Neuroimagem

Fonte: Provenzano, G., et al. Visualização imuno-histoquímica da atividade dos neurônios do hipocampo após aprendizado espacial em um modelo de camundongo com distúrbios do neurodesenvolvimento. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra imagens imuno-histoquímicas para visualizar a ativação neuronal do hipocampo. Seções cerebrais coradas revelam regiões mais escuras sob um microscópio de campo claro, indicando neurônios ativados.

Fonte: Galenchik-Chan, A., et al. Ressonância Magnética Funcional (fMRI) do Córtex Visual com Estimulação Retinotópica de Visão Ampla. J. Vis. Exp. (2023). O vídeo demonstra a ressonância magnética funcional (fMRI) do córtex visual para mapear a atividade com base nos níveis de oxigenação do sangue. As imagens de ressonância magnética estrutural são adquiridas como referências anatômicas, seguidas por exames de ressonância magnética funcional. Estímulos visuais são exibidos para ativar...

Source: <a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove. com/v/61742/visualizaizing-the-calcitonin-gene-related-peptide-immunoreactive-innervation-of-the-rat-cranial-dura-mater-with-immunofluorescence-and-neural-tracing'>Wang, J., et al. Visualizando a inervação imunorreativa do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina da dura-máter craniana de ratos com imunofluorescência e rastreamento neural. J. Vis. Exp. (2021). Este vídeo demonstra um método para rastrear as origens dos...

Source:<a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove. com/v/57015/single-cell-resolution-fluorescence-live-imaging-of-drosophila-circadian-clocks-in-larval-brain-culture'> Sabado, V., et al., Nagoshi, E. Single-cell Resolution Fluorescence Live Imaging of Drosophila Relógios circadianos na cultura do cérebro larval. J. Vis. Exp. (2018). Este vídeo demonstra o procedimento para incorporar o Drosophila cérebro em uma matriz de fibrina, seguido por imagens de fluorescência de lapso...

Source: <a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove. com/v/61481/quantifying-spontaneous-ca2-fluxes-and-their-downstream-effects-in-primary-mouse-midbrain-neurons'>Bancroft, E. A., et al. Quantificando o estilo Ca = '-webkit-text-decoration-skip: none; font-family: Arial, sans-serif; font-size: 0.6em; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: 400; text-decoration-skip-ink: none; vertical-align: baseline; espaço em branco: pré-encapsulamento; '> 2 + < span...

Source: <a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove.com/v/53330/ imagem de fluorescência e bioluminescência de ca2 subcelular em neurônios do hipocampo envelhecidos '>Calvo-Rodríguez, et al. Imagem de fluorescência e bioluminescência de Ca style='-webkit-text-decoration-skip:none;font-family:Arial,sans-serif;font-size:0.6em;font-style:normal;font-variant:normal;font-weight:400;text-decoration-skip-ink:none;vertical-align:baseline;white-space:pre-wrap;'>2+ em neurônios do...

Fonte: Reindl, V., et al. Conduzindo experimentos de hipervarredura com espectroscopia funcional de infravermelho próximo. J. Vis. Exp. (2019) Este vídeo demonstra o uso de espectroscopia funcional de infravermelho próximo (fNIRS) para medir a atividade cerebral durante as interações sociais. Os participantes se envolvem em uma tarefa coordenada que aumenta a atividade no córtex pré-frontal, uma região crítica para o comportamento social, enquanto o sistema detecta mudanças na absorção de luz...

Comece com um paciente diagnosticado com aneurismas cerebrais, uma condição em que os vasos sanguíneos do cérebro se projetam e se enchem de sangue. Prenda a cabeça do paciente dentro da bobina da cabeça de uma máquina de ressonância magnética. Inicie a geração de imagens. O sistema gera um forte campo magnético, alinhando prótons no tecido cerebral ao longo de sua direção. Inicie o eco de gradiente rápido preparado para magnetização ou a sequência MPRAGE aplicando um pulso de radiofrequência...

Uma lesão cerebral traumática, ou TCE, prejudica o fluxo sanguíneo para as regiões afetadas e interrompe a atividade dos neurônios dopaminérgicos. Para investigar interrupções associadas ao TCE, comece injetando por via intravenosa um marcador radioativo lipofílico em um paciente. O traçador viaja através dos vasos cerebrais e se difunde nas células do tecido cerebral cortical e subcortical. Realize tomografia computadorizada por emissão de fóton único, ou SPECT, para detectar a radiação...

Source:<a style='text-decoration:none;' href='https://dx.doi.org/10.3791/55886-v'> Wiegreffe, C., et. al., Time-lapse Confocal Imaging of Migrating Neurons in Organotypic Slice Culture of Embryonic Mouse Using In Utero Electroporation. J. Vis. Exp. (2017) Este vídeo demonstra a microscopia confocal de lapso de tempo para observar a migração radial do neurônio cortical da zona subventricular para a placa cortical por meio de andaimes gliais radiais em fatias de cérebro embrionário de...

Posicione a cabeça de um participante humano dentro da bobina da cabeça de um sistema de ressonância magnética funcional, ou fMRI. Empregue a ocupação do espaço vascular ou VASO, uma técnica para medir as mudanças no volume sanguíneo cerebral, ou CBV, o volume sanguíneo dentro do cérebro. Comece aplicando um pulso de recuperação de inversão para suprimir os sinais do sangue, permitindo que apenas os sinais do tecido circundante dentro da região sejam detectados. Em seguida, use fones de ouvido...

Fonte: Schott, J. T., }et al. Preparação de culturas progenitoras de oligodendrócitos de ratos e quantificação da oligodendrogênese usando varredura de fluorescência de infravermelho duplo. J. Vis. Exp. (2016). Este vídeo demonstra o uso de imagens de fluorescência dupla para avaliar a diferenciação de oligodendrócitos de células precursoras (OPCs) isoladas de um cérebro de filhote de rato. O processo inclui fixar as células, rotular marcadores específicos com anticorpos primários e...

Fonte: Upputuri, P. K., et al. Um sistema de tomografia fotoacústica compacto de alto desempenho para imagens cerebrais de pequenos animais in vivo. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra um protocolo para imagens cerebrais de ratos não invasivas in vivo usando tomografia fotoacústica, mostrando a preparação, configuração do sistema de imagem e aquisição de dados para reconstruir imagens cerebrais 2D para visualizar estruturas vasculares e saúde neurovascular.

Fonte: Shimojo, H., et al. Imagem de bioluminescência em tempo real da dinâmica de sinalização Notch durante a neurogênese murina. J. Vis. Exp. (2019)Neste vídeo, culturas de fatias corticais de embriões de camundongos transgênicos são usadas para monitorar a expressão gênica por meio de imagens tridimensionais. Imagens de bioluminescência, fluorescência e campo claro são usadas para visualizar a expressão gênica em tempo real durante a diferenciação neuronal dentro do tecido nativo.

Fonte: Jamadar, S. et. al. Administração de radiotraçador para tomografia por emissão de pósitrons de alta resolução temporal do cérebro humano: aplicação ao FDG-fPET. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a quantificação do metabolismo da glicose cerebral usando tomografia por emissão de pósitrons (PET). O participante é infundido com o marcador F-18 fluorodesoxiglicose (FDG) durante a varredura. O FDG se acumula em neurônios ativos e emite pósitrons após o decaimento do F-18. Esses...

Fonte: Delalande, J., et.al. Marcação dupla de células da crista neural e vasos sanguíneos em embriões de galinha usando enxerto de tubo neuralChick GFP e injeção de corante de carbocianina DiI. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o transplante de um tubo neural de doador marcado com GFP de um embrião de galinha transgênico compatível com o estágio para um embrião receptor no nível de somitos de um a sete, seguido de marcação vascular usando um corante fluorescente lipofílico. A abordagem...

Fonte: Zheng, W. et. al., Ressonância Magnética por Tensor de Difusão na Compressão Crônica da Medula Espinhal. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a imagem do tensor de difusão na avaliação da compressão crônica da medula espinhal. Ao analisar os padrões de difusão da água, anisotropia fracionada e valores do coeficiente de difusão aparente, os achados revelam danos axonais em regiões comprimidas. As descobertas fornecem informações críticas sobre a patologia da medula espinhal e a...

