Induzindo lesão do nervo fibular em um camundongo para estudar a regeneração da junção neuromuscular

Resumo

Fonte: Dalkin, W., et al. O método de lesão do nervo fibular: um ensaio confiável para identificar e testar fatores que reparam as junções neuromusculares. J. Vis. Exp. (2016)

Este vídeo demonstra um procedimento cirúrgico para induzir lesão do nervo fibular em um camundongo para estudar a regeneração da junção neuromuscular (JNM). O procedimento envolve expor o nervo fibular, aplicar pressão controlada para induzir lesão e garantir que o epineuro permaneça intacto para apoiar a regeneração axonal. Com o tempo, os macrófagos eliminam os detritos axonais, facilitando o reparo do nervo e o restabelecimento das JNMs.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Preparando animais para cirurgia

1. Anestesie camundongos com uma mistura de cetamina (90 mg / kg) e xilazina (10 mg / kg) por meio de injeção inguinal subcutânea com uma seringa estéril de insulina de 1 ml. A solução transportadora contém uma mistura de solução salina a 0,9%, 17,4 mg/ml de cetamina e 2,6 mg/ml de xilazina. Coloque os animais de volta em gaiolas enquanto aguarda o efeito da medicação.
   NOTA: Se a dose de ataque não fornecer anestesia suficiente durant....

Materiais

< classe de figura='tabela'>< estilo col = 'largura: 25%;'>< estilo col = 'largura: 25%;'>< estilo col = 'largura: 25%;'>Lista de materiais utilizados neste artigo Nome Empresa Número de catálogo Comentários CetaminaVetOne501072 XylazineLloyd Inc.3437 BuprenorfinaZoopharm1Z-73000-150910 NairNair Kim-toalhetesKimtech34155 Barbeador ElétricoBraintree ScientificCLP-64800 80% EtOH/H₂O 10% Proviodo 1 ml de seringa de insulina Tesoura de molaVannas91500-09 No. 15 bisturiBraintree ScientificSSS 15 # 5 FórcepsDumont11252-00 6-0 sutura de seda na agulha de corte reversoSutura ExpressAlmofada de aquecimento de roedores 752B Braintree ScientificAP-R-18.5 Alexa 555 sondas moleculares alfa-BTX conjugadasB35451 VectashieldVector LabsH-1000 Microscópio de zoom estéreo Olympus562037192 Zeiss 700 Microscópio confocalZeiss Bomba de perfusão peristáltica de fluxo variávelFisher Scientific13-876-3