Este vídeo demonstra a análise de estruturas amilóides com microscopia de imagem de fluorescência ou FLIM, usando corante hFTAA para revelar núcleos compactos como azul/verde e periferias instáveis como vermelho/amarelo em imagens codificadas por cores, refletindo a organização amilóide.
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Artigo de método
Analisando estruturas amilóides em uma seção de tecido usando microscopia de imagem de fluorescência
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28 de abril de 2025
Neste artigo
Resumo
Protocolo
1. Preparação de amostras de tecido
NOTA: Muitos tipos de tecido podem ser fotografados usando ácido heptâmero-formil tiofeno acético (hFTAA) como marcador amilóide. hFTAA é sensível à conformação agregada. A coloração deve, portanto, ser realizada preferencialmente em agregados ininterruptos sem exposição de epítopos. A qualidade espectral ideal é alcançada se a fixação do tecido for mantida no mínimo. Portanto, o material fresco congelado, suavemente fixado em etanol no momento da coloração, é prefe....
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Materiais
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| hFTAA/Amytracker545 | Ebba Biotech | ||
| Dako Meio de montagem fluorescene | Agilent technologies | GM304 | |
| LeicaDM6000 | Leica | ||
| Lumen 200 | Prior | ||
| Spectraview system | ASI spectral imaging | ||
| Spectraview software | ASI spectral imaging | ||
| LSM780 | Zeiss | ||
| Zen 2010b v6.0 software | Zeiss | ||
| FLIM system | Becker & Hickl | ||
| Ar/ML 458/488/514 | Zeiss | ||
| Tunable Laser In Tune | Zeiss |