Fonte: Fowler, B. E., et al. Imagem de cálcio in vivo de respostas de neurônios ganglionares geniculados de camundongos a estímulos gustativos. J. Vis. Exp. (2021) Este vídeo demonstra um protocolo para administrar saborizantes ao gânglio geniculado exposto cirurgicamente em um camundongo anestesiado e usar fluorescência GCaMP com microscopia epifluorescente para visualizar respostas neuronais em tempo real, auxiliando estudos sobre o processamento do sinal de paladar periférico.

Fonte: Blanc, J., et al. Espectroscopia de ressonância magnética funcional a 7 t no córtex do barril de rato durante a ativação do bigode. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o método de análise de alterações metabólicas no córtex do barril de rato usando espectroscopia de ressonância magnética funcional durante a estimulação do bigode. Os espectros de metabólitos basais são comparados com os espectros estimulados para detectar o aumento do lactato no córtex do barril, confirmando a...

Fonte: Villarreal, S., et. al., Medindo a endocitose da vesícula sináptica em neurônios do hipocampo cultivados. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a análise da endocitose de vesículas sinápticas em neurônios do hipocampo cultivados por meio de marcação de peroxidase de rábano e microscopia eletrônica.

Fonte: Becker-Kojić, Z. A., et. al., Geração Livre de GM de Células Neuronais Derivadas do Sangue. J. Vis. Exp. (2021)O vídeo demonstra um protocolo para preparar células neurais derivadas de células do sangue periférico reprogramadas para microscopia de fluorescência, mostrando diferentes tipos de células e estágios de desenvolvimento por meio de imagens de imunofluorescência.

Fonte: McLeod, F., et al. Avaliação da densidade de sinapses em fatias de cérebro de roedores hipocampais. J. Vis. Exp. (2017). Este vídeo demonstra um método para visualizar marcadores sinápticos em fatias cerebrais do hipocampo usando análise de imunofluorescência confocal. As fatias são imunomarcadas com anticorpos primários direcionados a marcadores pré-sinápticos e pós-sinápticos, seguidos por anticorpos secundários conjugados com fluoróforo. Os marcadores marcados são então visualizados...

Fonte: Lerchundi, R., et. al. Imagem de ATP intracelular em fatias de tecido organotípico do cérebro de camundongo usando o sensor baseado em FRET ATeam1.03YEMK. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o uso de sensores baseados em FRET (Transferência de Energia de Ressonância de Fluorescência) para medir os níveis intracelulares de ATP em fatias organotípicas de hipocampo de camundongos, permitindo a visualização em tempo real da dinâmica do ATP em neurônios e astrócitos em condições...

Fonte: Espinoza, R., et al. Imagem de espalhamento Raman estimulado em duas cores em tempo real do cérebro de camundongos para diagnóstico de tecidos. J. Vis. Exp. (2022). O vídeo demonstra imagens de espalhamento Raman estimulado (SRS) de duas cores de seções de tecido cerebral de camundongos. Dois feixes de laser sincronizados são direcionados para a seção de tecido para excitar vibrações moleculares, resultando em uma mudança de intensidade relativa nos feixes. Lipídios e proteínas no...

Fonte: Olesen, M. V., et al. A técnica do fracionador óptico para estimar o número de células em um modelo de rato de terapia eletroconvulsiva. J. Vis. Exp. (2017). O vídeo demonstra a técnica para quantificar neurônios recém-gerados no tecido cerebral. Fatias de tecido hipocampal contendo neurônios marcados com bromodeoxiuridina (BrdU) foram coradas usando imuno-histoquímica e posteriormente quantificadas em toda a espessura do tecido usando a técnica do fracionador óptico.

Fonte: <a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove.com/v/58365/ visualize-drosophila-perna-motor-neurônio-axônios-através-da-cutícula-adulta'>Guan, W., et. al. Visualize Drosophila axônios do neurônio motor da perna através da cutícula adulta. J. Vis. Exp. (2018) <p style='line-height:1.2;margin-bottom:0pt;margin-top:0pt;' dir='ltr'>Este vídeo demonstra imagens deDrosophila pernas com neurônios motores que expressam proteínas fluorescentes verdes usando microscopia...

Source: <a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove.com/v/56992/ visualização-de-módulos-corticais-em-córtices-de-mamíferos-achatados'>Lauer, S. M., et al. Visualização de módulos corticais em córtices de mamíferos achatados. J. Vis. Exp. (2018) <p style='line-height:1.2;margin-bottom:0pt;margin-top:0pt;text-align:justify;' dir='ltr'>Este vídeo demonstra um método para visualizar os módulos corticais em seções cerebrais achatadas usando coloração histoquímica. As seções...

Fonte: Hidmark, A. S., et al. Análise de Células Imunes em Nervos Ciáticos Únicos e Gânglio da Raiz Dorsal de um Único Camundongo Usando Citometria de Fluxo. J. Vis. Exp.{{TAG_ 27}} (2017). Este vídeo demonstra o uso da citometria de fluxo para analisar células imunes em nervos ciáticos de camundongos e gânglios da raiz dorsal (DRGs). O processo envolve a marcação de células imunes com anticorpos marcados com fluoróforo e biotina, estabilizando e permeabilizando as células e usando marcadores...

Source: Morsch, M., et. al., Triggering Cell Stress and Death Using UV Laser Confocal Microscopia Convencional. J. Vis. Exp. (2017) Neste vídeo, exploramos a técnica de ablação a laser UV de alta intensidade para direcionar e estudar com precisão neurônios individuais em peixes-zebra transgênicos. Demonstramos como preparar, imobilizar e visualizar respostas neuronais, destacando a dinâmica celular da lesão e recuperação.

Fonte: Lunelli, L., et. al. Examinando polissomos cerebrais com microscopia de força atômica. J. Vis. Exp.(2016). Este vídeo demonstra a imagem de polissomos usando microscopia de força atômica. Uma folha de mica revestida de íons de níquel ancora o RNA com ribossomos anexados. A amostra é lavada, seca e montada no estágio do microscópio. A ponta cantilever varre a superfície da amostra, registrando deflexões do laser para mapear a topologia. O software é usado para corrigir distorções e...

Source: Kimmelmann-Shultz, B., et. al. Usando fluorescência de infravermelho próximo e varredura de alta resolução para medir a expressão de proteínas no cérebro de roedores. J. Vis. Exp. (2019) Este vídeo demonstra uma fluorescência de infravermelho próximo e um método de varredura de alta resolução para medir a expressão de proteínas no cérebro do roedor.

Fonte: Hamid, H. S., et al. Imagem tridimensional e análise de mitocôndrias dentro de fibras nervosas intraepidérmicas humanas. J. Vis. Exp. (2017) Este vídeo demonstra o método para visualizar mitocôndrias específicas do nervo usando imagens tridimensionais. Ele descreve o processo de aquisição de varreduras sequenciais de fibras nervosas intraepidérmicas pré-marcadas e geração de imagens de superfície 3D para isolar e exibir mitocôndrias em relação às estruturas nervosas.

Fonte: Mukherjee, K., et. al. análise de mitocôndrias cerebrais usando microscopia eletrônica de varredura serial de face de bloco. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a preparação, imagem e análise de tecido cerebral de camundongo usando um microscópio eletrônico de varredura serial (SBFSEM) para visualizar a ultraestrutura mitocondrial, permitindo o mapeamento preciso de sua morfologia e distribuição espacial nos compartimentos neuronais axonais e dendríticos.

Source: <a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove.com/v/55229/ single-cell-rna-seq-of-defined-subsets-of-retinal-ganglion-cells'>Laboissonniere, et. al. RNA-seq de célula única de subconjuntos definidos de células ganglionares da retina. J. Vis. exp. (2017). Este vídeo demonstra uma técnica de rastreamento fluorescente para identificar subtipos de células ganglionares da retina (RGC) em uma retina de camundongo transgênico. O processo envolve proteger a retina isolada em uma...

Pegue uma seção fixa de tecido cerebral cortical de camundongo exibindo axônios e dendritos neuronais. Os dendritos possuem saliências, conhecidas como espinhas dendríticas, que formam sinapses com axônios. Incube o tecido com ferrocianeto de ósmio, que se liga aos lipídios, seguido por outra aplicação de ósmio, que aumenta o contraste estrutural para a imagem. Mancha com um composto de metal pesado que se liga a macromoléculas e aumenta o contraste. Desidratar usando concentrações crescentes...

