o uso da citometria de fluxo para identificar e contar várias células imunes no fluido de lavagem broncoalveolar. Inicialmente, células imunes únicas são identificadas usando um corante de viabilidade, seguido pela coloração diferencial de proteínas marcadoras de superfície, permitindo a enumeração precisa de cada tipo de célula.

Este vídeo demonstra um método para caracterizar células T de memória CD8+ específicas para o vírus da imunodeficiência símia (SIV) usando tetrâmeros de classe I do complexo de histocompatibilidade principal peptídico (pMHC-I). Um tetrâmero pMHC-I é um complexo de quatro moléculas de MHC-I ligadas a peptídeos específicos do SIV e conjugadas a um fluoróforo. Esses tetrâmeros se ligam seletivamente aos receptores de células T (TCRs) em células T CD8+ específicas para SIV, facilitando a...

Este vídeo demonstra um ensaio baseado em fluxo laminar para caracterizar a interação de leucócitos e parceiros celulares, como células endoteliais. Este método fornece informações dinâmicas sobre adesão, desadesão e transmigração de leucócitos quando perfundidos sobre uma camada intacta e confluente de células vasculares.

O vídeo demonstra um ensaio para avaliar a atividade de sequestro autofágico em massa em células de mamíferos. Ele utiliza eletroporação para liberar proteínas citosólicas, incluindo lactato desidrogenase (LDH). As frações LDH sequestradas e LDH celular total são determinadas para avaliar o sequestro de LDH, fornecendo informações sobre a atividade geral de sequestro em massa.

Este vídeo demonstra um ensaio baseado em células repórter para triagem de nanopartículas bioativas potenciais que inibem a sinalização do receptor do tipo Toll (TLR). O ensaio envolve a introdução de lipopolissacarídeos (LPS) misturados com híbridos de nanopartículas peptídeo-ouro para macrófagos repórteres que expressam as proteínas repórter - fosfatase alcalina embrionária secretada (SEAP) e luciferase. A redução do sinal TLR induzido por LPS mediado pelos híbridos é determinada pela medição...

Este vídeo demonstra o método para avaliar o impacto da tensão de cisalhamento nas plaquetas. O tratamento com anticorpos induz dissociação e alterações conformacionais nos complexos mecanorreceptores, ativando as plaquetas e expressando marcadores na superfície. Esses marcadores são observados por meio de imunomarcação e citometria de fluxo.

Este vídeo demonstra a medição da resistência elétrica transepitelial em células Caco-2 irradiadas, tanto na presença quanto na ausência de células PBMC. Este método permite o estudo dos efeitos sinérgicos da radiação e das células imunes na barreira celular epitelial.

Este vídeo demonstra um ensaio para estudar a eficiência de reselamento da membrana plasmática em células de mamíferos. As células são expostas a uma toxina bacteriana formadora de poros, que forma poros na membrana celular. Na presença de íons de cálcio extracelulares, o poro causa influxo de cálcio, induzindo eventos de resselamento da membrana. A eficiência de reselagem é avaliada usando corante de iodeto de propídio de ligação ao DNA, que só entra nas células sem uma membrana resselada.

Este vídeo demonstra a coloração imuno-histoquímica para detecção de antígenos do vírus da raiva no tecido cerebral de camundongos infectados. O processo inclui desparafinização e tratamento com álcool, seguido de tratamento proteolítico para aumentar a acessibilidade ao antígeno. A coloração imuno-histoquímica revela precipitados vermelhos, confirmando a presença de antígenos antirrábicos na seção tecidual.

Este vídeo demonstra uma técnica para quantificar a proporção relativa de macrófagos entre o total de populações de células imunes infiltradas na biópsia da artéria temporal. A coloração imuno-histoquímica de uma seção de tecido afetada por doença autoimune mancha seletivamente as células imunes com receptores específicos para diferenciá-las visualmente do resto das células.

Este vídeo demonstra o método de imunoprecipitação de reticulação aprimorada (eCLIP) para identificar proteínas de ligação a RNA em testículos de camundongos. O eCLIP permite a identificação precisa de locais de ligação onde as proteínas de ligação a RNA (RBPs) interagem com seus RNAs alvo.

Este vídeo demonstra um ensaio para analisar células T CD8+ específicas do antígeno em diferentes estágios do ciclo celular. As células viáveis marcadas com fluorescência são selecionadas usando citometria de fluxo, e as células nos diferentes estágios do ciclo celular são identificadas por seu conteúdo de DNA usando anticorpos contra a proteína nuclear associada à proliferação celular e uma coloração de ácido nucleico.

Este vídeo demonstra a citometria de fluxo para medir a captação microglial de biopartículas fluorescentes após a entrega intravítrea em um olho de camundongo. A citometria de fluxo detecta células vivas que expressam CD11b e distingue células da microglia fagocítica exibindo fluorescência verde de outras células mieloides, incluindo monócitos que expressam Ly6C e neutrófilos que expressam Ly6G.

Este vídeo demonstra uma técnica baseada em citometria de fluxo usando dois fluorocromos para identificar células T CD4+ e CD8+, células T γδ, células B, células natural killer (NK) e monócitos em células mononucleares do sangue periférico humano (PBMCs). Ao incubar as células com anticorpos conjugados com fluorocromo contra os marcadores de superfície, os subconjuntos de células são identificados usando uma estratégia ideal de controle citométrico de fluxo.

Este vídeo demonstra imagens de células vivas para a análise da atividade antifúngica em neutrófilos humanos usando conídios repórteres fluorescentes de Aspergillus. Inicialmente, a fluorescência vermelha e magenta é detectada dentro dos neutrófilos, enquanto a fluorescência vermelha diminui com o tempo, indicando a degradação dos conídios e confirmando a atividade antifúngica dos neutrófilos.

Este vídeo demonstra um ensaio para quantificar Salmonella typhimurium citosólica e vacuolar dentro de macrófagos derivados da medula óssea usando permeabilização diferencial. Os macrófagos são infectados com uma Salmonella que expressa proteína fluorescente, que é internalizada dentro de uma estrutura vacuolar especializada chamada vacúolo contendo Salmonella ou SCV. Um subconjunto de bactérias escapa do SCV e entra no citosol. A membrana plasmática rica em colesterol dos macrófagos é...

Este vídeo ilustra um ensaio celular envolvendo células de glioblastoma que expressam receptores de quimiocinas CXCR4. O ensaio emprega um corante sensível ao cálcio para medir as mudanças de fluorescência na interação do agente, oferecendo informações sobre a dinâmica da sinalização celular.

