Indução e avaliação da depressão em camundongos por meio da exposição crônica ao estresse

Resumo

Fonte: Yan, Z., et al. Avaliando o efeito antidepressivo do Xiaoyaosan em camundongos com estresse crônico. J. Vis. Exp. (2019).

O vídeo demonstra o processo de estabelecer um modelo de camundongo de depressão induzida por estresse crônico e avaliar comportamentos depressivos. A aplicação crônica de vários estressores desencadeia a liberação de corticosterona, levando à superexcitação neuronal e eventual morte neuronal, o que resulta em sintomas semelhantes aos da depressão nos camundongos.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Preparando camundongos para o procedimento experimental

NOTA: Para o procedimento experimental, foram selecionados camundongos C57BL/6J machos saudáveis com 12 semanas de idade, com cada camundongo pesando entre 18 e 22 g.

1. }Mantenha os camundongos individualmente em gaiolas em uma sala típica de animais de laboratório livre de patógenos específicos (SPF) (22 ± 1 °C, Ciclo escuro/claro de 12 h/12 h, umidade relativa: 30–40%) por uma semana antes do procedimento CUMS.
2. Divida aleatoriamente todos os camundongos em um grupo de controle e um grupo modelo de acordo com seu peso corporal. Cada grupo tem 15 camundongos.
3. Antes do início do experimento, numere os camundongos de cada grupo em sua cauda usando uma caneta marcadora.

2. Indução de depressão em camundongos

NOTA: Para induzir a depressão, os camundongos do grupo modelo e dois grupos de tratamento foram submetidos a estresse leve imprevisível crônico (CUMS) por 21 dias. O plano pode ser alterado de acordo com a situação prática, mas deve-se seguir o princípio de que o mesmo estressor não pode ser usado continuamente.

1. Exponha os ratos diariamente a quaisquer dois dos sete estressores a seguir por 21 dias consecutivos. Nosso plano de modelagem é projetado da seguinte forma:
   1. Na segunda-feira, exponha os ratos à privação de alimentos (esvazie a ração de cada gaiola por 24 h, das 8h00 às 8h00) e à privação de água (remova o bebedouro de cada gaiola por 24 h, das 8h00 às 8h00).
   2. Na terça-feira, exponha os ratos ao estresse de contenção (prenda os ratos em uma pequena banheira de plástico por 3 h, das 8:00 às 11:00) e gaiolas vazias (remova o acolchoamento em cada gaiola por 11 h, das 8:00 às 19:00).
   3. Na quarta-feira, exponha os ratos a gaiolas molhadas e sujas (despeje água em cada gaiola e mantenha-os úmidos por 24 horas, das 8:00 às 8:00 da manhã) e gaiolas lotadas (coloque cinco ratos em uma gaiola por 24 horas, das 8:00 às 8:00 da manhã).
   4. Na quinta-feira, exponha os ratos ao estresse de contenção e natação gelada (force cada rato a nadar em um aquário de vidro transparente com água gelada por 5 minutos).
   5. Na sexta-feira, exponha os ratos a gaiolas molhadas e sujas e privação de comida.
   6. No sábado, exponha os ratos ao estresse de contenção e gaiolas lotadas.
   7. No domingo, exponha os ratos a gaiolas vazias e natação gelada.
2. Registre o estado da pelagem e o peso corporal semanalmente até o final da modelagem (dia 21). Calcule a pontuação total do estado da pelagem como a soma das pontuações de sete partes diferentes do corpo: cabeça, pescoço, pelagem dorsal, pelagem ventral, patas dianteiras, cauda e patas traseiras. Uma pontuação de um indica uma pelagem bem cuidada e uma pontuação de zero indica uma pelagem desleixada.

Materiais