Source: Mizuno, H., et al. In Vivo Imagem de dois fótons de neurônios corticais em camundongos neonatais. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo mostra a microscopia de dois fótons sendo usada para obter imagens de neurônios no cérebro de um filhote de camundongo transgênico anestesiado. O laser de dois fótons permite imagens mais profundas com alta resolução espacial e dispersão mínima de luz, permitindo a captura detalhada da morfologia neuronal, incluindo projeções dendríticas.

Fonte: Lark, A. R., et. al., Abordagem de imagem cerebral funcional in vivo baseada no indicador de cálcio bioluminescente GFP-aequorin. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra imagens em tempo real da dinâmica do cálcio usando Green bioluminescência de proteína fluorescente-aequorina em Drosophila estruturas cerebrais profundas.

Source: <a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove.com/v/57485/ ablação-neuronal-população-usando-dois-fótons-laser-sua-avaliação'>Muto, A., et al. Ablação de uma população neuronal usando um laser de dois fótons e sua avaliação usando imagens de cálcio e registro comportamental em larvas de peixe-zebra. J. Vis. exp. (2018) Neste vídeo, é demonstrado um procedimento de ablação a laser de dois fótons, permitindo a destruição seletiva de neurônios fluorescentes em larvas de...

Fonte: Winkle, C. C., et al. Utilizando metodologias combinadas para definir o papel da entrega da membrana plasmática durante a ramificação do axônio e a morfogênese neuronal. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra uma técnica de imagem ao vivo usando microscopia de contraste de interferência diferencial (DIC) para observar a ramificação axonal em tempo real em neurônios corticais. Vídeos de lapso de tempo capturam os efeitos do tratamento com netrin-1, uma molécula de sinalização que induz...

Fonte: Zhilyakov, N. V. et. al., Registro de transientes de cálcio na junção neuromuscular de camundongo com alta resolução temporal usando microscopia confocal. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra a técnica de imagem de registro de transientes rápidos de cálcio nas terminações nervosas usando microscopia confocal. Ao estimular o nervo e capturar alterações de fluorescência de corantes de ligação ao cálcio, ele visualiza o influxo dinâmico de cálcio e a depuração na terminação nervosa,...

Fonte: Ting, C., et al., Analisando a morfologia dendrítica em colunas e camadas. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o procedimento de preparação de um cérebro de Drosophila, capturando pilhas de imagens horizontais e frontais de dendritos de medula marcados com GFP sob um microscópio confocal e criando uma reconstrução 3D para analisar sua morfologia em camadas e colunas.

Fonte: Lacin, E., et al. Construção de Repórteres de Engenharia Fluorescente de Neurotransmissores Baseados em Células (CNiFERs) para Detecção Óptica de Neurotransmissores In Vivo. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra uma técnica para obter imagens da liberação de neurotransmissores in vivo usando repórteres de engenharia fluorescente de neurotransmissores baseados em células (CNiFERs), células repórter especializadas pré-injetadas no córtex de camundongo. Posicionado sob um microscópio de...

Fonte: Doser, R., et al. Imagem subcelular do manuseio de cálcio neuronal in vivo. J. Vis. Exp. (2023)Este vídeo demonstra imagens in vivo do fluxo de cálcio subcelular nos neurônios do cordão nervoso ventral de cepas transgênicas de Caenorhabditis elegans. Dois indicadores distintos de cálcio são empregados: um indicador citoplasmático em uma cepa e um indicador mitocondrial em outra. Os neurônios são observados sob um microscópio de fluorescência para monitorar mudanças em tempo real na...

Fonte: Gouder, et. al. Quantificação tridimensional de espinhas dendríticas de neurônios piramidais derivados de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos. J. Vis. Exp. (2015).Este vídeo demonstra a imagem e análise de espinhas dendríticas em neurônios piramidais transduzidos e imunomarcados usando microscopia confocal. O ruído de fundo é reduzido e os dendritos são rastreados estimando seu diâmetro e comprimento. A segmentação automatizada da coluna vertebral envolve a definição de...

Fonte: Creighton, B. A., et al. Visualização e análise do transporte intracelular de organelas e outras cargas em astrócitos. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a visualização do transporte de carga intracelular em astrócitos cultivados usando uma sonda acidotrópica fluorescente que marca seletivamente vesículas endolisossômicas ácidas. A aquisição de imagens de lapso de tempo e a aquisição de pilha Z com um microscópio confocal permitem o rastreamento de cargas marcadas com fluorescência...

Fonte: Katsalifis, A., et al. Imagem ao vivo do estado redox de glutationa mitocondrial em neurônios primários usando um indicador raciométrico. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra a imagem do estado redox mitocondrial em neurônios primários usando um indicador fluorescente raciométrico. Ao aplicar dois comprimentos de onda de excitação sob um microscópio de fluorescência, a taxa de intensidade de fluorescência é medida para avaliar a oxidação mitocondrial. O protocolo inclui estimulação de...

Fonte: Bagheri, M., et. al. Protocolo para Análise Morfométrica Confocal Tridimensional de Astrócitos. J. Vis. Exp. (2015).Este vídeo demonstra a imagem de astrócitos marcados com fluorescência em uma seção do cérebro de camundongo usando um microscópio confocal. A seção do cérebro é posicionada sob a lente objetiva apropriada e fluoróforos e filtros adequados são selecionados. Depois de otimizar a exposição automaticamente, os parâmetros de digitalização são definidos para garantir imagens 2D...

Fonte: Weber, R. Z., et al., Transplante intracerebral e rastreamento de bioluminescência in vivo de células progenitoras neurais humanas no cérebro de camundongos. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra o método para imagens de bioluminescência in vivo de células progenitoras neurais humanas geneticamente modificadas injetadas em um cérebro de camundongo. O processo envolve injeção de luciferina, preparação de imagens e detecção de sinais bioluminescentes das células transplantadas no local...

Fonte: Bannai, H., et. al., Dissecção de sinais locais de Ca2+ em células cultivadas por indicadores de Ca2+ direcionados à membrana. J. Vis. Exp. (2019)O vídeo demonstra imagens de fluorescência para observar a dinâmica espontânea do cálcio específica do compartimento em astrócitos, monitorando sequencialmente proteínas sensíveis ao cálcio localizadas na membrana plasmática e no retículo endoplasmático.

Fonte: Marinello, M., et al. Caracterização de junções neuromusculares em camundongos por microscopia confocal e super-resolução combinada. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra a preparação, imunocoloração e imagem de junções neuromusculares no tecido muscular de ratos usando microscopia confocal e de super-resolução para visualizar e analisar estruturas pré-sinápticas e pós-sinápticas.

Fonte: Chiu, S., et al. Ressonância Magnética de Contraste de Fase na Artéria Carótida Comum de Rato. J. Vis. Exp. (2018). Este vídeo demonstra a ressonância magnética de contraste de fase (PC-MRI) para medir o fluxo sanguíneo na artéria carótida comum de um rato. Depois de fixar um rato anestesiado no leito de ressonância magnética e garantir parâmetros fisiológicos estáveis, a artéria carótida comum é escaneada para capturar imagens em intervalos definidos. O fluxo sanguíneo é então calculado...

Source: Hage, B. D. et. al., Ultrassom Doppler Transcraniano Funcional para Monitoramento do Fluxo Sanguíneo Cerebral. J. Vis. Exp. (2021) Este vídeo demonstra o uso do ultrassom Doppler como uma ferramenta de imagem funcional para medir a velocidade do fluxo sanguíneo cerebral, ou CBFV, em tempo real. Ele destaca como as mudanças de frequência na artéria cerebral média durante tarefas como prender a respiração revelam mudanças no CBFV, oferecendo informações sobre a atividade cerebral e a...

Posicione a cabeça do paciente dentro da bobina de radiofrequência, ou RF, de uma máquina de ressonância magnética ou ressonância magnética. Inicie a angiografia por ressonância magnética por tempo de voo ou TOF MRA, uma técnica não invasiva para visualização de vasos sanguíneos. Selecione uma fatia de tecido para imagens para visualizar artérias e veias. Aplique um pulso de RF para excitar os prótons dentro da fatia de imagem selecionada. Esses prótons liberam energia, que é detectada como um...

Os espaços perivasculares (PVS) são espaços cheios de líquido ao redor dos vasos sanguíneos cerebrais envolvidos na drenagem de fluidos. Para examinar alterações no PVS durante um acidente vascular cerebral de pequenos vasos, realize ressonância magnética (MRI) da região dos gânglios da base no cérebro do paciente. O protocolo de imagem inclui as sequências de eco de spin rápido ponderado em T2 e recuperação de inversão atenuada por fluido (FLAIR). A imagem ponderada em T2 aumenta o contraste...

