Estabelecendo um modelo de rato com hemorragia subaracnóidea induzida por injeção autóloga de sangue

Resumo

Fonte: Bömers, J. et al. Pré-quiasmático, injeção única de sangue autólogo para induzir hemorragia subaracnóidea experimental em um modelo de rato. J. Vis. Exp. (2021)

Este vídeo demonstra o procedimento para estabelecer um modelo de rato com hemorragia subaracnoide. Um rato anestesiado é implantado com sondas para medir a pressão intracraniana e o fluxo sanguíneo cerebral. O local alvo é identificado e a agulha é inserida em uma posição pré-quiasmática. O sangue autólogo é então injetado no espaço subaracnóideo, aumentando a pressão intracraniana e diminuindo o fluxo sanguíneo cerebral, estabelecendo o modelo.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Preparativos

1. Modifique um cateter de veia periférica de 16 G para intubação. Para modificar, encurte a agulha em 1 cm e dobre o restante distal 1 cm em 30° em direção à válvula de injeção. Remova as asas do cateter (uso múltiplo).
2. Para fazer uma sonda de pressão intracraniana ou PIC, corte um pedaço de tubo de polietileno de 20 mm (diâmetro interno (ID): 0,58 mm, diâmetro externo (OD): 0,96 mm) e queime uma extrem....

Resultados

Figura 1: Visão geral da configuração antes da indução da HSA. Do topo da imagem, observe que 1) agulha de injeção, 2) sonda laser-Doppler e 3) a sonda ICP estão todas no lugar.

Figura 2: Traço de amostra após injeção intratecal. O gráfico vermelho mo.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Cateter de veia periférica 16 G	BD Venflon	393229	Agulha encurtada, distal 1 cm curvada. Asas removidas
Campânula / câmara de anestesia	desconhecido
Analisador de gases sanguíneos	Radiometer	ABL80
Monitor de pressão arterial (PA)	Adinstruments	Ponto ML117	Conecta-se ao Powerlab
Pinça curva, 12 cm x 3	F.S.T	11001-12	Para anestesia
Almofada cilíndrica, 28 cm x 4 cm	caseiro		Feito de toalhas cirúrgicas
Hardware de aquisição de dados	Adinstruments	ML870 Powerlab
Software de aquisição de dados	Adinstruments	LabChart 6.0
broca	KMD	1189
Controlador de perfuração	Silfradent	300 EM
Luz flexível	Schott	KL200
Almofada de aquecimento	Minco	1135
Agulha hipodérmica, 20 G	KD Médico	Rolamento 301300	Conecta-se ao quadro estereotáxico
Monitor de PIC	Adinstruments	Ponto ML117	Conecta-se ao Powerlab
Vaporizador de isoflurano	Ohmeda	TEC3
computador portátil	Lenovo	T410
Monitor Doppler a laser	Adinstruments	Ponto ML191
Sonda doppler a laser	Oxford Optrônica	MSF100XP	Conecta-se ao monitor doppler a laser
Porta-agulhas, 13 cm	F.S.T	12001-13	Para anestesia
Seringa de precisão, 0,025 mL	Hamilton	547407
Quadro estereotáxico	Instrumentos Kopf	M900
Microscópio cirúrgico	Carl Zeiss	F170
Agulha de sutura	Allgaier	1245	Para anestesia
Controlador de temperatura	CWE, INC.	TC-1000
Transdutor x 2	Adinstruments	MLT0699	Conecta-se ao monitor de PA e PIC
Ventilador	Ugo Basile	Nº 7025
Tosquiadeira veterinária	Aesculap	GT421
Afastador de Blair de 3 pontas, 13,5 cm	Agnthos	17022--13
Afastador de Alm sem corte	F.S.T	17008-07
Pinça curva, 12 cm x 2	F.S.T	11001-12
Porta-agulhas, 13 cm	F.S.T	12001-13
Pinça Dumont reta, 11 cm	F.S.T	11252-00
Hemostático Halsted-Mosquito reto x 2	F.S.T	13008-12
Tesoura de íris reta, 9 cm	F.S.T	14090-09
Tesoura reta Vannas, 10,5 cm	F.S.T	Rolamento 15018-10
Cotonetes absorvíveis	Kettenbach	Rolamento 31603
Fio de seda preto, 4-0, 5 x 15 cm	Vömel	Rolamento 14757
Cera óssea	Aesculap	1029754
Gel para os olhos carbômero 2 mg/g	Paranova
cotonete	Heinz Herenz	WA-1
Aplicador com ponta de algodão x 4	Selefa	120788
Agulha hipodérmica, 23 G x2	KD Médico	900284	Conecta-se à torneira. Remover extremidade distal
Agulha hipodérmica, 23 G x3	KD Médico	900284	Remova a extremidade distal. 2 conecta-se à torneira, 1 à seringa
Sonda ICP:	caseiro		Composto pelo seguinte:
Tubo de polietileno, 20 mm	Smiths médico	800/100/200	Diâmetro interno (ID): 0,58 mm, Diâmetro externo (OD): 0,96 mm.
Tubo de silicone, 10 mm	pescador	15202710	ID: 0,76 mm, OD: 2,4 mm.
Tubo de silicone, 2 mm	pescador	11716513	ID: 1,0 mm, OD: 3,0 mm.
Tubos de micro hematócrito	marca	Nº 7493 11
Toalha OP, 45 cm x75 cm	Mölnlycke	Rolamento 800430
Adaptador PinPort, 22 G	Instech	PNP3F22
Injetor PinPort	Instech	PNP3M
Tubo de polietileno, 2 x 20 cm	Smiths médico	800/100/200	Conecta-se à seringa. ID: 0,58 mm, OD: 0,96 mm.
Elástico	desconhecido
Bisturi, 10 lâminas	Kiato	23110
Agulha espinhal, 25 G x 3,5 ''	Braun	Rolamento 5405905-01
Sistema de torneira, Discofix x 2	Braun	16494C	Conecta-se ao transdutor
Sutura, 4-0, monofil, não reabsorvível x 3	Ética	EH7145H
Seringa, 1 mL	BD Plastipak	1710023
Seringa, luer-lock, 10 mL x 4	BD Plastipak	305959	Conecta-se ao transdutor
Cola adesiva para tecidos	3m	1469SB
0,5% de aguardente de clorexidina	Faaborg Pharma	210918
Carprofeno 50 mg/mL	ScanVet	Nº 43715	Diluído 1:10
Isoflurano	Baxter
Solução salina isotônica	Amgros	Rolamento 16404
Lidocaína-Adrenalina 10 mg/5 μg/mL	Amgros	Rolamento 16318