Técnica para induzir convulsões pós-traumáticas em um modelo de camundongo por meio de uma lesão traumática por queda de peso

Neste artigo

Resumo

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Procedimento de queda de peso

Coloque o mouse em uma câmara de indução. Defina o fluxo de oxigênio e vácuo para 1 L/min e o nível de gás isoflurano para 3% −5%. Anestesiar o mouse por 5 min.
Remova o mouse da câmara de indução e coloque-o em uma almofada de espuma. Teste a ausência de resposta a um beliscão no dedo do pé ou na cauda.
Administre um analgésico (0,1 mg / kg de buprenorfina) por via subcutânea. Se a cirurgia de eletroencefalografia (EEG) for realizada no mesmo dia, administre a buprenorfina por via subcutânea em combinação com o anti-inflamatório não esteróide carprofeno (5 mg / kg).
Administrar a solução de lactato de sódio (3 μL por grama de peso do animal) por via subcutânea antes ou depois do último impacto. A solução de lactato de sódio pode ser misturada com os analgésicos para administração rápida em uma única injeção.
NOTA: A solução de lactato de sódio contém uma mistura de cloreto de sódio, cloreto de potássio, cloreto de cálcio e lactato de sódio em água. Esta etapa ajuda a repor fluidos e eletrólitos, auxiliando na recuperação.
Posicione a cabeça do rato sob o tubo de queda de peso (Figura 1A) e coloque um disco plano de aço inoxidável (1,3 cm de diâmetro, 1 mm de espessura e 880 mg de peso) no centro da cabeça, entre a linha dos olhos e das orelhas.
NOTA: Este disco difunde o impacto pela superfície do crânio (Figura 1B).
Remova o pino no tubo de queda de peso para liberar a haste de peso de 100 g de uma altura de 50 cm. Para induzir a lesão simulada nos camundongos de controle, remova a haste de peso do tubo para evitar a liberação acidental do pino e a queda de peso.
NOTA: A cabeça do animal deve ser posicionada plana, de modo que a haste caia livremente em toda a superfície do disco.
Coloque o animal inconsciente de costas para recuperação em uma almofada de aquecimento coberta com uma toalha absorvente esterilizada poliforrada. O tempo de recuperação do reflexo de endireitamento (ou seja, o tempo que o mouse leva para se endireitar de costas) pode ser medido como uma leitura do tempo gasto inconsciente.

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Resultados

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Figura 1: O modelo de camundongo de lesão cerebral traumática difusa repetitiva (TCE). (A) Dispositivo de queda de peso. (a1) Tubo de queda de peso. (a2) Uma haste de peso de 100 g. (a3) Pino segurando a haste. (a4) Corda para levantar a haste se alterar a altura ou remover a haste do tubo de queda de peso. (