Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.
1. Leitão
- Pegue um leitão agarrando-o pela perna ou pelo tórax. Segure-o e esteja ciente de qualquer defecação ou micção.
- Se necessário, marque o leitão com um número.
- Enrole o leitão em uma toalha. O leitão vai se acalmar. Esteja ciente do superaquecimento do leitão.
- Segure o leitão com uma mão no corpo ou antebraço. Use a outra mão para segurar o focinho. Esteja ciente do superaquecimento do leitão e certifique-se de que ele esteja livre para respirar adequadamente.
2. Eletrodos
- Peça a uma segunda pessoa que conecte os eletrodos.
- Limpe a pele da sujeira com água ou etanol. Se necessário, raspe a cabeça.
- Remova todas as células mortas da pele com um gel abrasivo de eletroencefalograma (EEG) e uma ponta de qualidade (Q). Remova o gel abrasivo depois. Como alternativa, use uma lixa.
- Fixe os eletrodos autoadesivos no local desejado. Coloque o eletrodo de aterramento acima do cerebelo (entre as orelhas) e o eletrodo de referência no nariz. Coloque o eletrodo de gravação no local desejado.
nota: Nesse caso, foi realizado um registro unipolar porque a referência foi colocada em uma posição neutra (nariz). Não existe um sistema padronizado disponível para leitões até o momento. Aqui, uma posição de registro parietal foi usada (entre o olho e a orelha) no hemisfério direito do cérebro.
- Conecte os cabos à unidade de telemetria. Ligue a unidade. Dependendo do sistema de telemetria usado, pode ser um interruptor magnético ou um sinal de despertar por radiofrequência.
- Cubra a unidade de telemetria e todos os cabos, bem como todos os eletrodos, com borracha de silicone adesiva de dois componentes (consulte a Tabela de Materiais). Ao misturar quantidades iguais de ambos os componentes, o tempo de cura estará na faixa de 1 min. Olhos e cílios não devem ser cobertos com a borracha.
- Aguarde até que a borracha de silicone esteja completamente curada.
- Coloque o leitão de volta no chiqueiro.
- Observe o leitão para ver se ele está mostrando sinais de desconforto por um longo período de tempo (vários minutos).
3. Medição
- Espere até que o leitão se recupere e comece a sincronizar seu comportamento com o de seus irmãos (alimentando, brincando, dormindo), geralmente após 30 s (Figura 1).
- Aguarde as fases do sono, se desejar. O tempo de gravação depende da questão científica específica. Aqui, foram utilizadas sessões de gravação de 10 minutos.
- Se a unidade de telemetria estiver coberta por mais de 2 outros leitões, o sinal pode estar muito baixo para o receptor. Empurre suavemente os leitões para longe se eles estiverem dormindo em cima. Esteja ciente da porca; pode reagir agressivamente.
- Inicie a gravação com o software de aquisição de dados (consulte Tabela de Materiais).
4. Terminar
- Após a gravação (geralmente várias horas), pegue o leitão novamente, conforme descrito na etapa 1. Esteja ciente da porca; pode reagir agressivamente.
- Levante suavemente a borracha de silicone em uma das bordas. Em seguida, remova todo o remendo de borracha de silicone contendo os eletrodos e a unidade de telemetria. Tenha cuidado com os olhos do leitão.
- Coloque o leitão de volta no chiqueiro.
