Imagem simultânea da dinâmica microglial e atividade neuronal em um camundongo acordado

Resumo

Fonte: Maruoka, H., et. al. Imagem simultânea da dinâmica microglial e atividade neuronal em camundongos acordados. J. Vis. Exp.Exp.. (2022)

Este vídeo mostra um procedimento de microscopia de dois fótons para imagem da atividade neuronal e da dinâmica microglial em um camundongo acordado durante a estimulação visual, destacando transientes de cálcio e interações celulares.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

Imagem in vivo de dois fótons da microglia e dinâmica neuronal do cálcio

1. Habituação de camundongos ao aparelho microscópico

1. Três semanas após a cirurgia, induzir anestesia no camundongo com isoflurano a 3% e colocar o camundongo sob a lente objetiva de 25x de um microscópio de dois fótons usando um instrumento estereotáxico feito sob medida (Figura 1C). Para a configuração, o mouse é colocado no topo de uma esteira e pode funcionar livremente. ....

Resultados

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
monitor LCD de 10 polegadas	EIZO	DuraVision FDX1003	Para apresentar estímulos visuais irritantes
Black folha de alumínio	THORLABS	BKF12
CX3CR1-EGFP mouse	Laboratório Jackson	IMSR_JAX: 005582	CX3CR-1EGFP/+ knock-in/knock-out camundongos expressando EGFP em microglia no cérebro sob o controle do locus Cx3cr1 endógeno
DENT SILICONE-V	Shofu Inc	N/A	Para a anexação de um sombreamento device a uma placa de cabeça
Head-plate<	N/A	Material: SUS304, espessura: 0.5mm
Isoflurano	Pfizer	N/A
Microscópio de excitação multifóton	NIKON	N/A	O nome comercial é "A1MP+"
Objective lens	NIKON	N/A	O nome comercial é "CFI75 apochromat 25xC W".
Psychtoolbox		Software livre	Para apresentar estímulos visuais irritantes
Dispositivo de sombreamento	Customized	N/A
Stereotaxic instrument	Customized	N/A	Para fixar mouses sob o microscópio de dois fótons microscope
Treadmill	Customized	N/A

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