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Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.
1. Inserção do implante coclear (IC) Feixe de eletrodos
NOTA: O feixe de eletrodos intracocleares consiste em quatro bandas de platina (Ø0.2 mm) com fio isolado de platina/irídio parileno blindado em um tubo de silicone (Figura 1).
- Coloque a ferramenta retratora na incisão para acessar novamente a bula.
- Insira o feixe de eletrodos na janela redonda (escala do tímpano) a uma profundidade onde o 4º anel de platina esteja localizado dentro da janela redonda. Isso dá uma profundidade de inserção de ~2 mm, correspondendo a uma posição intracoclear em ~30 kHz.
- Enrole o fio condutor dentro da bula e cole o fio no tecido acima da bula. Enrolar o fio ajuda a manter a matriz no lugar durante todo o experimento.
- Remova cuidadosamente o retrator e feche a inserção com cola de tecido.
- Faça uma pequena incisão (0,5 mm) no pescoço perpendicular à linha entre onde os eletrodos de resposta auditiva de tronco encefálico (PEATE) ativo e de referência estarão usando uma tesoura de tecido. Coloque a bola de platina moída na bolsa subcutânea e feche a pequena incisão com cola de tecido (Figura 2).
- Conecte a placa de matriz de eletrodos à Plataforma Estimuladora Animal (ASP).
2. Resposta Auditiva Elétrica do Tronco Encefálico (eABR)
NOTA: Uma plataforma estimuladora animal é usada para estimular eletricamente o feixe de eletrodos. Outras fontes de corrente e sistemas de software podem ser usados.
- Limpe os eletrodos ABR com solução de etanol a 70%. Coloque os eletrodos sob a pele: ativo (Ch1) no vértice, referência (-) abaixo do pavilhão auricular da orelha ipsilateral e retificado na perna traseira (Figura 2).
- Abra o software ASP e defina o paradigma de estimulação por pulso elétrico. Usamos um pulso bifásico balanceado por carga com 50 μs/fase e 10 μs de intervalo interfásico apresentado a 23,3 pulsos por segundo (pps). A estimulação elétrica é fornecida em uma configuração de eletrodo monopolar com níveis crescentes de corrente. Um total de 400 respostas são calculadas em cada nível atual.
- Apresente os trens de pulso elétricos e registre a resposta eABR evocada continuamente por meio do headstage, pré-amplificador e processador auditivo da Tucker Davis Technologies (TDT).
- Plote e analise os dados do eABR por meio de um script Matlab personalizado (Figura 3). O roteiro e um exemplo de gravação são fornecidos no Suplementar.