Este vídeo demonstra uma técnica baseada em microinjeção para registro e inibição neuronal simultânea no colículo superior de ratos. O procedimento envolve direcionamento estereotáxico, perfuração do crânio e a inserção de um injetor, que fornece um neurotransmissor inibitório enquanto registra a atividade neuronal. A estimulação da luz evoca potenciais de ação, enquanto a microinjeção de drogas suprime a excitabilidade neuronal. À medida que os níveis de neurotransmissores diminuem, a atividade neuronal retorna à linha de base, permitindo o estudo da inibição e da recuperação.
Artigo de método
Inibição da atividade neuronal e sua detecção usando eletrofisiologia em um rato
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7 de agosto de 2025
Neste artigo
Resumo
Protocolo
Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.
1. Montagem da pipeta de injeção de gravação
- Puxe um capilar de vidro de aproximadamente 7 cm de comprimento (1 mm de diâmetro externo) usando um extrator de pipeta.
- Quebre a ponta do capilar e verifique a abertura sob um microscópio de luz. Confirme se o diâmetro interno está entre 30 μm e 40 μm.
- Insira um fio de prata de 7 cm de comprimento no capilar de vidro com aproximadamente 1 cm saliente da extremidade não cônica da pipeta de vidro.
- Dobre o excesso de filam....
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Resultados
Figura 1: Representação esquemática do conjunto injectrode. Uma microseringa (A) é conectada à pipeta de registro-injeção, que consiste em uma agulha hipodérmica de 30 G (B) aderida a um fio de prata (.......
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Bomba de injeção (UltraMicroPump III) | WPI | #UMP3 | |
| Console de injeção (Micro4 Controller) | WPI | #SYS-MICRO4 | |
| Seringa Hamilton | Hamliton | (80301) 701LT 10 μL SYR | Seringas entre 5 e 10 μL usadas |
| Adesivo de cianoacrilato em gel | Krazy Glue | KG86648R | A forma de gel é mais fácil de aplicar na haste da agulha hipodérmica 30G |
| Pipetas de vidro | WPI | #TW100F-4 | Parede fina, 1mm OD, 0,75mm ID com pipetas de filamento usadas |
| 720 Extrator de pipeta de agulha | Kopf | 720 | |
| Fio de prata | A-M Systems, Inc. | 782500 | 0,010 " desencapados |
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