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Todos os procedimentos envolvendo participantes humanos foram realizados em conformidade com as diretrizes institucionais, nacionais e internacionais para o bem-estar humano e foram revisados pelo conselho de revisão institucional local.
1. Participantes
- Recrute pacientes neurocirúrgicos com epilepsia intratável que estão sendo submetidos à colocação de eletrodos intracranianos para localizar suas crises epilépticas.
- Insira eletrodos de profundidade com microfios embutidos em todos os locais-alvo clinicamente indicados, que normalmente incluem um subconjunto de amígdala, hipocampo, córtex cingulado anterior e área motora pré-suplementar. Veja detalhes para implantação em nosso protocolo anterior.
- Assim que o paciente retornar à unidade de monitoramento de epilepsia, conecte o equipamento de gravação para macro e micro registros. Isso inclui preparar cuidadosamente um envoltório de cabeça que inclua estágios de cabeça. Em seguida, aguarde que o paciente se recupere da cirurgia e realize testes quando o paciente estiver totalmente acordado (normalmente pelo menos 36 a 48 horas após a cirurgia).
2. Configuração experimental
- Conecte o computador de estímulo ao sistema de eletrofisiologia e ao rastreador ocular seguindo o diagrama da Figura 1.
- Use o sistema remoto de rastreamento ocular infravermelho não invasivo (consulte a Tabela de Materiais). Coloque o sistema de rastreamento ocular em um carrinho móvel robusto (Figura 1A, B). No mesmo carrinho, conecte um braço flexível que segura uma tela de cristal líquido (LCD). Use o modo remoto para rastrear a cabeça e os olhos do paciente.
- Coloque uma fonte de alimentação ininterrupta (UPS) totalmente carregada no carrinho de rastreamento ocular e conecte todos os dispositivos relacionados ao rastreamento ocular (ou seja, LCD na frente do paciente, câmera e fonte de luz do rastreador ocular e computador host do rastreador ocular) ao no-break em vez de a uma fonte de alimentação externa.
- Ajuste a distância entre o paciente e a tela LCD para 60-70 cm e ajuste o ângulo da tela LCD para que a superfície da tela fique aproximadamente paralela ao rosto do paciente. Ajuste a altura da tela em relação à cabeça do paciente de forma que a câmera do rastreador ocular fique aproximadamente na altura do nariz do paciente.
- Forneça ao paciente a caixa de botões ou o teclado. Verifique se os gatilhos (lógica transistor-transistor, TTL) e o pressionamento de botão foram registrados corretamente antes de iniciar o experimento.
3. Gravação de neurônio único
- Inicie o software de aquisição. Primeiro, inspecione visualmente os potenciais de campo local de banda larga (0,1 Hz - 8 kHz) e certifique-se de que eles não estejam contaminados pelo ruído da linha. Caso contrário, siga os procedimentos padrão para remover o ruído.
- Para identificar neurônios individuais, filtre o sinal (300 Hz - 8 KHz). Selecione um dos oito microfios como referência para cada feixe de microfios. Teste diferentes referências e ajuste a referência para que (1) os outros 7 canais mostrem neurônios claros e (2) a referência não contenha neurônios. Defina a faixa de entrada para ser ± 2.000 μV.
- Habilite salvar os dados como um arquivo NRD (ou seja, o arquivo de dados brutos de banda larga que será usado para classificação de pico off-line subsequente) antes de gravar os dados. Defina a taxa de amostragem para 32 kHz.
4. Acompanhamento ocular
- Inicie o software de rastreamento ocular. Por ser um sistema livre de fixação da cabeça, coloque o adesivo na testa do paciente para que o rastreador ocular possa se ajustar aos movimentos da cabeça.
- Ajuste a distância e o ângulo entre o rastreador ocular e o paciente para que o marcador alvo, a distância da cabeça, a pupila e o reflexo da córnea (CR) sejam marcados como prontos (conforme mostrado em verde no software de rastreamento ocular; A Figura 2 mostra um bom exemplo de tela de configuração da câmera). Clique no olho a ser gravado e defina a taxa de amostragem para 500 Hz.
- Use o ajuste automático da pupila e do limiar CR. Para pacientes que usam óculos, ajuste a posição e/ou o ângulo do iluminador e da câmera para que os reflexos do vidro não interfiram na aquisição da pupila.
- Calibre o rastreador ocular com o método de grade de 9 pontos integrado no início de cada bloco. Confirme se as posições dos olhos (mostradas como "+") são bem registradas como uma grade de 9 pontos. Caso contrário, refaça a calibração.
- Aceite a calibração e faça a validação. Aceite a validação se o erro máximo de validação for < 2° e o erro médio de validação for < 1°. Caso contrário, refaça a validação.
- Faça a correção de desvio e prossiga para o experimento real.
5. Tarefa
- Nesta tarefa de busca visual, use os estímulos de nosso estudo anterior e siga o procedimento da tarefa conforme descrito anteriormente.
- Forneça instruções de tarefas aos participantes. Instrua os participantes a encontrar o item de destino na matriz de pesquisa e responda o mais rápido possível. Instrua os participantes a pressionar o botão esquerdo de uma caixa de resposta (consulte Tabela de Materiais) se encontrarem o alvo e o botão direito se acharem que o alvo está ausente. Instrua explicitamente os participantes de que haverá ensaios alvo-presente e alvo-ausente.
- Inicie o software de apresentação de estímulos (consulte a Tabela de Materiais) e execute a tarefa: Apresente uma sugestão alvo por 1 s e apresente a matriz de pesquisa usando o software de apresentação de estímulos. Grave o pressionamento de botões e forneça feedback tentativa a tentativa (Correto, Incorreto ou Tempo Limite) aos participantes.