Este vídeo demonstra um ensaio que investiga o papel das células semelhantes a neutrófilos na proteção das células do linfoma contra a citotoxicidade de agentes quimioterápicos. Uma co-cultura 3D, consistindo de linfoma e células semelhantes a neutrófilos, é estabelecida e exposta à vincristina - uma droga quimioterápica. O contato direto com as células semelhantes aos neutrófilos induz uma regulação positiva de proteínas antiapoptóticas nas células do linfoma, promovendo assim sua...

O vídeo demonstra um método imunológico para monitorar in vivo a produção de linfócitos T citotóxicos induzidos por adjuvantes ou CTL. Um camundongo é pré-injetado com linfócitos T CD8 + de doadores proliferativos corados com corante geneticamente modificado. A injeção subcutânea de ovalbumina com adjuvantes gera linfócitos T CD8+ citotóxicos que são identificados pós-colheita por meio de imunomarcação e citometria de fluxo.

O vídeo mostra um ensaio baseado em citometria de fluxo para testar a imunodominância em linfócitos T citotóxicos ou respostas CTL. As células-alvo fluorescentes injetadas exibem fluorescência variável correspondente a epítopos imunogênicos. A coleta e classificação pós-baço revelam uma redução nas células fluorescentes de alta intensidade, confirmando a imunodominância nas respostas CTL.

O vídeo demonstra a análise eletrofisiológica de neurônios derivados de células-tronco embrionárias após exposição a neurotoxinas. O tratamento desses neurônios com neurotoxinas botulínicas reduz a frequência de correntes pós-sinápticas excitatórias espontâneas em miniatura, confirmando a inibição da transmissão sináptica.

O vídeo demonstra a avaliação do impacto do tratamento fotodinâmico na eficiência fagocítica de macrófagos murinos com primaquina. Macrófagos infectados tratados geram espécies reativas de oxigênio, levando à morte seletiva de fungos, evidente pela redução de colônias na placa.

O vídeo demonstra uma técnica para avaliar a influência do tratamento fotodinâmico (PDT) com um fotossensibilizador na atividade metabólica de macrófagos murinos. As células são submetidas a tratamento com o fotossensibilizador seguido de exposição à luz UV, iniciando a PDT. Esse processo aciona o fotossensibilizador para gerar espécies reativas de oxigênio (ROS) dentro das células, causando toxicidade celular. O impacto das ROS é então avaliado por antioxidantes enzimáticos por meio de um...

Este vídeo mostra um método para avaliar o impacto da aspirina e do ibuprofeno, em suas concentrações inibitórias mínimas, na fagocitose de macrófagos usando células fúngicas coradas com corante fluorescente sensível ao pH. As drogas inibem a ciclooxigenase-2, diminuindo a formação de prostaglandinas e aumentando a fagocitose de macrófagos, conforme observado por meio de medições de fluorescência de corantes sensíveis ao pH.

Este vídeo demonstra o isolamento da proteína dos neutrófilos, que é posteriormente processado e digerido em peptídeos menores. Esses peptídeos podem ser usados para análises futuras.

Este vídeo demonstra a purificação de peptídeos por meio do procedimento STAGE Tip. Uma coluna em miniatura contendo grânulos de resina ligados a longas cadeias de hidrocarbonetos facilita a purificação baseada em interação hidrofóbica. Ao carregar uma amostra de peptídeo pré-digerida na coluna, os fragmentos de peptídeo se ligam aos grânulos de resina, permitindo a passagem de impurezas. Um tampão de eluição que interrompe a interação hidrofóbica é aplicado para eluir os fragmentos de...

Este vídeo demonstra um ensaio para medir a citotoxicidade de células natural killer contra células cancerígenas usando a coloração Calcein AM. O número reduzido de células cancerígenas fluorescentes após a co-cultura com células assassinas naturais indica citotoxicidade mediada por células assassinas naturais em relação às células cancerígenas.

Este vídeo demonstra a estimulação in vitro de armadilhas extracelulares de macrófagos (METs) em macrófagos derivados de monócitos humanos usando diferentes estímulos inflamatórios, como TNF-alfa, PMA e HOCL. O vídeo também demonstra o método de coloração com corante SYTOX de METs para visualização.

Este vídeo demonstra a imagem de fluorescência enzimática repórter (REF) para detecção in vivo da infecção por Mycobacterium tuberculosis. Os camundongos infectados são injetados intraperitonealmente com um substrato para imagens REF. Ao ser hidrolisado pela enzima β-lactamase bacteriana, o substrato emite fluorescência, cuja detecção auxilia na avaliação da infecção.

Este vídeo investiga a virulência de Leishmania tratando macrófagos com promastigotas metacíclicos, resultando na formação de amastigotas intracelulares. A confirmação da virulência de Leishmania é obtida através da coloração com corante fluorescente de ácido nucleico. Essa percepção pode contribuir para o desenvolvimento de novas terapias para a leishmaniose.

Este vídeo demonstra um método para avaliar o crescimento intracelular de mutantes de Coxiella marcados com GFP dentro de células epiteliais cultivadas. O fenótipo mutante é visualizado por meio de imunocoloração e microscopia de epifluorescência, permitindo o estudo do efeito da mutação no crescimento intracelular.

Neste vídeo, demonstramos um procedimento para visualizar Porphyromonas gingivalis internalizada, uma bactéria patogênica anaeróbica, dentro de células endoteliais humanas usando microscopia confocal. As bactérias são coradas com um corante fluorescente, enquanto o citoesqueleto de actina da célula endotelial do hospedeiro é marcado com um corante fluorescente diferente. As Porphyromonas gingivalis internalizadas no interior das células endoteliais são visualizadas por microscopia confocal.

Este vídeo demonstra uma técnica para estudar a localização in vivo de anticorpos específicos do tumor em um modelo de xenoenxerto de tumor de camundongo. Após a injeção subcutânea de células cancerígenas em camundongos para a formação de tumores, são injetados anticorpos marcados com fluorescência que se ligam a receptores específicos do tumor, permitindo a avaliação in vivo da localização do anticorpo por meio de imagens.

Este vídeo demonstra uma técnica de imagem in vivo para detectar e quantificar a inflamação ocular em um modelo de camundongo com uveíte pós-infecciosa. A técnica, conhecida como tomografia de coerência óptica (OCT), gera imagens transversais de alta resolução do olho para avaliar a progressão da doença.

