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Todos os procedimentos envolvendo amostras de animais foram revisados e aprovados pelo comitê de revisão ética animal apropriado.
1. Limpeza de tecidos
- Incube a amostra em uma solução aquosa deionizada a 20% de metanol / 80% por 1 h em temperatura ambiente (RT).
- Incubar a amostra em uma solução aquosa deionizada a 40% de metanol / 60% por 1 h em RT.
- Incubar a amostra em uma solução aquosa deionizada a 60% de metanol / 40% por 1 h em RT.
- Incubar a amostra em uma solução aquosa deionizada a 80% de metanol / 20% por 1 h em RT.
- Incubar a amostra em metanol a 100% por 1 h em RT.
- Incubar em metanol fresco a 100% durante a noite em RT.
- Incubar em diclorometano (DCM) a 66% / metanol a 33% por 3 h, com agitação, em RT.
- Incubar em éter dibenzílico (DBE) sem agitação. Deixe a amostra em DBE até ficar clara e armazene em DBE até a geração de imagens.