Imagens in vivo do transporte de líquido cefalorraquidiano em um cérebro de camundongo usando macroscopia de fluorescência

Resumo

Fonte: Sweeney, A. M., et al. Imagem in vivo do transporte de líquido cefalorraquidiano através do crânio intacto do camundongo usando macroscopia de fluorescência. J. Vis. Exp. (2019)

Este vídeo demonstra o processo de visualização do fluxo do líquido cefalorraquidiano (LCR) no cérebro de um camundongo usando imagens de fluorescência. Um traçador fluorescente é injetado na cisterna magna (MC), permitindo que seu movimento com o LCR seja rastreado através dos espaços subaracnóideo e perivascular. A imagem de lapso de tempo captura a jornada do traçador, destacando sua distribuição no tecido cerebral por meio de arteríolas.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Preparando a cânula da cisterna magna, a placa da cabeça e o suporte da cabeça

1. Esterilize todos os instrumentos cirúrgicos e placas da cabeça antes da cirurgia.
   NOTA: Os traçadores fluorescentes são entregues diretamente no LCR por meio de uma canulação da cisterna magna.
2. Resumidamente, usando uma chave de agulha, quebre a ponta de uma agulha de 30G x 12.7 mm (1/2 polegada), 3/4 do caminho para baixo, e coloque a ponta romba da agulha em uma extremidade do....

Resultados

Figura 1. Imagem macroscópica transcraniana. (A) Esquema da configuração da imagem macroscópica. (B) Vista dorsal da posição da placa da cabeça no crânio. O osso interparietal e os ossos nasal, frontal e par.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
0.25% Bupivacaine HCl			University of Rochester Vivarium
100 μL Seringa à prova de gás modelo 1710 TLL, PTFE Luer Lock	Hamilton Company	81020
A-M Systems Cimento Dental em Pó	Fisher Scientific	NC9991371
Carprofeno			Universidade de Rochester Vivarium
Clorexidina	Prevantics	B10800
Câmera CMOS	Hammamatsu	ORCA Flash 4.0
Placa de Cabeça	Universidade de Rochester	Sem catálogo #	Feito sob medida na oficina mecânica da Universidade de Rochester
Cautery de alta temperatura	Bovie Medical Corporation	AA01
Acelerador Insta-set	Bob Smith Industries	BSI-151
Isoflurano - Fluriso	Vet One	502017	Universidade de Rochester Vivarium
Ketamine			Strong Memorial Hospital Pharmacy
Krazy Glue	Elmer's Products, Inc	Sem catálogo #, veja o link nos comentários	https://www.amazon.com/Krazy-Glue-KG48348MR-Advance-Multicolor/dp/B000BKO6DG
Fita cirúrgica Micropore	Fisher Scientific	19-027-761
Paraformaldeído	Sigma-aldrich	P6148
PE10 - Polietileno .011" x .024" por pé, 100 pés. contínuo	Braintree Scientific	PE10 100 FT
Bomba 11 Elite Infusão Apenas Seringa Dupla	Aparelho Harvard	70-4501
POMADA VET PURALUBE	Dechra
Puritan PurSwab Bastões de Limpeza com Ponta de Algodão	Fisher Scientific	22-029-553
Microscópio de Zoom Macro de Pesquisa	Placa de Suporte de Cabeça Simples Olympus	MVX10
(para ratos)	Narishige Agulhas de	MAG-1
, BD Medical	VWR	BD305106
Almofadas de preparação de álcool estéril	Fisher Scientific	22-363-750
LED ajustável	PRIOR Lumen 1600-LED
Xylazine			University of Rochester Vivarium

uso único da International USA Inc