$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Objetos fracamente dispersão, tais como pequenas partículas coloidais ea maioria das células biológicas, são encontrados com freqüência em microscopia. Na verdade, uma série de técnicas têm sido desenvolvidas para melhor visualizar esses objetos de fase; contraste de fase e DIC estão entre os métodos mais populares para melhorar o contraste. No entanto, a posição de gravação e forma na direção out-of-imaging-plano continua sendo um desafio. Este relatório apresenta um método experimental simples para determinar com precisão a localização e geometria dos objetos em três dimensões, utilizando linha digitais microscopia holográfica (Dihm). De um modo geral, o volume da amostra é definido acessíveis por o tamanho do sensor de câmara na direcção lateral, e a coerência de iluminação na direcção axial. Volumes de amostras típicas variam de 200 um x 200 um x 200 fim usando iluminação por LED, para5 mm x 5 mm x 5 mm ou maior usando iluminação por laser. Esta luz de iluminação está configurado de tal modo que as ondas planas são incidente sobre a amostra. Objetos no volume da amostra, em seguida, dispersam a luz, o que interfere com a luz unscattered para formar padrões de interferência perpendicular à direção de iluminação. Esta imagem (holograma) contém a informação de profundidade necessária para a reconstrução tridimensional, e pode ser capturada num dispositivo de imagem padrão tais como CMOS ou CCD. O Rayleigh-Sommerfeld método propagação de volta é empregada para reorientar numericamente imagens de microscópio, e uma heurística de imagens simples, baseada na fase Gouy anomalia é utilizado para identificar espalhando objetos dentro do volume reconstruído. Este método simples, mas robusto resulta em uma medida inequívoca, sem modelo de localização e forma dos objetos em amostras microscópicas.