Este vídeo demonstra a visualização de bactérias no tecido da bexiga desparafinizado de um paciente infectado pelo trato urinário. A sonda marcada com fluorescência hibridizada com RNAs ribossômicos bacterianos 16s revela as bactérias associadas ao tecido e sua distribuição, fornecendo informações espaciais valiosas sobre sua densidade dentro da amostra.

Este vídeo demonstra o rastreamento do recrutamento de leucócitos usando larvas de peixe-zebra transgênicas que expressam proteína fluorescente verde fotoconversível. A pré-injeção de bactérias marcadas com corante fluorescente vermelho na vesícula ótica e a indução da fotoconversão permitem a observação da migração, fagocitose e dispersão dos leucócitos por todo o corpo, fornecendo informações valiosas sobre a dinâmica da resposta imune.

Este vídeo demonstra a identificação sem rótulos da morfologia e bioquímica dos linfócitos por meio de imagens quantitativas de fase 3D. Essa técnica permite uma análise minuciosa dos linfócitos, descobrindo suas estruturas e propriedades internas sem a necessidade de procedimentos de marcação.

Este vídeo demonstra uma técnica para visualizar a formação da sinapse imunológica em células natural killer (NK) em uma bicamada lipídica (SLB) suportada. O SLB é primeiro marcado com um ligante do receptor ativador de células NK marcado com fluoróforo, seguido de incubação com células NK. Posteriormente, as células são coradas para actina polimerizada e grânulos líticos positivos para perforina. Essa abordagem permite a visualização da formação de sinapses usando microscopia de depleção de...

Este vídeo demonstra uma técnica para visualizar a exocitose em mastócitos. As células são incubadas com FITC-dextrano - um repórter fluorescente - que é absorvido pelas células dentro de grânulos secretores (SGs), onde o pH ácido extingue sua fluorescência. Após a estimulação da exocitose do grânulo, o pH mais alto do meio induz a fluorescência do repórter dentro dos SGs fundidos, que é visualizada usando um microscópio de fluorescência.

O vídeo demonstra uma técnica de dispositivo de ferimento e aprisionamento de peixe-zebra para observar a infecção por patógenos fúngicos marcados com fluorescência em larvas de peixe-zebra. A infecção inicial atrai macrófagos e, à medida que a infecção persiste, o recrutamento de neutrófilos progride no local da injeção.

O vídeo demonstra o uso da fotoconversão para estudar a dinâmica das células inflamatórias em pupas de Drosophila. Os hemócitos verdes são atraídos para o epitélio ferido, seguidos por migração distante. A fotoconversão muda certos hemócitos de verde para vermelho, facilitando o rastreamento de seus movimentos.

Este vídeo demonstra imagens de células vivas da topologia de sinapses imunológicas, investigando as interações entre linfócitos T e células epiteliais que carregam antígenos fluorescentes. A microscopia de fluorescência revela deslocamento do citoplasma vermelho e anéis de membrana amarela nas células endoteliais, indicando a formação de sinapses imunológicas.

Este vídeo demonstra uma técnica de localização por imunofluorescência in vivo (IVIL) para estudar a biodistribuição de anticorpos direcionados ao tumor em um modelo murino de câncer de mama. Após a injeção intravenosa de um anticorpo específico do tumor no camundongo, o tumor é isolado cirurgicamente e a localização do anticorpo dentro do tecido tumoral é confirmada por imunocoloração ex vivo.

Este vídeo demonstra um método para rastrear infecções virais em modelos de camundongos usando um vírus Influenza A bi-repórter recombinante com luciferase e proteína de fluorescência. Este método permite estudos in vivo e ex vivo, permitindo que os pesquisadores obtenham insights sobre a dinâmica viral e os efeitos das intervenções.

Este vídeo demonstra a aplicação da Reação em Cadeia de Hibridização (HCR)-Hibridização In Situ de Fluorescência (FISH) para visualizar a distribuição espacial do RNA subgenômico do SARS-CoV-2. A combinação de HCR com técnicas de imunofluorescência tem o potencial de fornecer informações sobre as interações hospedeiro-vírus no nível de célula única.

Este vídeo demonstra imagens de ressonância plasmônica de superfície localizada para detectar secreções de proteínas de uma única célula. Usando uma configuração microfluídica e um chip de nanoestrutura plasmônica ligado a peptídeos, as mudanças na intensidade da luz refletida no ângulo de ressonância revelam interações com proteínas secretadas de uma única célula.

Este vídeo demonstra o ensaio de microneutralização baseado em imagem para analisar as relações antigênicas entre os vírus influenza A e B. Ele fornece uma maneira quantitativa e visual de avaliar a eficácia de anticorpos ou outros tratamentos na prevenção da infecção viral.

Este vídeo demonstra um ensaio in vivo projetado para medir a fagocitose bacteriana em moscas Drosophila adultas. Após a injeção de bactérias marcadas com fluorescência no abdômen de moscas adultas, os hemócitos associados ao vaso dorsal se envolvem em fagocitose. A introdução do corante azul de tripano serve para extinguir a fluorescência emitida por bactérias extracelulares não fagocitadas. Este processo de têmpera melhora a identificação de bactérias fagocitadas quando observadas sob um...

O vídeo demonstra um método para avaliar as forças do receptor aplicadas por células imunes usando nanopartículas de ouro ancoradas em polietilenoglicol e sondas de tensão de gancho de cabelo de DNA. As interações de células T CD8-positivas desencadeiam o desdobramento da sonda, emitindo fluorescência enquanto as fitas de bloqueio sustentam o sinal para quantificar as forças aplicadas pelas células imunes.

Este vídeo demonstra um método colorimétrico de detecção de E. coli, envolvendo um biomarcador de E. coli ativando um DNAzyme, levando à clivagem da ligação de RNA e ao desprendimento de um conjugado DNAzyme-urease. Um ensaio colorimétrico subsequente detecta o biomarcador E. coli por meio de alterações de pH induzidas por amônia.

Este vídeo demonstra um ensaio para estudar a regulação da tradução em células infectadas por poxvírus. Células não infectadas e infectadas por vírus foram co-transfectadas com mRNAs que codificam para luciferase de vaga-lume (Fluc) e luciferase de Renilla (Rluc), com o mRNA de Fluc contendo uma sequência líder de 5 'Poly (A). Ao adicionar substratos bioluminescentes em células lisadas, medir o sinal de ambas as luciferases para identificar a vantagem translacional do mRNA Fluc em células...