Source:<a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove. com/v/53582/quantificação-da-arquitetura-vascular-cerebral-usando-microscopia-de-dois-fótons-em-um-modelo-de-camundongo-de-neuroinflamação-induzida-por-HIV'> Nishimura, C. et al. Quantificação da Arquitetura Vascular Cerebral usando Microscopia de Dois Fótons em um Modelo de Camundongo de Neuroinflamação Induzida pelo HIV. J. Vis. Exp. (2016). Este vídeo demonstra a visualização in vivo de capilares corticais no cérebro de...

Posicione um paciente humano com estenose carotídea interna, uma condição caracterizada pelo estreitamento da artéria carótida interna, na mesa de imagem para angiografia por subtração digital (DSA). Insira um angiocateter na artéria carótida comum no nível da quarta vértebra cervical. Capture uma imagem de raios-X pré-contraste para registrar estruturas de fundo como ossos e tecidos moles usando irradiação de raios-X. Administre um meio de contraste à base de iodo na artéria carótida. O meio...

Comece com um paciente humano com vasculite cerebral, que causa inflamação e aumento da permeabilidade dos vasos sanguíneos no cérebro. Coloque a cabeça do paciente dentro da bobina de radiofrequência, ou RF, de uma máquina de ressonância magnética ou ressonância magnética. Inicie a angiografia por ressonância magnética, ou MRA, que usa pulsos de RF para obter imagens do fluxo sanguíneo. Os prótons no sangue que flui geram sinais fortes, fazendo com que os vasos sanguíneos pareçam brilhantes,...

Fonte: Tan, Z., et al., Construção e aplicação do Atlas do Fluxo Sanguíneo Cerebral Baseado na Região Funcional Cerebral Usando Ressonância Magnética-Rotulagem de Spin Arterial. J. Vis. Exp. (2024). Este vídeo demonstra o método para construir um atlas de fluxo sanguíneo cerebral integrando dados de ressonância magnética ou ressonância magnética e marcação de spin arterial com regiões cerebrais segmentadas, visualizando padrões de fluxo sanguíneo e quantificando os níveis de fluxo em áreas...

Fonte: Kim, D., et. al. Imagem fluorescente combinada de infravermelho próximo e microtomografia computadorizada para visualização direta de tromboêmbolos cerebrais. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a visualização de trombos cerebrais em camundongos usando imagens de microtomografia computadorizada (micro-CT). Um modelo de camundongo tromboso cerebral é injetado com nanopartículas de ouro direcionadas à fibrina que atuam como um agente contrastante. O mouse é colocado na cama de uma...

Fonte: Giustetto, P., et. al., Ultrassom não invasivo parenquimatoso, vascular e metabólico de alta frequência e imagens cerebrais profundas de ratos fotoacústicos. J. Vis. Exp. (2015)Neste vídeo, demonstramos o uso de ultrassom de alta frequência e imagens fotoacústicas para estudar a vasculatura e o conteúdo de hemoglobina no cérebro de ratos. Este método fornece informações detalhadas sobre a perfusão cerebral e a oxigenação do sangue, permitindo a análise não invasiva das estruturas...

Fonte: Kalva, S. K., et al., Tomografia fotoacústica de mesa baseada em diodo laser pulsado para monitoramento de lavagem e lavagem de corante na vasculatura cortical de ratos. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o procedimento para usar imagens fotoacústicas para observar alterações nos vasos corticais de um rato anestesiado. O processo inclui imagens de linha de base, injeção de corante e análise de absorção e depuração de corante durante a lavagem e lavagem.

Fonte: Menezes Forti, R. et al. Monitoramento em tempo real de pacientes neurocríticos com espectroscopias ópticas difusas. J. Vis. Exp. (2020)Este vídeo demonstra o uso da Espectroscopia de Correlação Difusa (DCS) para medir o fluxo sanguíneo cerebral em humanos. Ele descreve as etapas para preparar o sistema, calibrar a sonda, posicioná-la na testa do participante, adquirir dados de luz dispersa e analisar as flutuações de intensidade para interpretar a dinâmica do fluxo sanguíneo no cérebro.

Fonte: Kim, D. E., et al. Imagem fluorescente combinada de infravermelho próximo e microtomografia computadorizada para visualização direta de tromboêmbolos cerebrais. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra imagens fluorescentes de infravermelho próximo (NIRF) para visualizar trombos no tecido cerebral excisado marcado com uma sonda específica para fibrina. A luz infravermelha próxima excita a sonda, fazendo com que o trombo fique fluorescente, permitindo a visualização de trombos de alto...

Fonte: Villaseñor, R e Collin. L. Imagem confocal de alta resolução da barreira hematoencefálica: imagem, reconstrução 3D e quantificação da transcitose. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra imagens 3D de alta resolução da barreira hematoencefálica (BBB) usando microscopia confocal, mostrando seções cerebrais de camundongos coradas com anticorpos para analisar componentes da BBB e estruturas intracelulares, aplicáveis para estudar a homeostase cerebral, interações neurovasculares e disfunção...

Fonte: Sweeney, A. M., et al. Imagem in vivo do transporte de líquido cefalorraquidiano através do crânio intacto do camundongo usando macroscopia de fluorescência. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o processo de visualização do fluxo do líquido cefalorraquidiano (LCR) no cérebro de um camundongo usando imagens de fluorescência. Um traçador fluorescente é injetado na cisterna magna (MC), permitindo que seu movimento com o LCR seja rastreado através dos espaços subaracnóideo e perivascular.

Fonte: Breid, S., et. al. Imagem de bioluminescência da neuroinflamação em camundongos transgênicos após inoculação periférica de fibrilas de alfa-sinucleína. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a imagem de bioluminescência da neuroinflamação em camundongos transgênicos, mostrando reações de luciferase-luciferina em astrócitos ativados. O protocolo permite a quantificação não invasiva da ativação astrocítica, auxiliando estudos sobre inflamação do SNC e eficácia terapêutica.

Fonte: Nyström, S., et al., Imagem de tecidos amilóides corados com oligotiofenos conjugados luminescentes por microscopia confocal hiperespectral e imagem de tempo de vida de fluorescência. J. Vis. Exp. (2017). Este vídeo demonstra a análise de estruturas amilóides com microscopia de imagem de fluorescência ou FLIM, usando corante hFTAA para revelar núcleos compactos como azul/verde e periferias instáveis como vermelho/amarelo em imagens codificadas por cores, refletindo a organização amilóide.

Fonte: Bosco, A., et al. In vivo Dinâmica da ativação microglial da retina durante a neurodegeneração: imagem oftalmoscópica confocal e morfometria celular no glaucoma de camundongo. J. Vis. Exp. (2015) Este vídeo demonstra imagens in vivo da microglia da retina em um modelo de glaucoma em camundongos. Um camundongo transgênico com microglia retiniana que expressa proteína fluorescente é posicionado sob um oftalmoscópio. A iluminação infravermelha é usada para localizar a cabeça do nervo...

Fonte: Maiti, P. et. al.,. Marcação e imagem de placas amilóides no tecido cerebral usando o polifenol natural curcumina. J. Vis. Exp.} (2019)Este vídeo demonstra o procedimento de imagem de placas beta-amilóide em seções de tecido cerebral usando imunomarcação e coloração com curcumina. A imunomarcação fornece especificidade para beta-amiloide, enquanto a curcumina se liga seletivamente às fibrilas ricas em β folhas, melhorando a visualização. A co-localização da fluorescência vermelha e verde...

Posicione a cabeça de um paciente com esclerose múltipla dentro da bobina de radiofrequência ou RF de uma máquina de ressonância magnética. Comece a recuperação de inversão atenuada por fluido ou a imagem FLAIR. Selecione uma fatia de cérebro contendo lesões próximas a áreas ricas em LCR. O sistema gera um forte campo magnético, alinhando prótons no tecido cerebral saudável e lesionado e no LCR ao longo de sua direção, criando magnetização líquida. Aplique um pulso de RF de inversão para...

