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Artigo de método

Inchworming: A Novel Motor Estereotipia no BTBR

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DOI:

10.3791/50791

5 de julho de 2014

Neste artigo

Resumo

Inchworming é um movimento de escavação síncrona altamente repetitivo exibido pelo BTBR T + ITPR 3TF / J (BTBR) camundongos quando colocado em uma gaiola de testes com roupa de cama de serragem suficiente. O procedimento é uma modificação do protocolo de interacção social, juvenil e é utilizado aqui para avaliar estereotipias motoras repetitivas relevantes para Transtorno do espectro do autismo.

Resumo

Transtorno do Espectro do Autismo (ASD) é um distúrbio do desenvolvimento neurológico comportamentalmente definida, caracterizada pela diminuição da interação recíproca social, comunicação anormal, e comportamentos repetitivos com interesse restrito. Como o diagnóstico é baseado em critérios clínicos, os modelos de roedores potencialmente relevantes desta doença heterogênea idealmente deve recapitular esses traços comportamentais diversos. O tf BTBR T + Itpr3 / J (BTBR) do rato é um modelo animal estabelecido de ASD, exibindo comportamentos repetitivos, como o aumento da preparação, bem como a inflexibilidade cognitiva. Com relação à interação social e interesse, o teste de jogo juvenil tem sido utilizada em vários modelos de roedores da ASD. Aqui, mostramos que quando os ratos BTBR são testados em um gabinete juvenil interação social contendo cama de serragem, eles exibem um movimento de escavação síncrona repetitivo. Este comportamento motor repetitivo, referido como "inchworming", foi chamadopor causa da natureza dos movimentos estereotipados exibidos pelos ratinhos enquanto movendo-se horizontalmente ao longo do chão. Camundongos Inchworming devem usar seus frente-e membros pélvicos em sincronia para deslocar a roupa de cama, realizando um mínimo de um interior e um movimento para fora. Embora ambos BTBR e C56BL/6J (B6) camundongos apresentam esse comportamento, ratos BTBR demonstrar uma duração significativamente maior e frequência de inchworming e uma diminuição da latência para iniciar inchworming quando colocado em um gabinete de camas. Nós concluímos que este comportamento recentemente descrito fornece uma medida de um motor de estereotipia repetitivo que pode ser facilmente medido em modelos animais de ASD.

Introdução

Embora a fisiopatologia dos transtornos do espectro do autismo (ASD) ainda não está claro, o diagnóstico depende da presença de três grandes categorias de sintomas: reciprocidade social anormal, deficiência na comunicação e repetitivos / comportamentos estereotipados 1. A maioria dos modelos de roedores são incapazes de reproduzir simultaneamente todos os três sintomas em um único animal. Assim, modelos que podem simular de forma confiável alguns ou todos os aspectos da doença possuem um grande valor para o desenvolvimento de estratégias preventivas e terapêuticas eficazes. Um modelo que faz exibir todos os três aspectos da ASD é o mouse 1,2 BTB....

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Protocolo

Todos os procedimentos foram realizados de acordo com o Comité de Cuidados Animais do Canadá e aprovado pela Universidade do Animal Care Committee da Calgary.

1. Preparação Animais

  1. Isolar os ratos durante a noite (12 horas) antes do teste. Para fazer isso, coloque toda a BTBR e camundongos B6 (P35-P40) necessários para a análise experimental em gaiolas por si só, um dia antes do teste.
  2. Coloque a ratinhos isolado na análise comportamental ambiente 30 min antes do teste de modo a que os animais se habituar ao novo ambiente.

2. Equipamento Preparação

  1. Coloque ....

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Resultados

A versão modificada do teste de jogo juvenil descrito aqui pode ser usado para observar e analisar o comportamento de escavação repetitivo romance denominado inchworming. Inchworming está exposto a uma extensão muito maior por ratos BTBR que os controles B6. Num típico 10 min sessão, os ratinhos BTBR irá exibir o comportamento distinto inchworming (síncrono para dentro e para fora, o movimento das patas em um esforço para substituir o leito de serradura), por cerca de 5 minutos, ou de metade do período de observação. Al.......

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Discussão

Inchworming é uma nova medida de comportamento repetitivo, que pode ser usado para estudar muitas doenças que exibem estereotipias como CIA. Há 4 etapas que são de importância fundamental para a geração de dados confiáveis ​​inchworming do protocolo de interação social, juvenil modificação: 1) o período de isolamento prolongado é essencial para o teste inchworming e não deve ser removido do protocolo ou encurtado. Este requisito é específico para o teste de inchworming em pares descritos aqui. 2) A câmara de vídeo tem d.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a revelar.

Agradecimentos

Os autores agradecem o apoio e conhecimento técnico e logístico prestado por Rose Tobias, Younghee Ahn, e David N. Ruskin. O trabalho aqui descrito foi financiado pela Fundação Hospitalar do Alberta Children e Instituto de Pesquisa Hospital do Alberta Children.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Caixa de acrílico de 30 cm X 30 cm com tampaPode ser construída
Câmera IR Survshop (Calgary, Alberta)Sony CCD Camera DP955V- 30’ Infrared Armor DomeEncontre uma câmera com alta resolução e recursos de zoom
DVRSupercircuits (Austin, Texas)BLACK Enterprise-Class 4-Channel H.264 security DVR com gravador de DVDAlta capacidade de dados
SerragemIgual ao material de cama

Referências

  1. McFarlane, H. G., Kusek, G. K., Yan, M., Phoenix, J. L., Bolivar, V. J., Crawley, J. N. Autism-like behavioral phenotypes in BTBR T+tf/J mice. Genes, Brain, and Behavior. 7, 152-163 (2008).
  2. Crawley, J. N. Designing mouse....

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

Comportamento de InchwormingModelo de Camundongo BTBRInteração Social JuvenilAnálise de Estereotipia MotoraProtocolo de Gravação de VídeoTeste de Cama de SerragemConfiguração de Câmera InfravermelhaDuração Frequência LatênciaTranstorno do Espectro AutistaComportamento Motor Repetitivo