Este vídeo mostra a microscopia quantitativa de lapso de tempo para avaliar a disseminação de Listeria monocytogenes dependente da rigidez da matriz extracelular através de células endoteliais. Um hidrogel mais macio facilita a disseminação bacteriana mais rápida através das células endoteliais em comparação com contrapartes mais rígidas, destacando a influência da rigidez da matriz na disseminação bacteriana.

Este vídeo demonstra uma técnica de microscopia de fluorescência de reflexão interna total (TIRF) de alta resolução para visualização em tempo real da formação e fechamento de fagossomos durante a fagocitose mediada por macrófagos de glóbulos vermelhos opsonizados (RBCs) opsonizados por IgG presos à superfície de um prato de fundo de vidro. Os macrófagos estendem os pseudópodes ao redor das hemácias e os engolfam dentro dos fagossomos, destacando-os da superfície do vidro.

Este vídeo descreve a imagem de células T CD8 infiltrantes de tumor residentes marcadas com anticorpos acoplados fluorescentemente em fatias de tumor de pulmão humano. Essa técnica permite análises em tempo real da migração de células T CD8 por meio de microscopia confocal.

Este vídeo demonstra um ensaio de imunofluorescência projetado para medir a neutralização do citomegalovírus humano (HCMV). Anticorpos específicos do vírus são misturados com o vírus e incubados com células de fibroblastos humanos. Os anticorpos neutralizam o vírus, tornando-o incapaz de infectar as células hospedeiras, enquanto os vírus não neutralizados infectam as células. Após a incubação, a extensão da neutralização é determinada quantificando as células infectadas pelo vírus usando...

Este vídeo demonstra a quantificação do teor de sódio em tecidos humanos usando ressonância magnética de sódio (23Na-MRI). A perna do paciente é colocada dentro da bobina de radiofrequência (RF) da máquina e uma sequência tridimensional de gradiente-eco é realizada. Imagens de ressonância magnética multinuclear são geradas usando núcleos de hidrogênio e sódio para quantificar os níveis de sódio em vários tecidos.

Este vídeo demonstra um método para estabelecer um modelo de infecção de organoides gástricos por microinjeção do patógeno gástrico Helicobacter pylori no lúmen dos organoides. Este modelo ajuda no estudo das alterações induzidas por infecções nas células gástricas.

Este vídeo demonstra o desenvolvimento de um modelo de camundongo in vivo para estudar a formação de biofilme de Candida albicans no tecido subcutâneo. O experimento envolve a implantação de dispositivos infectados com Candida na região posterior do animal para o desenvolvimento de biofilme.

Este vídeo demonstra o desenvolvimento da doença enterocolite necrosante em um modelo enteróide neonatal de origem humana induzido pelo tratamento com lipopolissacarídeos. Este modelo ajuda a estudar a fisiopatologia intestinal.

Neste vídeo, demonstramos um procedimento de corte de cauda em um modelo de camundongo para coletar sangue periférico. O sangue coletado é posteriormente submetido à centrifugação para separar o plasma, que pode ser usado para experimentos posteriores.

Este vídeo demonstra um método para induzir a apoptose nas células Jurkat - uma linha celular de leucemia de linfócitos T humanos. As células são expostas à radiação ultravioleta C (UVC), que causa extensos danos ao DNA e leva à morte celular apoptótica.

Neste vídeo, descrevemos um procedimento para inflar pulmões humanos isolados com agarose e preparar cortes de pulmão humanos cortados com precisão. As fatias de pulmão ex vivo preparadas podem ser usadas para outros experimentos imunológicos.

Este vídeo ilustra uma técnica para avaliar a citotoxicidade em fatias de pulmão humanas cortadas com precisão por meio do ensaio WST-1. Fatias de pulmão humanas cortadas com precisão são submetidas a concentrações incrementais de um produto químico citotóxico para quantificar sua citotoxicidade. Uma diminuição na intensidade da cor serve como confirmação do impacto prejudicial do produto químico nas células pulmonares.

Este vídeo demonstra o isolamento e a concentração de proteínas filtradas de cultura bacteriana, que incluem vesículas extracelulares bacterianas, usando ultrafiltração. As vesículas extracelulares concentradas servem como marcadores diagnósticos para a detecção de doenças.

Este vídeo demonstra a técnica de cromatografia de exclusão de tamanho (SEC) para purificar vesículas extracelulares bacterianas (EVs) do filtrado de cultura de Mycobacterium tuberculosis (Mtb). A técnica utiliza uma coluna porosa embalada com resina para obter frações purificadas de EVs. As partículas porosas permitem seletivamente que proteínas menores entrem nos poros, resultando em eluição mais lenta. Ao mesmo tempo, os EVs são excluídos de entrar nos poros devido ao seu tamanho maior e são...

Este vídeo demonstra o ensaio de inibição do crescimento de plântulas na planta Arabidopsis thaliana. O impacto do aumento da concentração de peptídeo imune elicitor no crescimento das mudas é determinado.

Este vídeo demonstra um ensaio para avaliar a eficácia de medicamentos contra a infecção por Mycobacterium tuberculosis (Mtb). É gerado um modelo de infecção in vitro contendo agregados de Mtb/macrófagos que mimetiza a infecção in vivo. Após a introdução de antibióticos adequados, sua eficácia é testada por meio do ensaio de resuzarina para monitorar a sobrevivência das bactérias com o aumento das concentrações de drogas.

O vídeo demonstra um procedimento para quantificar o vírus Zika em vários órgãos de camundongos por meio de um ensaio de formação de foco. O processo envolve a infecção de monocamadas de células de mamíferos com homogeneizados de tecidos infectados por vírus, seguido pelo uso de metilcelulose para prevenir a disseminação viral. Posteriormente, a imunocoloração é empregada para permitir a quantificação e medição precisas da infectividade específica do órgão.

Este vídeo demonstra a detecção de bactérias lácticas produtoras de bacteriocina derivadas de matéria fecal de camundongos. O ensaio determina a atividade antimicrobiana da bacteriocina em cepas bacterianas específicas.

Este vídeo demonstra o processo de redução de patógenos à base de riboflavina e luz UV contra a contaminação bacteriana de alto título em produtos plaquetários humanos. Esse processo pode ajudar a diminuir o risco de eventos adversos graves de transfusão associados à contaminação bacteriana.

Este vídeo demonstra a medição in vitro da atividade enzimática da α-galactosidase A e da α-glicosidase ácida em amostras usando substratos sintéticos de 4-metilumbeliferil.

