Um protocolo para as infusões crónicas de glicose e Intralipid no rato é descrito. Este modelo pode ser utilizado para estudar o impacto do excesso de nutrientes sobre a função do órgão de parâmetros fisiológicos.
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Artigo de método
Um Modelo de Infusão Crónica de nutrientes no Rato
Neste artigo
Resumo
Resumo
A exposição crónica a níveis excessivos de nutrientes é postulada para afectar a função de vários órgãos e tecidos, e para contribuir para o desenvolvimento de muitas complicações associadas à obesidade e à síndrome metabólica, incluindo diabetes tipo 2. Para estudar os mecanismos pelos quais os níveis excessivos de glucose e ácidos gordos afectam o das células beta do pâncreas e da secreção de insulina, criámos um modelo de infusão de nutrientes crónica no rato. O procedimento consiste em cateterização da veia jugular direita e da artéria carótida esquerda, sob anestesia geral, permitindo um período de recuperação de 7 dias, permitindo a conexão dos cateteres para as bombas através de um suporte giratório e do sistema de contrapeso que permite que o animal se mover livremente na gaiola, e infundindo glicose e / ou Intralipid (uma emulsão de óleo de soja, que gera uma mistura de aproximadamente 80% unsaturated/20% de ácidos gordos saturados quando infundida com heparina) durante 72 horas. Este modelo oferece vários advantages, incluindo a possibilidade de modular finamente os níveis alvo de glicose e os ácidos gordos de circulação, a opção de co-infundir compostos farmacológicos, e o período de tempo relativamente curto em oposição aos modelos dietéticos. Ele pode ser usado para examinar os mecanismos de disfunção de nutrientes induzida por uma variedade de órgãos e para testar a eficácia de drogas neste contexto.
Introdução
Os níveis cronicamente elevados de glucose e lípidos na circulação têm sido propostos para contribuir para a patogénese da diabetes tipo 2 alterando a função de vários órgãos implicados na manutenção da homeostase da glucose, incluindo, mas não limitado a, o das células beta do pâncreas (revisto em 1). Os glicotoxicidade hipótese postula que a hiperglicemia crônica agrava o defeito das células beta que deu origem à hiperglicemia, em primeiro lugar, criando assim um ciclo vicioso e contribuindo para a deterioração do controle da glicose em pacientes diabéticos tipo 2. Da mesma forma, a hipótese propõe que as elevações glucolipotoxicity concomitantes dos nív....
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Protocolo
Resumo: O procedimento consiste em cateterização da veia jugular direita e da artéria carótida esquerda, sob anestesia geral, permitindo um período de recuperação de 7 dias, permitindo a conexão dos cateteres para as bombas através de um suporte giratório e do sistema de contrapeso que permite que o animal se mover livremente na gaiola; e infusão de glicose e / ou Intralipid (uma emulsão de óleo de soja, que gera uma mistura de aproximadamente 80% unsaturated/20% de ácidos gordos saturados quando infundida com heparina 9) durante 72 horas.
1. Canulação da veia jugular direita e da artéria carótida esquerda
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Resultados
De uma série de 42 ratos, que foram submetidos à cirurgia, cinco ratos foram perdidos durante o período pós-operatório e um rato foi perdida durante a infusão, o que representa uma taxa de sucesso global de 86%. O peso corporal médio dos 37 ratos que eventualmente foram infundidos foi 608 ± 5 g, antes da cirurgia e 588 ± 6 g no início da perfusão (média ± EP, n = 37, P <0,0001 por teste t emparelhado). Os seguintes resultados representativos foram obtidos em dois grupos: de infusão. Saline (SAL) e glicose + intralipi.......
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Discussão
Embora um certo número de estudos anteriores têm utilizado infusões crónicas de glicose (por exemplo, 10-15) ou lípidos (por exemplo, 16,17) em roedores, para o nosso conhecimento da infusão conjunta de ambos os combustíveis apenas foi avaliado em ratos 18. O modelo de infusão crónica aqui apresentado oferece diversas vantagens para o estudo dos efeitos sobre o excesso de nutrientes de uma variedade de funções biológicas em ratos. Primeiro, ele não envolve roedores gene.......
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Divulgações
Vincent Poitout é co-fundador e recebeu contratos de investigação a partir de Bêtagenex Inc., uma organização de pesquisa de contrato, que oferece o modelo de infusão apresentada neste artigo como um serviço comercial.
Agradecimentos
Este trabalho foi financiado pelo National Institutes of Health (R01DK58096 de Vincent Poitout). Vincent Poitout detém o Canada Research Chair em Diabetes e pâncreas a função das células beta. Bader Zarrouki receberam bolsas de pós-doutorado da Merck e Eli Lilly. Ghislaine Fontes foi apoiado por uma bolsa de pós-doutorado da Associação de Diabetes canadense.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Solução salina 0,9% | BD | JB1324 | |
| Dextrose 70% | McKesson | ||
| Intralipídio 20% | Fresenius Kabi | JB6023 | |
| Metricide (Glutaraldeído 2,6%) | Metrex | 11-1401 | |
| Heparina Sódica 10.000 USP u / ml | PPC | ||
| Carprofeno | Metacam | ||
| Glicopirrolato | Sandoz | ||
| Isoflurano | Abbott | ||
| Clohexidina 2% | |||
| Álcool 70% | |||
| Iodo | |||
| PE-50 | BD | 427411 | |
| CO-EX T22 | Instech Solomon | BCOEX-T22 | |
| Conector 22G | Instech Solomon | SC22/15 | |
| Giratório 22G | Instech Solomon | 375/22PS | |
| Conector Y 22G | Instech Solomon | ||
| Contrapeso e braço | Instech Solomon | CM375BP | |
| 23 G agulhas cegas | Instech Solomon | LS23 | |
| 23 G pinos de canulação | Instech Solomon | SP23/12 | |
| Amarras (12 polegadas) | Lomir | RT12D | |
| Revestimentos de infusão | Lomir | RJ01, RJ02, RJ03, RJ04 | |
| SM-XL) | |||
| Peça de fixação de amarração | Lomir | RS T1 | |
| seringa de 60 ml | BD | 309653 | |
| seringa de 1 ml | BD | 309602 |
Referências
- Poitout, V., Robertson, R. P. Glucolipotoxicity: fuel excess and beta-cell dysfunction. Endocr. Rev. 29, 351-366 (2008).
- Poitout, V., et al. Glucolipotoxicity of the pancreatic beta cell. Biochim. Biophys. Acta. 1801, 289-298 (2010).
- Unger, R. H.
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Reimpressões e permissões
