Artigo de método

Preparando um modelo de rato para avaliar a integridade da via visual usando uma configuração de eletrofisiologia

8 de julho de 2025

Neste artigo

Resumo

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Fonte: Nguyen, C. T. et al., Registro simultâneo de eletrorretinografia e potenciais evocados visuais em ratos anestesiados.J. Vis. Exp. (2016)

Este vídeo demonstra a preparação de um modelo de rato para estudar a saúde da retina e a integridade das vias visuais. O potencial evocado visual e a referência de eletrorretinografia e os eletrodos ativos são conectados ao rato, seguidos pelo alinhamento da plataforma com o rato na frente da tigela de Ganzfeld para iluminação retiniana uniforme e fechamento da gaiola de Faraday para evitar interferência externa.

Protocolo

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Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. Pré-implante de eletrodos de potencial evocado visual crônico (VEP)

NOTA: Se os sinais simultâneos de eletrorretinograma (ERG) e VEP forem coletados, os animais devem ser implantados cirurgicamente com eletrodos de VEP pelo menos 1 semana antes da coleta do sinal.

  1. Esterilize a bancada cirúrgica antes da experimentação limpando com clorexidina (0,5% em etanol a 70%). Autoclave todo o equipamento cirúrg....

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Divulgações

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Não há conflitos de interesse declarados.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Clipe jacaréMarca genéricaHM3022Clipe de aço inoxidável de 26 mm para conectar eletrodos de parafuso VEP a cabos
BioamplificadorADInstrumentsML 135Para amplificar sinais ERG e VEP
Carboximetilcelulose sódica 1,0%AllerganCAS 0009000-11-7Fluido viscoso para melhorar a qualidade do sinal do eletrodo ERG ativo
Carprofeno 0,5%Grupo de Saúde Animal PfizerCAS 53716-49-7Nome proprietário: Rimadyl injetável (50 mg/mL). Para analgesia pós-cirúrgica, diluída a 0,5% (5 mg/mL) em soro fisiológico
Clorhexadina 0,5%Laboratórios Orion27411, 80085Para desinfecção de instrumentos cirúrgicos
Banho-maria circulanteLauda-KönigshoffenMGW LaudaPara manter a temperatura corporal do animal anestesiado durante a cirurgia e registros eletrofisiológicos
Amálgama dentárioDeguDent GmbH64020024Para envolver o conjunto eletrodo-crânio para torná-lo mais robusto
Broca dentáriaInstrumentos Storz, Bausch e Lomb#E0824AUma cabeça de broca em miniatura de ~ 0,7 mm de diâmetro para fazer um pequeno orifício no crânio sobre cada hemisfério para implantar parafusos VEP
brocaBoschSérie Dremel 300Uma broca automática para trepanação
EletrodoTelefator de grama F-E2-30Cabos de platina para conectar eletrodos de fio de prata ao amplificador
Gaiola de Faradaysob medidaGarante à prova de luz para manter a adaptação ao escuro. Inclui a configuração Ganzfeld para melhorar a relação sinal-ruído
Cotonetes de gazeProdutos Médicos Multigate Pty Ltd57-100BPara secar a incisão cirúrgica e a superfície exposta do crânio durante a cirurgia
Esfera integradora de GanzfeldSoluções Fotométricas InternacionalEstimulador de luz personalizado: 36 mm de diâmetro, tamanho de abertura de 13 cm
VELCROVELCRO Austrália Pty LtdEnvoltório reutilizável da marca VELCROFecho de velcro para prender os eletrodos e o animal na plataforma de gravação
Isoflurano 99,9%Abbott Australásia Pty LtdCAS 26675-46-7Nome proprietário: Anestésico por inalação Isoflo(TM). Anestésico inalatório de grau farmacêutico misturado com gás oxigênio para cirurgia de implante de eletrodo VEP
Cetamina Laboratórios TroyIlium KetamilNome proprietário: Ketamil Injection, Marca: Ilium. Anestésico de grau farmacêutico para registro eletrofisiológico
LEDs LuxeonPhillips Iluminação Co.Para estimulação de luz vinte LEDs de 5 watts e um de 1 watt.
MicromanipuladorAparelho de HarvardBS4 50-2625Mantém o eletrodo ativo ERG durante as gravações
Eletrodo de agulhaTelefator de grama F-E2-30Inserido subcutaneamente na cauda para servir como eletrodo de aterramento para o ERG e o VEP
Fenilepfrina 2,5% mínimos Bausch e LombCAS 61-76-7Instilado com Tropicamida para obter dilatação máxima para gravação de ERG
Iodopovidona 10%Sanofi-AventisCAS 25655-41-8Nome proprietário: Betadine, Anti-séptico para preparar a pele raspada para cirurgia 10%, 500 mL
Sistema de aquisição de dados PowerlabADInstrumentsML 785Controla os LEDs
Proxymetacaína 0,5%Laboratórios Alcon CAS 5875-06-9Para anestesia da córnea durante gravações de ERG
Solução salinaGelflexNão injetável, para galvanoplastia de eletrodos de fio de prata
Software de escopoADInstrumentsVersão 3.7.6Aciona simultaneamente o estímulo através do sistema Powerlab e coleta dados
Prata (fio redondo fino)A&E metal0,3 milímetrosUsado para fazer eletrodos ERG ativos e inativos e o eletrodo VEP inativo
Parafusos de aço inoxidável MicroFasternersEixo de 0,7 mm de diâmetro, 3 mm de comprimento para ser implantado sobre o córtex visual primário e servir como eletrodos VEP ativos
Quadro estereotáxicoDavid KopfModelo 900Um instrumento estereotáxico de pequenos animais para localizar os córtices visuais primários de acordo com as coordenadas do atlas do cérebro de ratos de Paxinos & Watson de 2007
Lâmina cirúrgicaSwann-Morton Ltda.206Para incisão na área da pele que cobre o córtex visual primário para implantar os eletrodos VEP
suturaXangai Pudong Jinhuan Medical Products Co., LtdSutura trançada de seda 3-0 não absorvível, para retração da pele durante a cirurgia de implante de eletrodo VEP
Pomada para os olhos de tobramicina 0,3%Laboratórios Alcon CAS 32986-56-4Nome próprio: Tobrex. Pomada antibiótica profilática aplicada ao redor da ferida cutânea após a cirurgia
Tropicamida 0,5%Laboratórios Alcon CAS 1508-75-4Nome proprietário: 0,5% de colírio de midriacil, instilado para obter midríase para gravação de ERG
xilazinaLaboratórios TroyÍlio xilazil-100Anestésico de grau farmacêutico para registro eletrofisiológico
Ponta de pipeta Eppendorf Pty LtdNº 0030 073.169Eppendorf epTIPS 100 - 5000 mL, para eletrodos feitos sob medida
Injeção de eutanásia de lethabarboVirbac (Austrália) Pty LtdLETHA450325 mg/mL de pentobarbital sódico para eutanásia rápida
Microsoft Office ExcelMicrosoftVersão 2010Software de planilha para análise de dados

Reimpressões e permissões

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Visual Evoked PotentialsElectroretinographyGanzfeld BowlFaraday CageRat ModelElectrode PlacementDark AdaptationKetamine XylazineCorneal LubricationGround Electrode

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