Descrevemos dois métodos táteis testes sensoriais para períodos agudos ou crônicos de lesão medular em ratos. Estes procedimentos validados pode detectar o desenvolvimento e manutenção da alodinia-like sensações.
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Artigo de método
Aguda e crônica teste sensorial tátil após a lesão medular em ratos
Neste artigo
Resumo
Resumo
Lesão da medula espinal (SCI) prejudica os sistemas sensoriais causando alodinia 1-8. Para identificar as causas celulares e moleculares da alodinia, sensíveis e testes sensoriais válido em modelos de ratos SCI é necessário. No entanto, até recentemente, nenhuma abordagem de teste único foi validado para a SCI de modo que os métodos padronizados não foram implementadas em laboratórios. Além disso, métodos de teste disponíveis não poderiam ser implementadas de forma aguda ou grave do motor quando existiam deficiências, impedindo estudos sobre o desenvolvimento do SCI-induzida alodinia 3. Aqui nós apresentamos dois métodos de ensaio sensoriais através von Frey cabelo (VFH) monofilamentos que quantificam mudanças táteis limiares sensoriais após SCI 4-5. Um teste é o bem estabelecida teste Up-Down que demonstra alta sensibilidade e especificidade em diferentes gravidades do SCI, quando testado cronicamente 5. O outro teste é um teste recentemente desenvolvido VFH dorsal que pode ser aplicada de forma aguda após SCI quando umllodynia desenvolve, antes da recuperação motora 4-5. Cada monofilamento VFH aplica uma força calibrado quando tocado para a pele da pata traseira até se dobra. No método de cima para baixo, VFHs alternadas de forças superiores ou inferiores são usados no dermátomo L5 plantar para delinear limiares de retirada flexores. Sucessivamente mais elevadas forças são aplicadas até retirada ocorre em seguida, VFHs menor força é usado até retirada cessa. O limiar táctil reflecte a força necessária para eliciar retirada em 50% dos estímulos. Para o teste de novo, cada VFH é aplicado ao dermátomo dorsal L5 da pata do rato, enquanto é suportado pelo avaliador. A estimulação VFH ocorre em ordem crescente de vigor até pelo menos 2 dos 3 aplicações de uma determinada força produz a retirada da pata. Limiar sensorial táctil é a força mais baixa para eliciar% retirada 66 do tempo. Procedimentos de testes de aclimatação, e pontuação são descritos. Ensaios aberrantes que exigem um reteste ensaios e típicos são definidos. Uso de Animais waprovado pela Ohio State University Animal Care e do Comitê uso.
Protocolo
1. Cima / Baixo Plantar Von Frey Testes
A finalidade do ensaio consiste em determinar a sensibilidade táctil medindo a força muito é necessária para eliciar retirada da pata do estímulo. Comercialmente disponíveis calibrados Von Frey monofilamentos do cabelo entre as gamas de 4,56 e 6,10 são usados para estimular a pata. Outros estímulos sensoriais como a visualização do estímulo ou propriocepção pode confundir as medidas de limiar tátil para respostas baseadas em input visual ou proprioceptiva são inválidos. Para evitar que a visualização do monofilamento contacto com a pele, nós testamos apenas enquanto o rato é comer cereal. Este distr....
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Discussão
Os métodos de ensaio VFH aqui apresentados representam dois paradigmas de teste que são sensíveis e válido para uso em modelos de ratos SCI. É importante ressaltar que o teste VFH dorsal foi criado para avaliação da recuperação da sensação tátil das patas traseiras de forma aguda após médio-torácico SCI quando ratos são incapazes de estar em seus quartos traseiros. Este paradigma de teste pode também ser utilizado quando os ratos recuperar a capacidade de suportar o seu peso e para os membros posteriores após cervical S.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
NIH NS43798 (DMB), F31 NS058138 NIH (MRD); P30-NS045758 (CBSCR), e os Veteranos Paralisados da América # 2451 (DMB) e # 2707 (MRD).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Nome do reagente | Companhia | Número de catálogo | Comentários |
| Semmes-Weinstein | Stoelting Co | 58011 | |
| Box Criador de peixe | Aquário da loja Abastecimento | Furo na lateral para entrega de cereais | |
| Malha de arame elevada (1/4 "X 1/4" grade) | Loja de Ferragens | ||
| Elástico para prender caixa criador de peixe no lugar | Artesanato da loja | ||
| Cereal com açúcar | Mercearia | ||
| Toalha Huck Cirúrgica 16 "x 23" | Loja Medical Supply |
Referências
- Cruz-Almeida, Y., Felix, E. R., Martinez-Arizala, A., Widerstrom-Noga, E. G. Pain symptom profiles in persons with spinal cord injury. Pain Med. 10, 1246-1259 (2009).
- Hulsebosch, C. E. From discovery to clinical trials: treatment strategies for centr....
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Reimpressões e permissões