Source: <a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove.com/v/59402/ imagem 3D de alta resolução de infecção pelo vírus da raiva em tecido cerebral limpo com solvente'>Zaeck, L., et al. Imagens 3D de alta resolução da infecção pelo vírus da raiva no tecido cerebral limpo com solvente. J. Vis. Exp. (2019). Este vídeo demonstra o processo de preparação e imagem de tecido cerebral de camundongo infectado com o vírus da raiva (RABV) para avaliar a infecção progressão. Ele descreve as...

Fonte: Bisht, K., et. al. Microscopia de luz e eletrônica correlativa para estudar interações microgliais com placas β-amilóides. J. Vis. Exp. (2016) Este vídeo demonstra a visualização e o mapeamento de placas amilóides marcadas com metoxi-X04 no cérebro de camundongos com doença de Alzheimer seções usando fluorescência e microscopia de campo claro, permitindo a correlação precisa de placas com estruturas anatômicas para estudar a patologia de Alzheimer.

Fonte: Ouyang, Y., et al. Imagem simultânea de PET/MRI durante hipóxia-isquemia cerebral de camundongo. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra uma técnica para avaliar a lesão por hipóxia cerebral por meio de tomografia por emissão de pósitrons (PET) e ressonância magnética (MRI) simultâneas. Um camundongo anestesiado é submetido à ligadura da artéria carótida comum (CCA), reduzindo o fluxo sanguíneo para um hemisfério cerebral e predispondo-o a lesões induzidas por hipóxia. A PET e a...

Fonte: Krishnamurthy, K. et al. Medição fluorescente em tempo real de funções sinápticas em modelos de esclerose lateral amiotrófica. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra imagens de cálcio em tempo real para monitorar a atividade sináptica em neurônios mutantes de ALS que expressam um biossensor de cálcio geneticamente codificado. Ele descreve as etapas para preparar os neurônios para imagens, estimular a dinâmica do cálcio e registrar a fluorescência para medir as mudanças em tempo real nos...

Fonte: Ciraku, L., et. al. Um modelo de fatia cerebral ex vivo para estudar e direcionar o crescimento do tumor metastático cerebral do câncer de mama. J. Vis. Exp. (2021). Este vídeo demonstra a imagem de células tumorais que expressam luciferase em uma fatia de cérebro de camundongo organotípica. A luciferina é adicionada ao meio e a placa é colocada dentro da câmara do sistema de imagem in vivo. Os parâmetros para captura de imagem são ajustados e a forma e o tamanho do tumor são definidos.

Fonte: Arango-Lievano, M. et. al., Imagem longitudinal in vivo da cerebrovasculatura: relevância para doenças do SNC. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra imagens in vivo de dois fótons para visualizar placas amilóides marcadas com fluorescência e vasculatura cerebral. A fluorescência azul marca as placas, enquanto a fluorescência verde destaca os vasos sanguíneos cerebrais. Um mapa 3D da região de interesse e imagens em mosaico de alta resolução revelam interações detalhadas de placas...

Fonte: Clark, A.J., et al. Imagem de bioluminescência de um modelo animal imunocompetente para glioblastoma. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra imagens de bioluminescência para rastrear a progressão do glioblastoma em um modelo de camundongo imunocompetente, usando células tumorais que expressam luciferase e luciferina para quantificar o crescimento do tumor de forma não invasiva.

Fonte: Parker, J. J., et al. Um modelo de cultura de fatias organotípicas de glioblastoma humano para estudo da migração de células tumorais e efeitos específicos do paciente de medicamentos anti-invasivos. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo mostra a imagem de fatias de tecido de glioblastoma expressando proteína fluorescente verde (GFP) por meio de microscopia confocal. Imagens de alta resolução são capturadas em intervalos consistentes para rastrear o movimento e a direção das células tumorais.

Fonte: Lutz, D., et.al. Avaliação dos parâmetros de neuroplasticidade ultraestrutural após transdução in utero do cérebro e da medula espinhal de camundongos em desenvolvimento. J. Vis. Exp. (2019). Este vídeo demonstra a preparação e análise de microscopia eletrônica de transmissão (TEM) de uma seção do cérebro de um filhote de camundongo. O protocolo começa com tecido fixado em tetróxido de ósmio embebido em resina, seguido de corte preciso para isolar a região de interesse e ultramicrotomia...

Fonte: Inal, M. A. et. al., Rastreamento retrógrado de Drosophila neurônios motores embrionários usando corantes fluorescentes lipofílicos. J. Vis. Exp. (2020)Este vídeo demonstra o método de rotulagem retrógrada de Drosophila neurônios motores usando corantes lipofílicos. O corante entra no axônio, viaja retrógrada e rotula os neurônios em verde, permitindo a visualização detalhada de sua morfologia e projeções sob um microscópio confocal.

Fonte: Flatz, W. H. }et al. }In vivo Análise morfométrica de nervos cranianos humanos usando ressonância magnética em Doença de Ménière: ouvidos e ouvidos com audição normal. J. Vis. Exp. (2018). Este vídeo demonstra o uso da ressonância magnética para analisar a morfologia dos nervos cranianos nos ouvidos de pacientes que sofrem de um distúrbio crônico do ouvido interno. Ele descreve as etapas para realizar uma ressonância magnética de alto campo magnético no paciente, reconstruir as imagens...

Source: Braeckman, K., et. al. Imagem de difusão avançada no hipocampo de ratos com lesão cerebral traumática leve. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o uso de imagens ponderadas por difusão para avaliar alterações microestruturais no hipocampo de um rato após traumatismo cranioencefálico leve (mTBI), destacando a lesão axonal por meio de ressonância magnética precisa e análise de difusão.

Fonte: Papadelis, C., , et al., Oscilações Interictais de Alta Frequência Detectadas com Magnetoencefalografia e Eletroencefalografia Simultâneas como Biomarcador de Epilepsia Pediátrica. J. Vis. Exp.{TAG_ 27}} (2016). Este vídeo demonstra o método de uso de registros de eletroencefalografia (EEG) e magnetoencefalografia (MEG) para identificar descargas epileptiformes interictais (IEDs) e oscilações de alta frequência (HFOs) para localizar regiões propensas a convulsões no cérebro.

Source: <a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove.com/v/59020/longitudinal-morphological-physiological-monitoring-three-dimensional'>Huang, Y. et. al., Monitoramento morfológico e fisiológico longitudinal de esferoides tumorais tridimensionais usando tomografia de coerência óptica. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o uso da tomografia de coerência óptica (OCT) para monitorar esferoides tumorais em uma placa de vários poços, capturando imagens transversais de alta...

Fonte: Lahne, M., et.al. Cultura de explantes retinianos de peixe-zebra transgênicos adultos para imagens de células vivas por microscopia multifotônica. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra imagens de células vivas da migração nuclear glial de Muller em explantes retinianos de peixe-zebra embebidos em agarose após danos por fotorreceptores induzidos por luz. O fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) liberado por fotorreceptores danificados ativa as células gliais de Muller, desencadeando a...

Fonte: Bénard, M., et al. Ex Vivo Imagem da migração de células granulares cerebelares pós-natais usando macroscopia confocal. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra um método macroscópico confocal para rastrear a migração ex vivo de células granulares em fatias cerebelares de cérebros de ratos pós-natais.

Fonte: Daynac, M., et. al. Classificação celular de células-tronco neurais e progenitoras da zona subventricular de camundongos adultos e imagens ao vivo de sua dinâmica do ciclo celular. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra imagens de lapso de tempo de células-tronco neurais (NSCs) de um cérebro de camundongo transgênico usando um microscópio confocal de varredura a laser. Os NSCs fluorescem em vermelho durante a fase G1 e não são fluorescentes em outras fases do ciclo celular. Uma cultura...

Fonte: Williams, A. L., et al. Imagem de lapso de tempo multifóton para visualizar o desenvolvimento em tempo real: visualização de células migratórias da crista neural em embriões de peixe-zebra. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo mostra um protocolo de imagem de lapso de tempo multifóton para visualizar a migração de células da crista neural em um embrião de peixe-zebra em tempo real com alta resolução.

Fonte: Jeong, S. Visualização do padrão de projeção axonal de neurônios motores embrionários em Drosophila. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a visualização de projeções axonais em embriões Drosophila. A imunomarcação de neurônios motores, a dissecção precisa para expor estruturas neuronais e a microscopia de contraste de interferência diferencial revelam coletivamente a arquitetura neuronal detalhada, enfatizando os padrões de projeção axonal.

