Visualizando a migração de células da crista neural em um embrião de peixe-zebra usando imagens de lapso de tempo multifóton

Abstract

Fonte: Williams, A. L., et al. Imagem de lapso de tempo multifóton para visualizar o desenvolvimento em tempo real: visualização de células migratórias da crista neural em embriões de peixe-zebra. J. Vis. Exp. (2017)

Este vídeo mostra um protocolo de imagem de lapso de tempo multifóton para visualizar a migração de células da crista neural em um embrião de peixe-zebra em tempo real com alta resolução.

Protocol

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Configuração do microscópio para imagens com lapso de tempo

1. Determinando as configurações do laser

1. Determinando o comprimento de onda do laser a ser usado. Use um comprimento de onda que seja o dobro do comprimento de onda de excitação do fluoróforo de interesse (por exemplo, comprimento de onda entre 880 e 940 nm para proteína fluorescente verde (GFP).
NOTA: No presente e....

Results

Figura 1. Configuração. A. Cada componente do aparelho de montagem de embriões, incluindo a câmara de banho aberta, a plataforma de troca rápida e o adaptador de platina. B. Montagem da câmara de banho abert.......

Materials