Este vídeo demonstra um ensaio in vitro para rastrear compostos antifúngicos usando um ensaio de microdiluição em caldo. Os compostos de teste são diluídos em série em uma placa de microtitulação e incubados com um inóculo fúngico. Após a incubação, a placa é examinada em busca de poços sem crescimento fúngico visível para avaliar o potencial antifúngico dos compostos de teste e sua concentração inibitória mínima (CIM).

Este vídeo demonstra um ensaio in vitro para explorar a influência imunomoduladora das células-tronco mesenquimais (MSCs) na proliferação de células T efetoras. O ensaio inclui a co-cultura de MSCs com PBMCs para induzir a população de monócitos a adquirir um fenótipo imunomodulador, levando à secreção de interleucina-10 (IL-10). Após a incubação com células T CD4+ ativadas, os monócitos induzidos suprimem efetivamente a proliferação de células T.

O vídeo demonstra um método para investigar o impacto das células estromais no recrutamento de leucócitos. Em um modelo de câmara de fluxo de placas paralelas, citocinas pró-inflamatórias induzem a expressão de receptores de adesão pelas células endoteliais, facilitando o recrutamento e a migração de neutrófilos. A conversa cruzada entre células estromais e células endoteliais diminui o recrutamento de neutrófilos para as células endoteliais.

Este vídeo descreve um método para cultivar e analisar qualitativamente biofilmes bacterianos em hifas fúngicas usando microscopia. Os biofilmes bacterianos freqüentemente se formam em superfícies fúngicas e envolvem vários processos de interação bactéria-fungo, como cooperação metabólica, competição ou predação.

Este vídeo demonstra um ensaio para monitorar eventos independentes de fagocitose de glóbulos vermelhos mediados por macrófagos. As hemácias humanas opsonizadas com imunoglobulina G (IgG) de camundongo são incubadas com macrófagos de camundongo e observadas em microscópio confocal. As hemácias são engolfadas por macrófagos por meio de uma formação de copo fagocítico e direcionadas para degradação lisossômica.

Este vídeo demonstra um método para estudar a migração de células natural killer (NK) através de um sistema de inserção de membrana porosa em resposta a quimioatraentes. Este método permite a análise quantitativa da migração de células NK usando citometria de fluxo.

Este vídeo demonstra uma técnica para avaliar a atividade bactericida mediada por complemento de anticorpos presentes no soro. Essa abordagem combina soro isolado com bactérias patogênicas e proteínas exógenas do complemento. Após a incubação, as bactérias são cultivadas em uma placa de ágar e as colônias produzidas são quantificadas para medir o título bactericida sérico.

O vídeo demonstra um ensaio de inibição da hemaglutinação para detectar anticorpos séricos contra antígenos específicos. A confirmação da inibição da hemaglutinação no poço de teste e da hemaglutinação no poço de controle é obtida por meio de padrões visuais distintos. Este ensaio desempenha um papel crucial na avaliação da resposta imune, na eficácia da vacina e no estudo de infecções virais em virologia e imunologia.

Este vídeo demonstra um ensaio para investigar a citotoxicidade de proteínas produzidas por Staphylococcus aureus, uma bactéria patogênica, em leucócitos polimorfonucleares humanos isolados (PMNs). As proteínas citotóxicas secretadas formam poros na membrana celular do PMN, iniciando a morte celular. Ao corar as células mortas usando iodeto de propídio, a citometria de fluxo é realizada para quantificar as células mortas e avaliar a citotoxicidade das bactérias.

Neste vídeo, demonstramos um ensaio para detectar a citotoxicidade de cepas virulentas e menos virulentas de Staphylococcus aureus contra neutrófilos humanos após fagocitose usando citometria de fluxo.

Este vídeo demonstra uma técnica para avaliar a capacidade de Porphyromonas gingivalis, uma bactéria patogênica anaeróbica, de aderir e invadir células endoteliais da veia umbilical humana (HUVECs). Depois de infectar as células hospedeiras com as bactérias, as células hospedeiras são lisadas para liberar bactérias aderidas e internalizadas. Quando o lisado é plaqueado em um meio apropriado, a presença de colônias indica interações bactéria-célula hospedeira bem-sucedidas.

O vídeo mostra um ensaio de morte opsonofagocítica in vitro usando uma co-cultura de neutrófilos humanos com Streptococcus pneumoniae. Anticorpos e proteínas do complemento facilitam a opsonização da bactéria, permitindo que os neutrófilos reconheçam e matem bactérias, mostrando atividade opsonofagocítica de neutrófilos bem-sucedida.

Neste vídeo, demonstramos um ensaio para avaliar a sobrevivência de Porphyromonas gingivalis dentro de células endoteliais humanas. A medida de sobrevivência e crescimento de Porphyromonas gingivalis internalizadas é avaliada pelo número de colônias na placa de ágar sangue.

Este vídeo demonstra uma técnica in vitro para medir a capacidade citotóxica das células assassinas induzidas por citocinas (CIK) contra células cancerígenas. Após a co-cultura de células-alvo cancerígenas com células CIK, as células cancerígenas mortas são identificadas usando um corante de viabilidade fluorescente e são quantificadas usando citometria de fluxo, estimando o efeito citotóxico das células CIK.

Neste vídeo, demonstramos um ensaio utilizando microscopia de fluorescência para detectar a adesão de células cancerígenas a armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs). Nos poços de teste, há um aumento notável no número de células cancerígenas marcadas com fluorescência que aderem aos TNEs, enquanto os poços tratados com DNase exibem adesão reduzida de células cancerígenas aos TNEs.

Este vídeo demonstra a lactato desidrogenase, ensaio de LDH para medir o efeito citotóxico de uma substância de teste e seu efeito na integridade da membrana em fatias de pulmão humanas de corte de precisão. O ensaio fornece uma medida quantitativa da morte ou dano celular na amostra.

Este vídeo demonstra a triagem de compostos imunomoduladores por meio de ensaio baseado em fluorescência. Linfócitos T derivados de camundongos transgênicos com de expressão de proteína fluorescente verde são tratados com esses compostos. Os sinais GFP aprimorados e reduzidos permitem a identificação dos efeitos estimulatórios e inibitórios dos compostos, respectivamente.