Fonte: Canovic, E. P., et. al., Caracterização das propriedades mecânicas multiescala do tecido cerebral usando microscopia de força atômica, recuo de impacto e reometria. J. Vis. Exp. (2016)O vídeo demonstra o uso de recuo de impacto para medir as propriedades mecânicas de um tecido cerebral de camundongo hidratado, incluindo rigidez, dissipação de energia e amortecimento, por meio do deslocamento da sonda e análise de velocidade.

Fonte: Portela-Lomba, M., et. al. Cocultura de neurônios ganglionares da retina de ratos axotomizados com glia de revestimento olfativo, como um modelo in vitro de regeneração axonal adulta. J. Vis. Exp. (2020). Este vídeo demonstra imagens e quantificação da regeneração axonal em neurônios ganglionares da retina (RGNs) de ratos axotomizados co-cultivados com células da glia olfativas humanas imortalizadas. Os RGNs são imunomarcados, com somas vermelhos e axônios verdes. As imagens foram...

Fonte: Changou, C. A., et. al. Imagens ao vivo do tráfego de proteínas GLUT4 em neurônios hipotalâmicos primários de camundongos usando microscopia de deconvolução. J. Vis. Exp. (2017). Este vídeo mostra a imagem da translocação de GLUT4 induzida por insulina em neurônios hipotalâmicos, empregando microscopia de deconvolução para capturar e analisar a dinâmica do tráfego de GFP-GLUT4 com alta resolução.

Fonte: Kennedy, L. H., et. al. Visualização e imagem ao vivo de organelas de oligodendrócitos em fatias cerebrais organotípicas usando vírus adeno-associado e microscopia confocal. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a imagem de mitocôndrias de oligodendrócitos em fatias de cérebro de camundongos organotípicos. A fatia é colocada dentro de uma câmara de banho com circulação contínua de fluido e temperatura controlada. Depois de configurar vários parâmetros do microscópio confocal, imagens...

Fonte: Etienne, F. et al. Imagem de dois fótons da atração de processos microgliais por ATP ou serotonina em fatias cerebrais agudas. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o uso da microscopia de dois fótons para estudar a atração de processos microgliais em direção a um composto injetado em fatias cerebrais. Ele fornece uma visão geral da preparação de fatias de cérebro de camundongo, injeção de um composto de teste quimioatraente e imagens de microglia marcada com fluorescência para...

Fonte: Wang, Z., et al. Imagem in vivo de dois fótons transpupilares da retina de camundongos. J. Vis. Exp. (2021).Este vídeo demonstra uma técnica para imagens de retina in vivo usando microscopia de dois fótons. Os camundongos anestesiados são preparados para a imagem prendendo suas cabeças, aplicando lubrificante ocular e colocando uma lamínula sobre o olho. As células ganglionares da retina (RGCs) que expressam proteínas fluorescentes são visualizadas pela primeira vez usando...

Fonte: Bisht, K., et al. Mapeamento cerebral preciso para realizar imagens repetitivas in vivo da dinâmica neuroimune em camundongos. J. Vis. Exp. (2020)Este vídeo demonstra imagens de fluorescência da dinâmica neuroimune em um camundongo transgênico com implante de crânio. A estabilidade vascular e neuronal é visualizada juntamente com as alterações microgliais dinâmicas, refletindo as respostas imunes à atividade neuronal.

Fonte: Shannonhouse, J., et al. In vivo Imagem de cálcio de conjuntos neuronais em redes de neurônios sensoriais primários em gânglios da raiz dorsal intactos. J. Vis. Exp. (2023). O vídeo demonstra uma técnica de imagem de cálcio in vivo para monitorar a atividade neuronal nos gânglios da raiz dorsal (DRG) de um camundongo transgênico. Os neurônios DRG expressam um indicador de cálcio que aumenta a intensidade da fluorescência ao se ligar ao cálcio. Estímulos mecânicos ou térmicos aplicados a...

Fonte: Hellerman, M. B., et al. Imagens ao vivo do olho de pupa de Drosophila. J. Vis. Exp. (2015)O vídeo demonstra uma técnica de imagem ao vivo para estudar o padrão dos olhos em uma pupa de Drosophila melanogaster. Os marcadores marcados com proteína fluorescente verde (GFP) permitem a visualização da organização e diferenciação celular durante a formação da estrutura ocular em desenvolvimento.

Fonte: Ulivi, A. F., et. al. Imagem longitudinal de dois fótons do hipocampo dorsal CA1 em camundongos vivos. J. Vis. Exp. (2019) Este vídeo demonstra imagens longitudinais de dois fótons de neurônios piramidais marcados com fluorescência em um camundongo vivo, apresentando a preparação, alinhamento da cânula e imagem de dendritos e espinhas dendríticas para estudar a estrutura neuronal na região CA1 do hipocampo.

Fonte: Gómez-Villafuertes, R., et. al., imagens ao vivo seguidas de rastreamento de célula única para monitorar a biologia celular e a progressão da linhagem de várias populações neurais. J. Vis. exp. (2017) O O vídeo demonstra o processo de preparação, imagem e rastreamento de células-tronco neurais adultas em tempo real para estudar comportamentos celulares, incluindo divisão e diferenciação.

Source: Volpe, B. A., et al. ensaio de ablação e regeneração a laser baseado em microscópio confocal em células interneuromast de peixe-zebra. J. Vis. Exp. (2020) Este vídeo demonstra o monitoramento da recuperação de células interneuromastóides em peixe-zebra usando microscopia confocal, rastreando a morte e o reparo celular por meio de imagem de fluorescência com lapso de tempo.

Fonte: Fried, D. E., Gulbransen, B. D. In situ ca2+ Imagem do sistema nervoso entérico. J. Vis. Exp.. (2015)Este vídeo demonstra cálcio imagens para visualizar e analisar a atividade de neurônios entéricos e glia em preparações do plexo mioentérico do cólon de camundongos.

Source: <a style='text-decoration:none;' href='https://app.jove.com/v/55865/ coerência-óptica-tomografia-imagem-de-camundongo-células-ganglionares-de-retina-em-vivo'>Jagodzinska, J., et. al., Tomografia de Coerência Óptica: Imagem de células ganglionares da retina de camundongos In Vivo. J. Vis. exp. (2017) Neste vídeo, demonstramos o uso da tomografia de coerência óptica de domínio espectral (SD-OCT) para obter imagens das camadas da retina e avaliar as mudanças estruturais em um modelo...

Source: Chaney, A. M., et.al. Imagem PET de neuroinflamação usando [11C]DPA-713 em um modelo de mouse de traço isquêmico. J. Vis. Exp. (2018). Este vídeo demonstra uma técnica para imagens in vivo de neuroinflamação em um modelo de camundongo de AVC isquêmico usando um Radiotraçador específico para TSPO. Após a injeção, o radiotraçador se liga ao TSPO, uma proteína localizada na membrana mitocondrial externa e superexpressa em células imunes ativadas. Um scanner PET/CT detecta a distribuição do...

Fonte: Choi, J. P. et al. Indução e micro-CT de malformações cavernosas cerebrais em modelo de camundongo. J. Vis. exp. ( 2017)Este vídeo demonstra o uso de imagens de micro-TC para visualizar lesões de malformação cavernosa cerebral (CCM) em um cérebro de camundongo. Ele detalha as etapas de preparação da amostra, imagem e reconstrução de imagem 3D para avaliar a densidade e a localização das lesões de CCM no tecido cerebral.

Source: Schmitz, K., et al., Bioluminescência e Imagem de infravermelho próximo de neurite óptica e inflamação cerebral no modelo EAE de esclerose múltipla em camundongos. J. Vis. exp. (2017).Este vídeo demonstra o método para visualizar e monitorar a Encefalomielite Autoimune Experimental ou inflamação induzida por EAE no nervo óptico usando imagem de bioluminescência. Inclui o posicionamento do mouse, a injeção de reagentes e a captura de imagens sequenciais para monitorar as mudanças na...

Source: Ishimoto, H. et. al., Ex Vivo Calcium Imaging for Visualizing Brain Responses to Endocrine Signaling in Drosophila. J. Vis. Exp. (2018) Este vídeo demonstra imagens de cálcio para estudo Drosophila respostas cerebrais a neuropeptídeos. Os neurônios que expressam um indicador fluorescente de cálcio revelam a dinâmica do cálcio intracelular e as respostas funcionais às moléculas de sinalização.

