Gerando um modelo de camundongo BLT (medula óssea, fígado, timo) duplamente humanizado

Resumo

Fonte: Daharsh, L. et al., Um modelo de camundongos BLT duplamente humanizados com um microbioma intestinal estável semelhante ao humano e sistema imunológico humano.J. Vis. Exp. (2019)

Este vídeo demonstra o método para gerar um camundongo BLT ósseo humanizado duplo (medula, fígado e timo) com um sistema imunológico humano funcional e um microbioma intestinal humano enxertado estável.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Alojamento e manutenção de ratos

1. Compre camundongos NSG de 6 a 8 semanas (NOD.Cg-Prkdc^scidIl2rg^tm1Wjl/SzJ).
2. Aloje os camundongos em condições de FPS com troca de ar, pré-filtros e filtros de ar particulado de alta eficiência (HEPA) (0,22 μm) em uma sala com temperatura, umidade e pressão controladas.
   1. Alojar e manter os camundongos em gaiolas de microisoladores individuais autoclavadas em um si....

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Agulhas de alimentação animal 18G	Ciência da cadência	9928B
Ativador Clidox-s	Laboratórios de Pesquisa Farmacêutica	95120F
Base Clidox-s	Laboratórios de Pesquisa Farmacêutica	96125F
Rack de gaiola DGM 108	Techniplast
Saco de supermercado marrom liso 3-5/8"D x 6"W x 11-1/16"L	Grainger	12R063
Preparações de Microbiota FMT Upper Delivery	Bioma aberto	FMP30
Kool-Aid de Uva	Kraft Foods Inc.
hCD19-PE/Cy5	Biolenda	302209
hCD3-PE	Biolenda	300408
hCD4-Alexa 700	Biolenda	300526
hCD45-FITC	Biolenda	304006
hCD8-APC/Cy7	Biolenda	301016
Solução de Ringer tamponada com lactato	Boston BioProducts Inc	PY-906-500
mCD45-APC	Biolenda	103111
Microvette 100 K3E	Microvette	20.1278.100
Neosporina Antibiótico de Primeiros Socorros / Pomada para Alívio da Dor	Neosporina
Os camundongos NSG (NOD. cg-prkdcscidIl2rgtm1Wjl/szJ)	O Laboratório Jackson	Rolamento 5557
Agulha PrecisionGlide 25 G	Bd	305127
Irradiador de raios X RS200	Tecnologias de origem RAD
Gaiolas microisoladas Sealsafe Plus GM500	Techniplast
Gaze não tecida estéril	Marca de pescador	22-028-558
Ração de rato irradiada com 16% de proteína global da Teklad	Teklad	Nº 2916