Registro da atividade neural do tecido hipocampal desdobrado usando matriz de microeletrodos penetrantes

Resumo

Fonte: Zhang, M., et al. Propagação da Atividade Neural em uma Preparação Desdobrada do Hipocampo com uma Matriz de Microeletrodos Penetrantes. J. Vis. Exp. (2015).

Este vídeo demonstra o procedimento para configurar uma câmara de gravação com um conjunto de microeletrodos penetrantes (PMEA) para capturar sinais neurais de um hipocampo desdobrado. Este método nos permite estudar a velocidade e a direção da propagação da atividade neural dentro do hipocampo desdobrado in vitro.

Protocolo

Todos os procedimentos que envolvem amostras de animais foram revisados e aprovados pela revisão ética animal apropriada.

1. Soluções para Cirurgia e Gravação Experimental

1. Prepare um tampão normal de líquido cefalorraquidiano artificial (aCSF) contendo (mM) NaCl (cloreto de sódio) 124, KCl (cloreto de potássio) 3,75, KH₂PO₄ (di-hidrogenofosfato de potássio) 1,25, MgSO₄ (sulfato de magnésio) 2, NaHCO₃ (bicarbonato de sódio) 26, Dextrose 10 e CaCl₂ (cloreto de cálcio) 2. Use este aCSF normal para a recuperação do tecido após a dissecção e para o sistema de lav....

Resultados

Figura 1. Configuração experimental. (A) Uma tampa de plástico com parafusos é colocada sobre os circuitos para protegê-la contra possíveis danos causados pela água. A câmara de registro possui tubos de entrada e saída para transportar o fluxo da solução. Uma âncora de tecido feita sob medida colada com uma malha de fibra de nylon é usada para proteger o tecido durante os experimentos. (B) <.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
pincel pequeno	Lowe's	tem #: 105657 Modelo #: 90219	Aquele com o menor tamanho em um pacote de pincel normal
Ferramenta de ajuda de vidro polido a fogo	N/A	N/A	Esta ferramenta foi polida a fogo e feita a partir das pipetas de vidro Pasteur regulares.
Agulha de vidro feito-à-medida	N/A	N/A	Esta ferramenta foi polida a fogo e feita a partir das pipetas de vidro Pasteur regulares.
Ferramenta de vidro feita sob medida com um laço de fio de metal	N/A	N/A	Esta ferramenta foi polida a fogo e feita a partir das pipetas de vidro Pasteur regulares com um laço de fio de metal remodelado.
Conta-gotas de solução de vidro feito sob medida	N/A	N/A	Esta ferramenta foi feita a partir das pipetas de vidro Pasteur regulares com suas pontas cortadas e uma cabeça de borracha presa com a extremidade cortada.
Âncora de tecido personalizada	N/A	N/A	A malha de fibra de nylon foi colada em um anel de fio de cobre isolado. A âncora de tecido foi segurada por um micromanipulador.
Matriz de microeletrodos fabricada sob medida	N/A	N/A	Mais detalhes sobre a matriz, consulte Kibler, et al, 2011.
Circuitos de filtro e amplificadores personalizados para a matriz	N/A	N/A	Mais detalhes sobre a matriz, consulte Kibler, et al, 2011.
Processador de aquisição de dados 3400a	Laboratórios Microstar	N/A	Este é um sistema completo de aquisição de dados com conversor A/D.