Modulação sináptica em Drosophila após exposição à luz prolongada

Resumo

Fonte: Sugie, A., et al. Analisando a modulação sináptica dos fotorreceptores de Drosophila melanogaster após exposição à luz prolongada. J. Vis. Exp. Acessórios (120)

Este vídeo demonstra a criação de Drosophila melanogaster sob condições de luz específicas para estudar o papel das proteínas Bruchpilot na liberação de neurotransmissores e a modulação resultante da atividade sináptica.

Protocolo

1. Condições de exposição à luz

1. Desde a fase de larva até à eclosão, manter as moscas num ciclo de 12 h de luz / 12 h de escuridão (LD) a 25 °C (figura 1A).
2. Colete as moscas 0 - 6 h após a eclosão e coloque-as em um novo frasco contendo comida para moscas.
3. Coloque os frascos em uma prateleira de resina acrílica transparente com três etapas (uma altura de 41 cm, uma base de 21 cm, uma espessura de 4 cm e uma altura de 13 cm para cada etapa) (Figura 1B).
4. Ajuste a distância entre o rack e um painel de LED para fornecer iluminação com uma intensidade média de 1.000 lux usando um medidor de luz digital (Figura 1C).
5. Manter as moscas durante 1 a 3 dias numa das seguintes condições: escuridão constante (DD), ciclo de 12 h de luz/12 h de escuridão (LD) ou luz constante (LL) a 25 °C numa pequena incubadora (figuras 1A e 1C).

Resultados

Figura 1: Preparação das condições para exposição à intensidade de luz definida. (A) Protocolos de exposição à luz após a eclosão. DD, escuridão contínua; LD, 12 h claro/12 h escuro; LL, exposição constante à luz. Os cérebros das moscas foram dissecados nos tempos indicados entre parênteses (Adaptado de uma publicação anterior9). (B) Os frascos são alinhados em um rack transparente de acrílico person...

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
frasco	Hightech, Japão	MKC-20
ficha	Thermo Fisher Sciehtific, EUA	AS-275
Rack transparente personalizado feito de resina acrílica	Shin-Shin Corporation, Japão		uma altura de 41 cm, uma base de 21 cm, uma espessura de 4 cm e uma altura de 13 cm para cada degrau
Incubadora legal	MITSUBISHI ELECTRIC, Japão	CN-40A
Painel de LED	MISUMI, Japão	LEDXC170-W
Medidor de luz digital	CEM	DT-1301
Almofada de mosca	Tokken, Japão	TK-HA03-S