Avaliando os efeitos das toxinas no desenvolvimento da rede neural de embriões de galinha usando matrizes de multieletrodos

1. Registrando a atividade da rede neuronal

1. No dia da aquisição, troque o meio de cultura por meio neurobasal fresco e devolva os MEAs à incubadora de CO₂ por um período mínimo de 2 h antes do registro. Inicie o software de gravação e defina a temperatura do MEA para 37 °C clicando no ícone de temperatura.
   nota: A gravação pode começar já no dia 3 do revestimento e pode continuar enquanto as culturas estiverem vivas.
2. Configure os parâmetros de aquisição clicando com o botão direito do mouse no ícone "Muse" (em Streams no painel esquerdo da janela) e selecione "Adicionar processamento" e "Detector de pico" e clique em OK na janela pop-up. "Detector de pico (6 x STD)" aparecerá abaixo do nome do arquivo.
3. Em seguida, clique com o botão direito do mouse no Spike Detector, selecione "Adicionar processamento" e "Burst Detector" e clique em OK na janela pop-up. "Burst Detector" (ISI) aparecerá abaixo do ícone do Muse.
4. Em seguida, clique com o botão direito do mouse em Burst Detector, selecione "Adicionar processamento" e "Compilador de estatísticas neurais". Na janela pop-up, certifique-se de que File Header, Aggregated Well Statistics e Synchrony estejam selecionados. Clique em OK. "Compilador de estatísticas" aparecerá abaixo.
   nota: Isso definirá o cruzamento de limiar adaptativo (filtro 6x STD), o intervalo entre picos em 100 ms com um número mínimo de picos em 5, a detecção da taxa média de disparo em 10 s com um parâmetro de sincronia em 20 ms e a taxa mínima de pico em 0,083333 picos por minuto.
5. Configure a gravação programada para o tempo de gravação de 5 minutos (300.000 ms) clicando no ícone do relógio na parte inferior. Isso é conseguido alterando as informações na seção de configuração para gravar a cada 5.1 minutos e gravar por 5 minutos. Isso será iniciado imediatamente e será executado uma vez.
6. Certifique-se de que a temperatura do MEA atingiu 37 °C antes de mover o MEA. Remova o MEA da incubadora, coloque-o na unidade de gravação e trave o MEA. Comece a gravar a atividade de rede clicando em iniciar gravação na seção de gravação agendada ou no ícone de gravação na janela "File Play". Normalmente, um tempo de gravação de 5 minutos (300.000 ms) é suficiente, embora gravações mais longas de até 10 minutos possam ser obtidas.
7. Após a gravação, devolva o MEA à incubadora.
   nota: Deve-se tomar cuidado para manter a esterilidade e minimizar o tempo que o MEA fica fora da incubadora.