Visualizando a sinaptogênese de neurônios do grânulo cerebelar em diferentes estágios de desenvolvimento

Resumo

Source: Chan, U., et al., Utilizando a eletroporação pós-natal in vivo para estudar a morfologia dos neurônios do grânulo cerebelar e o desenvolvimento da sinapse. J. Vis. exp. (2021).

Este vídeo demonstra a análise do desenvolvimento do neurônio do grânulo cerebelar por meio de imagens de fatias de tecido cerebral pré-fixadas de camundongos marcados com uma proteína fluorescente, capturar imagens Z-stack de alta resolução com um microscópio confocal e medir parâmetros estruturais, incluindo comprimento de neuritos, formação de garras dendríticas, área de superfície e volume para estudar a sinaptogênese.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo amostras de animais foram revisados e aprovados pelo comitê de revisão ética animal apropriado.

1. Análises morfológicas de neurônios de grânulos cerebelares ou CGNs - reconstrução tridimensional (3D) e área de superfície e volume celular

1. Imagem de CGNs eletroporados únicos em um microscópio confocal a objetiva de 63x com zoom de 2x, tirando imagens de pilha z a 0,5 μm por pilha. Imagem de uma célula por janela de imagem para permitir f....

Resultados

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Imaris	Bitplane
Zeiss 780 Upright Confocal	Zeiss	780