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Expressão do gene correlacionar com o comportamento das células deve ser feito preferencialmente ao nível de uma única célula. No entanto, este não é facilmente alcançado porque a pequena quantidade de mRNA lábil presente em uma única célula (1-5% de 1-50pg RNA total, ou 0,01 2.5pg-mRNA, por célula 1) na maior parte degrada antes que possa ser transcrito reverso em uma cópia estável cDNA. Por exemplo, usando reagentes de laboratório padrão e hardware, apenas um pequeno número de genes podem ser avaliados qualitativamente por célula 2. Uma maneira de aumentar a eficiência do padrão reverso laboratório transcriptase (RT) reações (reagentes ou seja padrão em volumes microlitro) compreendendo uma única célula quantidades de mRNA seria mais rapidamente misturar os reagentes de modo que o mRNA pode ser convertido em cDNA antes que ele se degrada. No entanto, este não é trivial, pois em escalas microlitro fluxo de líquido é laminar, isto é, métodos atualmente disponíveis de misturar (isto é, agitação, vórtex e trituração) deixar de produzir movimento caótico suficiente para efetivamente misturar reagentes. Para resolver este problema, micro-escala de técnicas de mixagem tem que ser usado 3,4. Uma série de microfluídicos tecnologias baseadas em mistura, foram desenvolvidas com sucesso aumentar o rendimento de reação RT 5-8. No entanto, as tecnologias de microfluídica requerem hardware especializado que é relativamente caro e ainda não amplamente disponível. Uma solução mais barata, mais conveniente é desejável. O objetivo principal deste estudo é demonstrar como a aplicação de uma nova técnica "micromixing" a norma reações laboratório RT composto de uma única célula quantidades de mRNA aumenta significativamente sua produção de cDNA. Encontramos rendimentos cDNA aumentar em cerca de 1-10 vezes, o que permite: (1) um maior número de genes a ser analisados por célula; (2) uma análise mais quantitativa da expressão do gene, e (3) melhor detecção de baixa abundância genes em células individuais. O micromixing é baseado em acústica microstreaming 12/09, um fenômeno onde as ondas sonoras propagando em torno de um pequeno obstáculo criar uma vazão média perto do obstáculo. Temos desenvolvido um dispositivo baseado em microstreaming acústica ("micromisturador") com uma simplificação chave; microstreaming acústico pode ser alcançado em freqüências de áudio, assegurando o sistema tem uma interface líquido-ar com um pequeno raio de curvatura 13. O menisco de um volume microlitro de solução em um tubo fornece um raio de curvatura pequeno adequadamente. O uso de freqüências de áudio significa que o hardware pode ser barato e versátil 13, e ácidos nucléicos e outros reagentes bioquímicos não são danificadas, como eles podem estar com sonicators padrão de laboratório.