Este vídeo demonstra a visualização de trombos cerebrais em camundongos usando imagens de microtomografia computadorizada (micro-CT). Um modelo de camundongo tromboso cerebral é injetado com nanopartículas de ouro direcionadas à fibrina que atuam como um agente contrastante. O mouse é colocado na cama de uma máquina de micro-CT e as imagens são adquiridas de vários ângulos. Usando o software apropriado, as imagens são reconstruídas e processadas.
Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.
1. Preparação de coágulo formado exogenamente marcado com marcador de fluorescência (Figura 1)
Anestesiar um camundongo em uma câmara de indução usando isoflurano a 3% misturado com 30% de oxigênio (1,5 L/min 100% de oxigênio). Garanta a profundidade adequada da anestesia observando o tônus muscular e confirmando a ausência do reflexo de pinça do dedo do pé.
Coloque o animal em uma cortina estéril em decúbito ventral e mantenha-o sob anestesia usando uma máscara de inalação e is....
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Figura 1: Visão geral da preparação do coágulo sanguíneo marcado com fluorescência. (A) Mistura de sangue total fresco com sonda fluorescente de infravermelho próximo (NIRF) Cy5.5 (C15) que está covalentemente ligada às fitas de fibrina do t.......
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Materials
List of materials used in this article
Name
Company
Catalog Number
Comments
Machines
microCT
NanoFocusRay, JeonJu, Coreia
NFR Polaris-G90
Perimed, Estocolmo, Suécia
5000
Microscópio cirúrgico
Leica Microsystems, Seul, Coréia
EZ4HD
PerkinElmer, Massachusetts, EUA
XGI-8
Software
Controle NFR
NanoFocusRay, JeonJu, Coréia
NFR Polaris-G90
microCT software de controle
Lucion
Infinitt, Seul, Coréia
Lucion
3D render imaging software
Gráfico de laboratório 7
ADInstruments, Colorado, EUA
Gráfico de laboratório 7
rCBF
Image J software
Wanye Rasband, NIH, EUA
Análise de imagem
1.49d
Dispositivos/Instrumentos
Bomba de infusão
Harvard, Massachusetts, EUA
bomba 22( 55-2226)
Manta homeotérmica
Panlab, Barcelona, Espanha
HB101
Cautério de bolso
Daejong, Seul, Coréia
DJE-39
Matriz cerebral
Ted pella, CA, EUA
15003
seção coronal
PE-50 tubulação
Natsume, Tóquio, Japão
SP-45 (PE-50)
ID 0,58 mm OD 0,96 mm
PE-10 tubulação
Natsume, Tóquio, Japão
SP-10(PE-10)
I.D. 0.28mm O.D. 0.61 mm
30 gauge
agulha sungshim-medical, Seul, Coreia
Seringa
CPL-medical, Ansan, Coreia
1 & 3 cc
Gaze
Panamedic, Cheonan, Coreia
Fita
Scotch, Seul, Coreia
3M-810
Micro fórceps
Fine Science Tools, Vancouver, Canadá
11253-27
Dumont #L5
Micro tesoura
Fine Science Tools, Vancouver, Canadá
15000-03
Vannas spring
Scissor
Fine Science Tools, Vancouver, Canadá
14084-08
de 8,5 cm
Ailee, Busan, Coréia
SK6071, SK728
6-0 e 7-0
Reagentes
Meloxicam
Yuhan, Seul, Coreia
Pomada veterinária
Novartis, Basel, Swiss
10% Povidona-iodo (betadina)
Firson, Cheon-an, Coreia
Cloreto férrico
Sigma, Missouri, Estados Unidos
157740-5G
TTC
Amresco, Ohio, EUA
0765-100g
Isoflurano
Hana-Pham, Gyeonggi, Coréia
Ifran
100 mL
PBS Welgene, Daegu, Coréia
LB001-02
500 mL
Síntese de nanopartículas
Solução salina normal
Daihan Pham, Seul, Coréia
48N3AF3
20 mL
Medidor de vazão Doppler a laser Máquina de anestesia por inalação Sutura de seda preta de ouro
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