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Visualização de um trombo cerebral em um camundongo usando imagens de microtomografia computadorizada

June 17th, 2025

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Abstract

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Fonte: Kim, D., et. al. Imagem fluorescente combinada de infravermelho próximo e microtomografia computadorizada para visualização direta de tromboêmbolos cerebrais. J. Vis. Exp. (2016)

Este vídeo demonstra a visualização de trombos cerebrais em camundongos usando imagens de microtomografia computadorizada (micro-CT). Um modelo de camundongo tromboso cerebral é injetado com nanopartículas de ouro direcionadas à fibrina que atuam como um agente contrastante. O mouse é colocado na cama de uma máquina de micro-CT e as imagens são adquiridas de vários ângulos. Usando o software apropriado, as imagens são reconstruídas e processadas.

Protocol

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Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Preparação de coágulo formado exogenamente marcado com marcador de fluorescência (Figura 1)

  1. Anestesiar um camundongo em uma câmara de indução usando isoflurano a 3% misturado com 30% de oxigênio (1,5 L/min 100% de oxigênio). Garanta a profundidade adequada da anestesia observando o tônus muscular e confirmando a ausência do reflexo de pinça do dedo do pé.
  2. Coloque o animal em uma cortina estéril em decúbito ventral e mantenha-o sob anestesia usando uma máscara de inalação e is....

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Results

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Figura 1: Visão geral da preparação do coágulo sanguíneo marcado com fluorescência. (A) Mistura de sangue total fresco com sonda fluorescente de infravermelho próximo (NIRF) Cy5.5 (C15) que está covalentemente ligada às fitas de fibrina do t.......

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Machines
microCTNanoFocusRay, JeonJu, CoreiaNFR Polaris-G90
Perimed, Estocolmo, Suécia 5000
Microscópio cirúrgicoLeica Microsystems, Seul, CoréiaEZ4HD
PerkinElmer, Massachusetts, EUAXGI-8
Software
Controle NFRNanoFocusRay, JeonJu, CoréiaNFR Polaris-G90microCT software de controle
LucionInfinitt, Seul, CoréiaLucion3D render imaging software
Gráfico de laboratório 7ADInstruments, Colorado, EUAGráfico de laboratório 7rCBF
Image J softwareWanye Rasband, NIH, EUAAnálise de imagem1.49d
Dispositivos/Instrumentos
Bomba de infusãoHarvard, Massachusetts, EUAbomba 22( 55-2226)
Manta homeotérmicaPanlab, Barcelona, EspanhaHB101
Cautério de bolsoDaejong, Seul, CoréiaDJE-39
Matriz cerebralTed pella, CA, EUA15003seção coronal
PE-50 tubulaçãoNatsume, Tóquio, JapãoSP-45 (PE-50)ID 0,58 mm OD 0,96 mm
PE-10 tubulaçãoNatsume, Tóquio, JapãoSP-10(PE-10)I.D. 0.28mm O.D. 0.61 mm
30 gaugeagulha sungshim-medical, Seul, Coreia
SeringaCPL-medical, Ansan, Coreia 1 & 3 cc
GazePanamedic, Cheonan, Coreia
FitaScotch, Seul, Coreia3M-810
Micro fórcepsFine Science Tools, Vancouver, Canadá11253-27Dumont #L5
Micro tesouraFine Science Tools, Vancouver, Canadá15000-03Vannas spring
ScissorFine Science Tools, Vancouver, Canadá14084-08de 8,5 cm
Ailee, Busan, CoréiaSK6071, SK7286-0 e 7-0
Reagentes
MeloxicamYuhan, Seul, Coreia
Pomada veterináriaNovartis, Basel, Swiss
10% Povidona-iodo (betadina)Firson, Cheon-an, Coreia
Cloreto férricoSigma, Missouri, Estados Unidos157740-5G
TTCAmresco, Ohio, EUA0765-100g
IsofluranoHana-Pham, Gyeonggi, CoréiaIfran100 mL
PBS Welgene, Daegu, CoréiaLB001-02500 mL
Síntese de nanopartículas
Solução salina normalDaihan Pham, Seul, Coréia48N3AF320 mL
Medidor de vazão Doppler a laser Máquina de anestesia por inalação Sutura de seda preta de ouro

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Cerebral ThrombusMicro Computed TomographyFibrin Targeted Gold NanoparticlesMouse ModelImaging AgentPenile Vein InjectionNeck StraighteningImage ReconstructionImage ProcessingThrombus Visualization

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