Fonte: Al Omran, A. J., et al. Imagem ao vivo dos cílios ependimários nos ventrículos laterais do cérebro do camundongo. J. Vis. Exp. (2015). Este vídeo demonstra uma técnica de imagem ao vivo usando microscopia de contraste de interferência diferencial (DIC) para observar o batimento dos cílios ependimários em seções cerebrais sagitais de camundongos. Os cílios ependimários impulsionam o líquido cefalorraquidiano (LCR) e sua atividade é registrada em seções cerebrais mantidas em um meio rico...

Fonte: Pigazzini, M. L., et. al. Caracterização de estruturas amilóides no envelhecimento C. Elegans Usando imagens de fluorescência ao longo da vida. J. Vis. exp. (2020). Este vídeo demonstra o uso da microscopia de imagem de fluorescência (FLIM) para avaliar a agregação de proteínas poliQ em C. elegans}, comparando vermes deficientes em proteínas controle e chaperonas. O aumento da agregação em vermes deficientes em chaperonas promove a transferência de energia entre fluoróforos agrupados,...

Fonte: Landeira, B. S.,et al., Imagens ao vivo de células primárias do córtex cerebral usando um sistema de cultura 2D. J. Vis. Exp. (2017)O vídeo demonstra o uso de imagens de lapso de tempo para rastrear progenitores corticais marcados com fluorescência, monitorar sua divisão e diferenciação e estudar o desenvolvimento da linhagem em células primárias do córtex...

Fonte: Lee, H. et. al., Imagem de cálcio in vivo bem-sucedida com um microscópio miniaturizado montado na cabeça na amígdala de um camundongo que se comporta livremente. J. Vis. Exp. (2020)Este vídeo demonstra imagens de cálcio in vivo em um camundongo usando um índice de refração gradiente, ou lente GRIN, e um microscópio miniaturizado. A configuração combina a fixação da cabeça dentro de um sistema de gaiola móvel sem atrito, estimulando os neurônios e desencadeando o influxo de íons de...

Fonte: Thapa, R., et. al., Injeção Viral Estereotáxica e Implante de Lente de Índice de Gradiente para Imagem de Cálcio Cerebral Profundo In Vivo. J. Vis. Exp. (2021)O vídeo demonstra imagens de cálcio em tempo real usando um miniscópio em um camundongo transduzido, correlacionando a atividade neuronal com o comportamento.

Fonte: Moore, J. D., et al. Monitoramento justacelular e localização de neurônios únicos dentro de estruturas cerebrais subcorticais de ratos alertas e com a cabeça restrita. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o método de gravação e coloração justacelular em um rato contido e acordado. O procedimento envolve o registro de sinais de neurônios e a injeção de corante para localizar com precisão o local de gravação. Essa técnica permite o mapeamento preciso da atividade neural para a estrutura...

Fonte: Schramm, P. et al. Imagem in vivo de tecido cerebral totalmente ativo em larvas e juvenis de peixe-zebra acordados por remoção de crânio e pele. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra a imagem in vivo de neurônios cerebelares em larvas transgênicas de peixe-zebra, que expressam proteínas fluorescentes em neurônios de Purkinje. O processo envolve anestesiar as larvas, imobilizá-las em agarose e remover cuidadosamente a pele pigmentada para aumentar a penetração da luz e a intensidade da...

Fonte: Ing-Esteves, S. & Lefebvre, J. L. Time-Lapse Imaging of Neuronal Arborization using Sparse Adeno-Associated Virus Labeling of Genetically Targeted Retinal Cell Populations. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra o uso da microscopia confocal para visualizar a dinâmica dendrítica em explantes retinianos de camundongos vivos. Ele descreve as etapas para estabilizar a retina sob um microscópio confocal, realizando imagens de epifluorescência para visualizar interneurônios amácrinos...

Fonte: Kamei, R., et. al., Imagem crônica de dois fótons in vivo da microglia no hipocampo de camundongos. J. Vis. Exp. (2022)O vídeo demonstra o processo de configuração e imagem para microscopia in vivo de dois fótons da dinâmica microglial no hipocampo CA1 (Cornu ammonis 1) e giro denteado, garantindo o alinhamento óptico ideal e a avaliação da integridade estrutural.

Fonte: Lukasz, D., et al. Imagem de cálcio in vivo de células ciliadas da linha lateral em larvas de peixe-zebra. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra imagens ao vivo do influxo de cálcio nas células ciliadas da linha lateral de uma larva de peixe-zebra transgênica paralisada usando um microscópio confocal. A estimulação mecânica dos feixes de cabelo por meio de pulsos de fluido induz a entrada de cálcio através de canais de mecanotransdução e canais dependentes de voltagem, que é...

Fonte: Louth, E. L., et al. Imagem de neurônios em seções cerebrais espessas usando o método de Golgi-Cox. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a imagem de neurônios em uma seção espessa do cérebro corada de Golgi-Cox, definindo os limites de foco superior e inferior e capturando imagens sobrepostas. Vários locais são fotografados para garantir projeções neuronais detalhadas, que são combinadas para criar uma representação 3D.

Fonte: Heredia, D. J., et. al. Imagem ex vivo da sinalização de cálcio específica da célula na sinapse tripartida do diafragma do camundongo. J. Vis. exp.}} (2018) Este vídeo demonstra imagens de fluorescência Caracterização da dinâmica do cálcio nas junções neuromusculares (NMJs) em um camundongo transgênico que expressa indicadores de cálcio geneticamente codificados. Um NJM é identificado por receptores de acetilcolina marcados com fluorescência no diafragma com o nervo frênico. Um divisor...

Fonte: Pekarek, B. T., et. al., Imagem e quantificação de dendritos neuronais intactos via limpeza de tecido CLARITY. J. Vis. Exp. (2021)Neste vídeo, demonstramos a preparação, imagem e análise de um cérebro de camundongo limpo para examinar árvores dendríticas, morfologia da coluna vertebral e distribuição neuronal usando microscopia confocal e técnicas de reconstrução 3D.

Fonte: Refaeli, R., et al., Investigação da interação espacial entre astrócitos e neurônios em cérebros limpos. J. Vis. Exp. (2022) O vídeo demonstra a preparação de uma câmara e a neuroimagem do tecido do hipocampo de camundongo limpo usando microscopia de dois fótons para visualizar as interações espaciais entre astrócitos marcados com fluorescência e neurônios excitatórios.

Source: Chan, U., et al., Utilizando a eletroporação pós-natal in vivo para estudar a morfologia dos neurônios do grânulo cerebelar e o desenvolvimento da sinapse. J. Vis. exp. (2021).Este vídeo demonstra a análise do desenvolvimento do neurônio do grânulo cerebelar por meio de imagens de fatias de tecido cerebral pré-fixadas de camundongos marcados com uma proteína fluorescente, capturar imagens Z-stack de alta resolução com um microscópio confocal e medir parâmetros estruturais, incluindo...

Fonte: Maruoka, H., et. al. Imagem simultânea da dinâmica microglial e atividade neuronal em camundongos acordados. J. Vis. Exp.Exp.. (2022) Este vídeo mostra um procedimento de microscopia de dois fótons para imagem da atividade neuronal e da dinâmica microglial em um camundongo acordado durante a estimulação visual, destacando transientes de cálcio e interações celulares.

Fonte: Moye, S. L., et.al. Visualizando a morfologia dos astrócitos usando a iontoforese amarela de Lúcifer. J. Vis. Exp. (2019). Este vídeo demonstra o uso de iontoforese de corante fluorescente para estudar a morfologia de astrócitos em fatias fixas de cérebro. Ele detalha a perfuração do soma do astrócito com um eletrodo para fornecer um corante aniônico e hidrofílico no citoplasma sob uma corrente de baixa voltagem, permitindo que o corante se difunda e rotule o soma e os ramos. A...

Fonte: Jongbloets, B. C., et al. Visualizando a atividade da proteína quinase A em camundongos com comportamento fixo na cabeça usando microscopia de imagem de fluorescência de dois fótons in vivo. J. Vis. Exp. (2019) Este vídeo demonstra um procedimento de microscopia de imagem de fluorescência de dois fótons para visualizar a atividade da proteína quinase A em camundongos com comportamento fixo na cabeça durante a locomoção forçada.