Este vídeo mostra a avaliação da ativação das células B através da utilização de lipossomas antigênicos. As células B tratadas com corante Indo-1 sensível ao cálcio são distinguidas usando citometria de fluxo e sua relação de fluorescência violeta-azul é analisada. À medida que as células encontram lipossomas antigênicos, ela desencadeia a ativação das células B por meio do influxo de cálcio, aumentando progressivamente a proporção do sinal de fluorescência violeta para azul ao longo do tempo.

Este vídeo demonstra um método para quantificar a infecção fúngica em larvas de peixe-zebra. Os esporos de fungos são microinjetados no ventrículo larval do rombencéfalo e as larvas são incubadas para permitir o desenvolvimento da infecção. As larvas infectadas são colhidas em intervalos definidos e o progresso da infecção é avaliado pela enumeração das unidades formadoras de colônias.

Este vídeo demonstra um ensaio de opsono-aderência para examinar a interação entre bactérias opsonizadas e células imunes. Bactérias marcadas com fluorescência, tratadas com soro de teste contendo anticorpos anticápsula, são incubadas com macrófagos. Após a coloração dos macrófagos com fluorescência, as bactérias aderidas na superfície dos macrófagos são observadas ao microscópio para visualização.

Este vídeo demonstra uma técnica de imunoensaio multiplex baseada em esferas para detectar simultaneamente anticorpos para vários patógenos ambientais na saliva humana. Grânulos fluorescentes foram acoplados a antígenos de diferentes patógenos, que foram capturados usando anticorpos na amostra de saliva humana. Ao marcar os anticorpos usando um repórter fluorescente, as esferas foram analisadas usando citometria de fluxo para avaliar a presença de diferentes anticorpos específicos do patógeno...

Este vídeo demonstra um método para quantificar a fagocitose de esporos de fungos patogênicos marcados com FITC por leucócitos humanos. Os esporos fagocitados são discernidos dos esporos aderentes às células por meio de contracoloração, seguida de análise por citometria de fluxo.

Este vídeo demonstra um ensaio para caracterizar e quantificar grânulos de estresse de mamíferos, que consistem em mRNAs, proteínas de ligação a RNA (RBPs) e várias outras proteínas.

Este vídeo demonstra o ensaio para confirmar a atividade fagocítica das células no sangue humano por meio da citometria de fluxo. Os granulócitos e monócitos confirmam sua atividade fagocítica mostrando fluorescência verde e vermelha, confirmando a presença de bactérias engolfadas e atividade de explosão oxidativa, respectivamente.

Este vídeo demonstra a quantificação dos níveis de mediador imunológico no extrato fluido de revestimento da mucosa nasal humana neonatal. Um sistema de ensaio multiplex baseado em eletroquimioluminescência mede esses mediadores avaliando a intensidade da luz emitida quando eles são excitados.

Este vídeo demonstra um ensaio para rastrear a atividade proteolítica de proteases usando peptídeos fluorogênicos. A protease reconhece seu local de clivagem no peptídeo, clivando-o e separando o supressor do fluoróforo, permitindo sua emissão de fluorescência. O sinal de fluorescência é detectado e analisado para verificar a eficiência de clivagem de diferentes variantes de peptídeos.

Este vídeo demonstra um ensaio de fagocitose baseado em citometria de fluxo envolvendo eritrócitos infectados por Plasmodium falciparum marcados e opsonizados por monócitos. A citometria de fluxo identifica fluorescência em monócitos, confirmando a identificação bem-sucedida de eritrócitos opsonizados por meio de fagocitose.

Este vídeo demonstra um ensaio in vitro para quantificar a atividade da serina protease de neutrófilos em amostras de escarro. A amostra contendo protease secretada é incubada com um repórter fluorescente com um motivo de reconhecimento. A clivagem do motivo pela protease permite a emissão de fluorescência individual pelo fluoróforo doador e aceitador do repórter, indicando a atividade da protease na amostra.

Este vídeo mostra um ensaio de apoptose em células cancerígenas induzidas por células T efetoras pré-ativadas. Ao co-cultivar essas células com células cancerígenas marcadas com núcleos fluorescentes, um substrato fluorogênico clivável por caspase é adicionado. As células cancerígenas apoptóticas exibirão uma cor diferente em seus núcleos, levando à fluorescência dupla. Essa fluorescência dupla é indicativa de células cancerígenas sofrendo apoptose.

Este vídeo demonstra ensaios de microneutralização para medir anticorpos neutralizantes usando células renais caninas Madin-Darby que superexpressam ácido siálico ligado a α2,6 em soros humanos. Este ensaio é frequentemente usado para sorologia humana para...

Este vídeo demonstra um ensaio para medir a explosão oxidativa em folhas de Arabidopsis após a elicitação imunológica. Os discos foliares, cortados das folhas das plantas, são incubados com peptídeos bacterianos que funcionam como padrões moleculares associados a micróbios ou MAMPs. Após a detecção dos MAMPs, as células vegetais induzem a produção de ROS extracelular, que é detectada usando um ensaio de quimioluminescência.

Este vídeo demonstra um ensaio para detecção em tempo real da produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) em tecidos de arroz após a elicitação do padrão molecular associado a patógenos (PAMP). Os segmentos da bainha cortada e os discos das folhas são expostos a um peptídeo derivado de flagelos bacterianos que funciona como um PAMP. Após o reconhecimento do peptídeo por meio de receptores de reconhecimento de padrões (PRRs) nas células vegetais, ocorre uma produção rápida e transitória de...

Este vídeo mostra um ensaio de monocamada de monócitos utilizando monócitos primários do sangue periférico para avaliar a fagocitose mediada por receptor Fcγ com glóbulos vermelhos R2R2 opsonizados por anticorpos poli D.

Este vídeo mostra o Ensaio de Resazurina de Ágar Carvão (CARA) para avaliar a atividade de compostos antimicrobianos contra Mycobacterium tuberculosis. O CARA auxilia na avaliação da eficácia desses compostos, medindo seu impacto no crescimento bacteriano e distinguindo entre efeitos bactericidas e bacteriostáticos.

Este vídeo demonstra um ensaio para examinar a atividade dependente do receptor toll-like (TLR) dos fatores de transcrição fator nuclear kappa-B (NF-κB) e proteína ativadora-1 (AP-1) em macrófagos. Os TLRs desencadeiam uma cascata de sinalização pró-inflamatória ao reconhecer padrões moleculares associados a danos (DAMPs), ativando NF-κB e AP-1. Os macrófagos repórteres modificados produzem a enzima fosfatase alcalina embrionária secretada (SEAP) após a ativação de NF-κB e AP-1, que é detectada...

