Este estudo diz respeito ao desenvolvimento e padronização de um protocolo metodológico valioso para determinar toxicidade a longo prazo (14 dias) letal exercida por substâncias químicas, efluentes industriais ou esgotos e líquidos amostras ambientais sobre o crustáceo de água salgada, Artemia franciscana.
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Artigo de método
A longo prazo de Teste de toxicidade letal com o crustáceo Artemia franciscana
Neste artigo
Resumo
Resumo
Nossas atividades de pesquisa sobre a utilização de métodos biológicos para a avaliação da qualidade ambiental, com particular referência à água salgada / água salobra e sedimentos. A escolha dos indicadores biológicos devem ser baseadas em conhecimentos científicos confiáveis e, possivelmente, sobre a disponibilidade de procedimentos padronizados. Neste artigo, apresentamos um protocolo padronizado que utilizou o crustáceo marinho Artemia para avaliar a toxicidade de produtos químicos e / ou marinhos matrizes ambientais. Os cientistas propõem que o camarão (Artemia) é um candidato adequado para o desenvolvimento de um bioensaio padrão para utilização em todo o mundo. Uma série de artigos têm sido publicados sobre os efeitos tóxicos de vários produtos químicos e substâncias tóxicas sobre Artemia salina (Artemia). A principal vantagem do presente crustáceo para estudos de toxicidade é a disponibilidade geral dos cistos secos; estes podem ser imediatamente utilizado no teste e de difícil cultivo não é exigido 3. O método proposto envolve a mortalidade como um ponto final. O número de sobreviventes foram contadas ea percentagem de mortes foram calculados. As larvas foram considerados mortos se eles não apresentaram qualquer movimento interno ou externo durante vários segundos de observação 4. Este procedimento foi testes padronizados uma substância de referência (dodecil sulfato de sódio); alguns resultados são reportados neste trabalho. Este artigo acompanha um vídeo que descreve o desempenho de testes de toxicidade processual, mostrando todos os passos relacionados com o protocolo.
Protocolo
1. Método Padrão
O nosso teste envolve a exposição larvas de Artemia a um intervalo de concentrações da substância ou uma amostra de ensaio para a finalidade de determinar os níveis de concentração ou diluição que poderiam causar a morte de 50% dos organismos (CL 50) expostos ao longo de 14 dias e que satisfaça as condições definidas por este método. Se necessário e possível, a seguinte pode também ser determinada: a) o nível de concentração que causa a morte de 20% dos organismos expostos (LC 20), b) o nível de concentração mais elevada analisados que não determina uma maior taxa de mortalidade do que a do ....
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Discussão
Artemia é um dos organismos de teste mais valiosos disponíveis para testes de ecotoxicidade e de investigação feito até agora permite-nos afirmar que é possível manter várias opções relacionadas com Artemia uso em Toxicologia e Ecotoxicologia. As características que tornam este organismo em uma espécie com potencial para bioensaios são: uma ampla distribuição geográfica, alta adaptabilidade às condições ambientais adversas e nutrientes variados, cultura laboratorial relativamente simples e de manutençã.......
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Divulgações
Não há conflitos de interesse declarados.
Agradecimentos
Produzido por Loredana Manfra do Instituto para a proteção ambiental e à pesquisa (ISPRA-Departamento de Monitoramento da Qualidade Ambiental) e Savorelli Federica da Agência Regional de Proteção Ambiental (Emilia-Romagna, Itália).
Os membros de referência para o subgrupo de trabalho sobre o crustáceo Artemia dentro do Grupo métodos biológicos - água salgada / água salobra e Sedimentos da Comissão UNICHIM da Qualidade da Água (Instituto para a operação de normalização técnica no sector químico).
Videografia e edição por Marco Pisapia de ISPRA (Unidade de Web).
Coordenação ....
