$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Teor de colesterol de células deve ser mantida dentro dos limites muito apertados, muito ou pouco colesterol em alguns resultados de células em ruptura das membranas celulares, a apoptose e necrose 1. As células podem colesterol fonte da síntese intracelular e de lipoproteínas plasmáticas, ambas as fontes são suficientes para satisfazer plenamente as necessidades de células para o colesterol. Os processos de síntese de colesterol e absorção são fortemente regulados e deficiências de colesterol são 2 raro. Excesso de colesterol é de 3 problema mais comum. Com a excepção dos hepatócitos e para algumas células grau adrenocorticais, as células são incapazes de degradar o colesterol. As células têm duas opções para reduzir seu teor de colesterol: para converter colesterol em ésteres de colesterol, uma opção com capacidade limitada como sobrecarga células com ésteres de colesterol também é tóxico, e efluxo do colesterol, uma opção com capacidade potencialmente ilimitado. Efluxo do colesterol é uma especificaçãoprocesso ific que é regulada por uma série de transportadores intracelulares, tais como ligação de ATP cassete transportador proteínas A1 (ABCA1) e G1 (ABCG1) e B1 eliminador de tipo de receptor. O aceitador de natural de colesterol no plasma é de lipoproteína de alta densidade (HDL) e da apolipoproteína AI.
O ensaio de efluxo de colesterol é concebido para quantificar a taxa de efluxo de colesterol a partir de células cultivadas. Mede a capacidade das células para manter o efluxo de colesterol e / ou a capacidade de plasma aceitadores para aceitar o colesterol libertado a partir de células. O ensaio consiste nos passos seguintes. Passo 1: etiquetagem colesterol celular por adição de colesterol rotulados para meio contendo soro e incubando com células de 24-48 h. Este passo pode ser combinado com o carregamento de células com colesterol. Passo 2: a incubação das células em meio isento de soro para equilibrar o colesterol marcado entre todos os pools de colesterol intracelular. Esta fase pode ser combinado com a activação do celular CHtransportadores olesterol. Passo 3: a incubação de células com aceitador extracelular e quantificação de movimento do colesterol a partir de células marcadas para o aceitador. Se precursores de colesterol foram utilizados para etiquetar o colesterol recém-sintetizado, um quarto passo, a purificação do colesterol, pode ser necessária.
O ensaio proporciona a seguinte informação: (i) como um tratamento particular (uma mutação, um knock-baixo, a superexpressão um ou um tratamento) afecta a capacidade da célula para o colesterol de efluxo e (ii) como a capacidade de aceitadores de plasma para aceitar o colesterol é afectada por uma doença ou um tratamento. Este método é geralmente usado no contexto de pesquisas cardiovasculares, doenças metabólicas e neurodegenerativas, infecciosas e doenças reprodutivas.