Este vídeo demonstra um método para monitorar a atividade das células T CAR contra células cancerígenas por meio de medições de impedância elétrica em tempo real. O rastreamento de mudanças na impedância avalia a eficácia das células T CAR na indução da citólise de células cancerígenas, fornecendo informações sobre suas capacidades citotóxicas.

Este vídeo demonstra uma técnica para avaliar a eficácia de anticorpos contra o fator de necrose tumoral alfa (TNFα), uma citocina inflamatória, por meio de uma abordagem bioanalítica in vitro. O TNFα, quando introduzido nas células estressadas, desencadeia a apoptose. No entanto, a ligação aos anticorpos limita o TNFα, evitando a apoptose. O grau de apoptose é quantificado usando um ensaio de bioluminescência.

Este vídeo demonstra um ensaio baseado em MoDC de células dendríticas derivadas de monócitos para medir a imunogenicidade de vacinas disponíveis comercialmente. Os ensaios do MoDC investigam as respostas das células dendríticas a antígenos, patógenos ou tratamentos e podem fornecer informações sobre respostas imunes, desenvolvimento de vacinas e pesquisa de imunoterapia.

Este vídeo demonstra o ensaio de distúrbio de hemócitos, avaliando a readesão de hemócitos nas bolsas hematopoiéticas de larvas de Drosophila. O distúrbio mecânico libera hemócitos residentes, elevando a contagem de hemócitos circulantes. Após a recuperação, a readesão dos hemócitos residentes é confirmada, ilustrando a reversibilidade.

Este vídeo demonstra um ensaio para medir o realce dependente de anticorpos (ADE) da infecção pelo vírus da dengue usando o soro convalescente do vírus Zika. O ensaio usa partículas virais repórter da dengue (RVPs) que codificam uma proteína fluorescente verde. Os anticorpos séricos contra o vírus Zika reagem de forma cruzada com RVPs para formar um complexo. Os anticorpos ligados aumentam a captação de RVP pelas células que expressam o receptor Fc, que é detectado por citometria de fluxo.

Este vídeo demonstra um ensaio para quantificar o crescimento intracelular de parasitas em macrófagos derivados da medula óssea (BMMs). As células de macrófagos estão infectadas com os estágios invasivos móveis e imóveis de Leishmania, promastigotas metacíclicos e amastigotas, respectivamente. Os parasitas invadem os macrófagos, internalizando-se em um vacúolo parasitóforo e se multiplicando em seu interior. O crescimento do parasita intracelular é quantificado usando um microscópio após a...

Este vídeo demonstra o ensaio de liberação de corante para quantificar a atividade enzimática de proteínas antimicrobianas. A proteína antimicrobiana degrada a parede celular marcada com corante da bactéria e libera as moléculas de corante tornando a solução azul. A absorbância da solução se correlaciona com a atividade enzimática da proteína antimicrobiana.

Este vídeo demonstra um ensaio de placa pontual adaptado para avaliar as respostas ao estresse oxidativo de cepas bacterianas. Algumas cepas produzem piomelanina, um pigmento antioxidante. Por outro lado, as cepas tratadas com um agente de teste, levando à redução da produção de piomelanina, exibem maior suscetibilidade ao estresse oxidativo, resultando em diminuição da viabilidade celular em comparação com as cepas produtoras de piomelanina.

Este vídeo demonstra um ensaio em caldo para determinar a eficácia do antibiótico contra o Mycobacterium tuberculosis. A cultura bacteriana é incubada com diferentes concentrações de um antibiótico bactericida. A eficácia bactericida é medida avaliando a presença de bactérias viáveis usando um ensaio de resazurina.

Este vídeo demonstra um ensaio para triagem de compostos antimicrobianos que eliminam biofilmes com eficiência usando uma placa de pino. A metodologia monitora o estado metabólico do biofilme após o tratamento com compostos antimicrobianos, facilitando a determinação da concentração mínima de erradicação do biofilme.

Este vídeo destaca um método proteômico de célula única que emprega anticorpos conjugados com metais pesados para código de barras de células distintas. Posteriormente, a imunocoloração e a citometria de massa são aplicadas para avaliar alterações fenotípicas e funcionais imunes em células imunes derivadas do sangue total humano.

Este vídeo demonstra um ensaio para monitorar a migração de células dendríticas após infecção da pata com Mycobacterium bovis Bacille Calmette-Guérin BCG em camundongos. Após a infecção bacteriana, as células DC da pele ativadas são marcadas com um corante de éster succinimidílico de diacetato de carboxifluoresceína permeável a células (CFSE). Após um intervalo adequado para a migração da DC para o linfonodo de drenagem poplítea, as células do linfonodo são isoladas e submetidas à...

Este vídeo ilustra a reconstituição de células apresentadoras de antígenos sintéticos por meio de bicamadas lipídicas suportadas por grânulos e sua aplicação na avaliação da saída sináptica gerada por células T ativadas.

Este vídeo mostra o ensaio de inibição do crescimento diferido, usado para investigar como os compostos antimicrobianos produzidos por um tipo de bactéria afetam outra cepa bacteriana concorrente.

Este vídeo demonstra a análise turbidimétrica para avaliar a agregação plaquetária induzida por colágeno em plaquetas humanas pré-tratadas e lavadas. Os poços de controle mostram agregação induzida por colágeno, enquanto uma alta concentração de inibidores bloqueia os canais de anexina-1, inibindo assim a agregação plaquetária induzida por colágeno, evidente pela turbidez inalterada.

Este vídeo demonstra o ensaio de inativação viral, mostrando a avaliação do impacto dos agentes antivirais nas partículas virais.

Este vídeo demonstra um ensaio de fixação viral para triagem de compostos antivirais. Usando o vírus da hepatite C geneticamente modificado e a luciferase, ele avalia os efeitos inibitórios na fixação viral, conforme indicado pela menor intensidade de luz em poços co-tratados em comparação com poços tratados apenas com o vírus.

Este vídeo demonstra um ensaio para avaliar agentes antivirais que visam etapas específicas da entrada viral nas células hospedeiras e fusão com o endossomo. As células são incubadas a baixa temperatura e depois infectadas com HCV. A baixa temperatura permite a ligação viral às células hospedeiras, mas inibe a internalização via endocitose. O composto antiviral de teste é adicionado e as células são incubadas à temperatura fisiológica. Essa mudança para uma temperatura mais alta facilita a...

O vídeo demonstra um ensaio para quantificar os vírus influenza A e B. Este ensaio emprega amplificação de endonuclease de corte com primers específicos para influenza e detecção de alvos usando sondas de farol molecular.