Fonte: Kwon, J., et al., Microscopia Reflectométrica Espectral em Axônios Mielinizados In Situ. J. Vis. Exp. (2018) Este vídeo demonstra o uso da reflectometria espectral com um microscópio confocal hiperespectral para analisar padrões de interferência e determinar diâmetros de axônios mielinizados em fatias fixas de tecido cerebral.

Comece com um paciente com meningioma, ou tumor cerebral, posicionado em um scanner de ressonância magnética para imagens cerebrais não invasivas. Ajuste o scanner para obter imagens estruturais de fatias individuais do cérebro. Aumente o contraste para melhorar a diferenciação do tecido. Use imagens de taxa de transferência de magnetização entre fatias cerebrais usando pulsos de radiofrequência ligeiramente deslocados do sinal de ressonância magnética. Os pulsos fornecem energia ao pool de...

Source: Liau, E. S. et al. Visualização da navegação do axônio motor e quantificação da arborização do axônio em embriões de camundongo usando microscopia de fluorescência de folha de luz. J. Vis. Exp. (2018). Este vídeo demonstra o uso de microscopia de fluorescência de folha de luz para obter imagens de projeções de neurônios motores e ramificação de axônios em embriões de camundongos transgênicos. Ele descreve as etapas envolvidas na preparação da amostra, imagem e reconstrução 3D da...

O mapeamento quantitativo de suscetibilidade, ou QSM, quantifica a suscetibilidade magnética do tecido cerebral, que reflete sua composição celular, como o conteúdo de mielina. Comece adquirindo dados de ressonância magnética ex-vivo ou ressonância magnética de um hemisfério cerebral humano fixo. Use campos magnéticos de gradiente 3D para magnetizar o tecido e coletar sinais em vários pontos de tempo ou ecos para reduzir o ruído de fundo e artefatos e aprimorar os sinais. Gere mapas de fase...

Fonte: Feng, Y., }et al. Caracterização viscoelástica de fantasmas de gelatina que imitam tecidos moles usando elastografia de indentação e ressonância magnética. J. Vis. Exp. (2022)} }Este vídeo demonstra o método de elastografia por ressonância magnética (MRE) para avaliar as propriedades viscoelásticas do tecido analisando propagação de ondas de cisalhamento através de um fantasma de gelatina, imitando o tecido cerebral. O processo envolve a geração e captura de ondas de cisalhamento com...

Source: Boyer, N. P. et. al., Imagem e análise do transporte de neurofilamentos no nervo tibial de camundongo excisado. J. Vis. Exp. (2020) Este vídeo demonstra o método de fotoativação por fluorescência para analisar o transporte de neurofilamentos em axônios mielinizados de nervos periféricos. Ao rastrear neurofilamentos marcados com fluoróforo verde fotoativado, a técnica fornece informações sobre o transporte axonal em doenças neurodegenerativas.

Fonte: Kulkarni, M. et al. Dinâmica de Ca2+ em terminais axônicos fotorreceptores de cone da retina de camundongos. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o uso de microscopia de dois fótons para monitorar a dinâmica do cálcio em fotorreceptores de cone de uma retina de camundongo transgênico. Ele descreve as etapas para preparar fatias de retina, imagens de biossensores de cálcio baseados em FRET e analisar alterações de fluorescência para quantificar os níveis de cálcio sob iluminação de...

Fonte: Nishidate, I., et al. Avaliação simultânea da hemodinâmica cerebral e das propriedades de espalhamento de luz do cérebro de rato in vivo usando imagens de refletância difusa multiespectral. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o uso de imagens de refletância difusa multiespectral para analisar o fluxo sanguíneo cerebral, os níveis de oxigênio e as alterações na estrutura do tecido em um rato anestesiado, fornecendo informações sobre a hemodinâmica e morfologia do cérebro sob condições...

Fonte: Van Wonterghem, E., et al. Microdissecção e visualização de microscopia eletrônica de varredura de montagem inteira do plexo coróide de camundongo. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra a preparação e imagem do tecido do plexo coróide de um cérebro de camundongo usando microscopia eletrônica de varredura (MEV). O processo inclui fixação de tecido, desidratação e revestimento com uma camada condutora de platina para estabilizar e preparar a amostra para imagem. O SEM captura imagens...

Fonte: Kato, D. et. al., Avaliação e Manipulação da Atividade Neural Usando Microscopia Holográfica de Dois Fótons. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra a técnica de imagem de dois fótons combinada com optogenética usando microscopia holográfica. Usando um modulador de luz espacial, essa técnica permite a estimulação neuronal precisa expressando a proteína sensível à luz vermelha e a imagem de cálcio com fotodano mínimo. Essa abordagem fornece insights sobre a conectividade funcional e a...

Fonte: Canovic, E. P., et al. Caracterização de propriedades mecânicas multiescala do tecido cerebral usando microscopia de força atômica, recuo de impacto e reometria. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra o uso da microscopia de força atômica (AFM) para medir as propriedades viscoelásticas do tecido cerebral, onde um cantilever com uma sonda esférica interage com o tecido e se dobra sob forças aplicadas. Um feixe de laser desviado para um detector rastreia o cantilever para medir a...

Fonte: Canovic, E. P., et al. Caracterização de propriedades mecânicas multiescala do tecido cerebral usando microscopia de força atômica, recuo de impacto e reometria. J. Vis. Exp. (2016)Neste vídeo, um reômetro foi usado para aplicar movimento rotacional oscilatório controlado ao tecido cerebral para gerar tensão de cisalhamento e avaliar as propriedades viscosas e elásticas do tecido. O reômetro, como ferramenta funcional, fornece informações sobre a mecânica cerebral durante lesões ou...

Fonte: Hare, D. J., et.al. Imagem de metais no tecido cerebral por ablação a laser - plasma indutivamente acoplado - espectrometria de massa (LA-ICP-MS). J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o uso de espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado por ablação a laser (LA-ICP-MS) para visualizar e quantificar as distribuições de metais no tecido cerebral de camundongos. O protocolo envolve ablação a laser para gerar um aerossol de partículas de amostra, ionização das partículas em...

Fonte: Piazza, V., et al., Óptica não linear sem rótulo para o estudo de defeitos dependentes de tubulina na mielina central. J. Vis. Exp. (2023)Este vídeo demonstra o procedimento para obter imagens de anormalidades de microtúbulos em uma fatia de tecido cerebral de rato usando um microscópio de excitação de dois fótons. Ele emprega sinais de geração de segundo harmônico (SHG) para detectar defeitos de tubulina e reduzir a produção de mielina.

Fonte: Daniele, F., et. al TIRFM e sondas GFP sensíveis ao pH para avaliar a dinâmica da vesícula do neurotransmissor em células de neuroblastoma SH-SY5Y: imagem celular e análise de dados. J. Vis. Exp. (2015). Este vídeo demonstra a imagem de células de neuroblastoma humano usando um microscópio de fluorescência de reflexão interna total (TIRF) para visualizar vesículas sinápticas marcadas com fluoróforo. As células são focadas primeiro no modo de epifluorescência. Os ajustes são então feitos...

Fonte: Winkle, C. C., et al. Utilizando metodologias combinadas para definir o papel da entrega da membrana plasmática durante a ramificação do axônio e a morfogênese neuronal. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a microscopia de fluorescência de reflexão interna total (TIRF) para visualizar eventos exocíticos em neurônios corticais. Um marcador de proteína fluorescente verde (GFP) sensível ao pH fluoresce após a fusão da vesícula, com excitação seletiva de TIRF capturando exocitose...

Fonte: McCullagh, E. A., et al. Aplicação de Espectroscopia Raman Anti-Stokes Coerente (CARS) para mielinização de imagem em fatias de cérebro. J. Vis. Exp. (2022)O vídeo demonstra imagens de fluorescência e espectroscopia Raman anti-Stokes coerente (CARS) para visualizar a arquitetura neuronal no tecido cerebral de roedores. A coloração de Nissl marca os corpos celulares ligando-se ao RNA ribossômico, enquanto a imagem CARS tem como alvo a mielina rica em lipídios por meio de sinais induzidos...

Fonte: Hontani, Y., et al. Microscopia de fluorescência de três fótons de tecido profundo em cérebro intacto de camundongo e peixe-zebra. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra a configuração e execução de imagens de três fótons em um cérebro de peixe-zebra anestesiado. O protocolo permite a visualização de tecidos profundos de neurônios marcados com fluorescência, revelando atividade neuronal em tempo real e estruturas para aplicações de pesquisa em neurociência.