Análise ultraestrutural de uma seção cerebral de camundongo usando microscopia eletrônica de transmissão

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fonte: Lutz, D., et.al. Avaliação dos parâmetros de neuroplasticidade ultraestrutural após transdução in utero do cérebro e da medula espinhal de camundongos em desenvolvimento. J. Vis. Exp. (2019).

Este vídeo demonstra a preparação e análise de microscopia eletrônica de transmissão (TEM) de uma seção do cérebro de um filhote de camundongo. O protocolo começa com tecido fixado em tetróxido de ósmio embebido em resina, seguido de corte preciso para isolar a região de interesse e ultramicrotomia para produzir cortes semifinos e ultrafinos, que são visualizados usando microscopia de luz e TEM, respectivamente.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Todos os procedimentos envolvendo amostras de animais foram revisados e aprovados pelo comitê de revisão ética animal apropriado.

1. Seleção de Parâmetros de Neuroplasticidade Ultraestrutural para Análise Quantitativa

Mapeando a área de interesse
1. Escolha uma área de interesse (por exemplo, hipocampo ou cerebelo) e localize a área no atlas de seção es....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
Name	Company	Catalog Number	Comments
Microscópio óptico Basic DM E	Leica	-	4x (N.A. 0,1 ∞/-), 10x (N.A. A. 0,22 ∞/0,17), 40x (N.A. 0,65 ∞/0,17), 100x (N.A. 1,25 ∞/0,17) objetivas
Pinça hemostática Mosquito (12,5cm, curva)	FST	13010-12
Nickel grids, 200 mesh	Ted Pella	1GC200
Razor blades	Schick	87-10489
Technovit 4004 two components glue	Kulzer
Dispositivo de lâmina de barbear vibratória fina	-	com lâminas
Toluidine blue	Sigma-Aldrich	89640
Microscópio eletrônico de transmissão C20	Phillips	-	até 200 kV
Ultracut E	Reichert-Jung	-	ultramicrotome
Araldite	CIBA-GEIGY	23857.9	resina para incorporação de tecido
Ósmio (VIII)-óxido	Degussa	73219

< estilo td = 'largura: 179pt;'>Krup finas Szabo

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission