Imagem de refletância difusa multiespectral do fluxo sanguíneo cerebral de ratos e estrutura tecidual

Resumo

Fonte: Nishidate, I., et al. Avaliação simultânea da hemodinâmica cerebral e das propriedades de espalhamento de luz do cérebro de rato in vivo usando imagens de refletância difusa multiespectral. J. Vis. Exp. (2017)

Este vídeo demonstra o uso de imagens de refletância difusa multiespectral para analisar o fluxo sanguíneo cerebral, os níveis de oxigênio e as alterações na estrutura do tecido em um rato anestesiado, fornecendo informações sobre a hemodinâmica e morfologia do cérebro sob condições variadas.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Aquisição de imagens de amostra
   Nota: Imagens de intensidade de luz difusamente refletida do cérebro de rato exposto em nove comprimentos de onda são capturadas e salvas no disco rígido de um computador pessoal usando as mesmas condições de aquisição.
   1. Coloque suavemente o rato no palco e ajuste lentamente o nível do palco para que a câmera possa focar na superfície do cérebro do rato.
   2. Selecione o comando "salvar" no menu de arquivo para salvar uma imagem em um arquivo.
   3. Altere a localização do filtro girando a roda do filtro.
   4. Salve uma imagem nos outros comprimentos de onda de acordo com o processo descrito acima. O nome do arquivo deve identificar a amostra e o comprimento de onda (, por exemplo, R500, R520, R540 ... R760).
2. Aquisição de imagens escuras
   NOTA: A câmera CCD (dispositivo acoplado com carga) pode gerar uma intensidade de luz em resposta a um sinal elétrico. No entanto, há uma saída menor devido ao ruído nos circuitos elétricos e detectores, mesmo que a luz não entre no detector; Isso é chamado de ruído de corrente escura. Para medir com precisão a intensidade espectral da luz, o componente da corrente escura deve ser registrado como uma imagem escura e, em seguida, subtraído do sinal medido. A imagem escura é uma imagem tirada com o caminho da luz bloqueado.
   1. Desligue a fonte de luz da lâmpada halógena.
   2. Bloqueie o caminho da luz para o sistema de câmera CCD usando uma placa de blindagem.
   3. Selecione o comando "salvar" no menu de arquivo para salvar uma imagem em um arquivo. O nome do arquivo deve identificar a amostra (, por exemplo, Dark).

Materiais

< >< tabela class='ck-table-resized'>Lista de materiais utilizados neste artigo Nome Empresa Número de catálogo Comentários 150-W fonte de luz de lâmpada halógenaHayashi Watch Works Co., Ltd, Tóquio, JapãoLA-150SAEGuia de luzHayashi Watch Works Co., Ltd, Tóquio, JapãoLGC1-5L1000Lente coletoraHayashi Watch Works Co., Ltd, Tóquio, JapãoSH-F16Filtros de interferência l@500nmEdmund Optics Japan Ltd, Tóquio, Japão#65088Filtros de interferência l@520nmEdmund Optics Japan Ltd, Tóquio, Japão#65093Filtros de interferência l@540nmEdmund Optics Japan Ltd, Tóquio, Japão#65096Filtros de interferência l@560nmEdmund Optics Japan Ltd, Tóquio, Japão#67766Filtros de interferência l@570nmEdmund Optics Japan Ltd, Tóquio, Japão#67767Filtros de interferência l@580nmEdmund Optics Japan Ltd, Tóquio, Japão#65646Filtros de interferência l@600nmEdmund Optics Japan Ltd, Tóquio, Japão#65102Filtros de interferência l@730nmEdmund Optics Japan Ltd, Tóquio, Japão#65115Filtros de interferência l@760nmEdmund Optics Japan Ltd, Tóquio, Japão#67777Roda de filtro motorizadaAndover Corporation, NH, EUAFW-MOT-12.5Câmera CCD refrigerada de 16 bitsBitran, JapãoBS-40Lente de zoom de vídeoEdmund Optics Japan Ltd, Tóquio, JapãoVZMTM300iPadrão branco espectralon com refletância difusa de 99%Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, EUASRS-99-020