Este vídeo demonstra um método baseado em placas de microtitulação para determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM) de antibióticos de teste contra bactérias. Ao adicionar uma suspensão do patógeno bacteriano Pseudomonas aeruginosa a uma placa de microtitulação contendo diluições seriadas de um antibiótico de teste e um inibidor da produção de piomelanina pela bactéria, a densidade óptica dos poços é medida para calcular a concentração inibitória mínima do antibiótico e o impacto do...

Este vídeo demonstra um ensaio para estudar o efeito da rigidez da matriz extracelular (MEC) na infecção bacteriana de células aderentes. Hidrogéis de poliacrilamida de rigidez variável, revestidos com colágeno, são colocados em camadas em uma placa de vários poços para imitar a rigidez da ECM fisiológica. Ao sobrepor células endoteliais humanas nos hidrogéis e infectar as células com bactérias Listeria monocytogenes projetadas para expressar uma proteína fluorescente uma vez intracelular, a...

Este vídeo demonstra o método para realizar um ensaio de placa usando um vírus obtido da córnea suína infectada. A córnea suína é usada para testar a eficácia antiviral de drogas experimentais.

Este vídeo ilustra o início da formação de biofilme polimicrobiano em células infectadas por vírus por bactérias e fungos. A infecção pelo vírus herpes simplex impede a ligação bacteriana às células, impedindo a co-localização bacteriano-fúngica. Em contraste, as células não infectadas exibem co-localização bacteriano-fúngica e início da formação de biofilme.

Este vídeo descreve o ensaio simples de medição de ATP usando o reagente de brilho de luciferase. Este ensaio é usado para quantificar a sobrevida de Neisseria gonorrhoeae após o tratamento com ceftriaxona.

Este vídeo ilustra um ensaio baseado em citometria de fluxo para quantificar células cancerígenas senescentes induzidas por terapia com marcadores de senescência duplos. A detecção e quantificação de células senescentes envolvem o uso de um substrato de β-galactosidase. O substrato é clivado por β-galactosidase lisossômica ativa dentro das células senescentes, produzindo um produto fluorescente que, em conjunto com grânulos de lipofuscina autofluorescentes, marca as células cancerígenas...

Este vídeo demonstra uma técnica para detectar contaminantes bacterianos em amostras de alimentos e água usando nanossensores. As bactérias patogênicas alvo são detectadas por meio de uma combinação de relaxamento magnético e modalidades de emissão de fluorescência.

O vídeo demonstra um ensaio de aderência em fase sólida para avaliar a formação de biofilme. Em uma placa de vários poços, as bactérias em meios suplementados com sais biliares aderem a superfícies sólidas, formando biofilmes, o que é confirmado por colorimetria por meio de coloração com cristal violeta e tratamento com etanol.

Este vídeo demonstra um método baseado em fluorescência para quantificar a formação de biofilme induzida por sais biliares. Após a adição de sais biliares na cultura de uma bactéria entérica patogênica, a produção de biofilme é detectada usando uma lectina fluorescente que se liga aos polissacarídeos na matriz de substância polimérica extracelular (EPS) do biofilme.

O vídeo mostra um ensaio de dispersão de biofilme usando uma placa de vários poços. O tampão e o tratamento com glicose desmontam o biofilme, liberando bactérias, enquanto os sais biliares induzem o estresse, retendo as bactérias na substância polimérica extracelular protetora. Maior dispersão com tampão e glicose confirma a desmontagem bem-sucedida do biofilme, estimada pela medição das unidades formadoras de colônias.

Este vídeo demonstra um ensaio em tempo real para monitorar o pH extracelular em biofilmes odontológicos usando uma sonda raciométrica sensível ao pH. Quando um biofilme bacteriano cultivado in situ é exposto à glicose, uma redução no pH extracelular próximo à biomassa bacteriana protona a sonda, levando ao aumento de sua concentração dentro da bactéria. A disparidade no comprimento de onda de emissão entre a sonda protonada e a não protonada é utilizada para calcular o pH através da matriz...

O vídeo demonstra um ensaio de citometria de fluxo de transferência de energia de ressonância de fluorescência (FRET) para detectar a atividade de semeadura de agregados de proteínas isolados de amostras biológicas. Células de mamíferos que expressam proteínas repórter de tau são incubadas com complexos de transdução de lipossomas contendo sementes de tau. Essas sementes medeiam a agregação das proteínas repórteres, levando à geração de um sinal positivo de FRET no citômetro de fluxo.

Este vídeo demonstra a detecção bacteriana quantitativa multiplexada empregando microesferas de poliestireno magnético carboxilado tingidas em conjuntos distintos. O procedimento engloba a formação de complexos de bactérias, separação magnética e análise baseada em fluxo, permitindo a quantificação precisa e simultânea de várias bactérias no mesmo poço de reação.

Este vídeo mostra um ensaio de neutralização que mede a eficácia do soro na neutralização do vírus SARS-CoV-2. Envolve vírus pseudotipados, diluição do soro e quantificação baseada em luminescência, revelando o título de neutralização.

Este vídeo demonstra um ensaio para monitorar a ativação de neutrófilos e a exocitose de grânulos por meio de um ensaio de degranulação. Após a ativação por compostos pró-inflamatórios, os grânulos citoplasmáticos dentro de neutrófilos contendo gelatinase se fundem com a membrana celular, descarregando sua carga. A presença de gelatinase no sobrenadante é avaliada através da hidrólise de um substrato de gelatina conjugado com fluoróforo, confirmando a ativação e degranulação dos neutrófilos.

Este vídeo demonstra um ensaio de degranulação de grânulos azurofílicos em neutrófilos de camundongos, envolvendo a estimulação de neutrófilos para liberar grânulos azurofílicos contendo mieloperoxidase. A reação enzimática subsequente é empregada para quantificar os níveis de mieloperoxidase, fornecendo informações sobre a ativação de neutrófilos.

Este vídeo demonstra um procedimento para coletar urina de camundongo e avaliar seus níveis de glicose. Para avaliar o nível de glicose, mergulhe uma tira de teste revestida com enzimas e um corante cromogênico na amostra, iniciando uma mudança de cor que indica os níveis de glicose. Para quantificar os níveis de glicose na urina, introduza uma amostra de urina em uma placa multipoços com concentrações crescentes de glicose, adicione a mistura de reação e incuba. Meça a absorbância para criar...