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Materiais
Produzido por Loredana Manfra do Instituto para a proteção ambiental e à pesquisa (ISPRA-Departamento de Monitoramento da Qualidade Ambiental) e Savorelli Federica da Agência Regional de Proteção Ambiental (Emilia-Romagna, Itália).
Os membros de referência para o subgrupo de trabalho sobre o crustáceo Artemia dentro do Grupo métodos biológicos - água salgada / água salobra e Sedimentos da Comissão UNICHIM da Qualidade da Água (Instituto para a operação de normalização técnica no sector químico).
Videografia e edição por Marco Pisapia de ISPRA (Scientific Advisory e Serviços de Documentação).
Coordenação de Produção por Anna Maria Cícero e Magaletti Erika de ISPRA (Departamento de Monitoramento da Qualidade Ambiental).
Gostaríamos de agradecer à Agência Regional de Proteção Ambiental da Emilia-Romagna, Ferrara Branch e BiologGrupo de Métodos ical - água salgada / água salobra e Sedimentos da Comissão UNICHIM da Qualidade da Água da sua cooperação; Rossella Boscolo e Massimo Gabellini de ISPRA (Departamento de Prevenção e Mitigação de Impactos) pelo apoio financeiro, e da London School of Languages, em Roma por seu apoio linguístico.
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Nome do reagente | Companhia | Número do produto | |
| Dodecil sulfato de sódio | Sigma-Aldrich | L4390 |
Apêndice
Os meios de comunicação de algas tem de ser preparada utilizando reagentes de qualidade analítica.
Um litro de solução nutritiva é preparada por dissolução de 300 g de NaNO 3, 30 g de KH g PO 4 e 20 2 de NH4CI em água destilada.
Quatro soluções iniciais (A, B, C, D) De minerais são preparados como se segue:
- Um litro de solução "A" contendo 30 g de ZnSO 4 H2O, 25 g de CuSO4 5 H2O, 30 g de COSO 4 7 H2O e 20 g de MnSO4 H2O em água destilada;
- Um litro de solução "B" contendo 50 g de FeCl 3 • 6 H2O em água destilada;
- Um litro de solução "C", contendo 25 g de Na 2 MoO 4 • 2 H 2 O em água destilada;
- Um litro de solução "D", contendo 50 g di Na 2 EDTA • 2 H 2 O em água destilada.
Um litro de uma solução final de minerais (solução "E") é obtida adicionando alíquotas das soluções acima mencionadas para a água destilada. A seguinte ordem de adição é recomendado: 100 ml de solução "D", 10 ml de solução "C", 10 ml de solução "B" e 10 ml de solução "A".
Três iniciativasl soluções (F, G, H) de vitaminas são preparados como se segue:
- Um litro de solução "F" contendo 100 mg de biotina em água destilada;
- Um litro de solução de "G" contendo 10 g de tiamina em água destilada;
- Um litro de solução "H" contendo 100 mg de cobalamina em água destilada.
Um litro de uma solução final de vitaminas (solução "I") é obtida adicionando-se 10 ml das três soluções iniciais para a água destilada.
Um litro de meio de algas é preparado por dissolução de 1 ml da solução de nutrientes, 1 ml da solução de mineral final (solução "E") e 1 ml da solução de vitamina final (solução "I") na água do mar. Este último pode ser obtida por dissolução reconhecidos reagentes de qualidade analítica ou uma formulação comercialmente disponível em água destilada ou desionizada. Misturas de sal para a criação do ideal de água salgada estão comercialmente disponíveis, por exemplo, as misturas Instant Ocean. É recomended a utilização de uma água do mar com salinidade de 30 (± 2) PSU e temperatura de 20 (± 1) ° C.
Referências
- Togulga, M. The Short-Term Toxicity of Two Toxicants to Artemia Nauplii. Tr. J. of Zoology. 22, 259-266 (1998).
- Persoone, G., Wells, P. G. Artemia in aquatic toxicology: a review. Artemia Research and its Applications. Morphology, Genetics, Strain characterizat....
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Reimpressões e permissões
