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Artigo de método

Um modelo murino de hemorragia subaracnóide

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DOI:

10.3791/50845

21 de novembro de 2013

Neste artigo

Resumo

Um modelo de rato padronizado de hemorragia subaracnóide por Círculo intraluminal de Willis perfuração é descrito. Perfuração de vasos e hemorragia subaracnóide são monitorados pela monitorização da pressão intracraniana. Além disso os vários parâmetros vitais são registadas e controlada para manter as condições fisiológicas.

Resumo

Nesta publicação de vídeo de um modelo padronizado rato de hemorragia subaracnóide (HSA) é apresentado. Sangramento é induzida pelo Círculo endovascular de Willis perfuração (CWP) e comprovada por pressão intracraniana (PIC) de monitoramento. Assim, uma distribuição homogênea de sangue em espaços subaracnóide em torno da circulação arterial e fissuras do cerebelo é alcançado. Fisiologia animal é mantido por entubação, ventilação mecânica, monitorização contínua e on-line de vários parâmetros fisiológicos e cardiovasculares: temperatura corporal, pressão arterial sistêmica, freqüência cardíaca e saturação de hemoglobina. Deste modo, a pressão de perfusão cerebral pode ser firmemente monitorado resultando em um volume variável de menos de sangue extravasado. Isto permite uma melhor padronização de perfuração filamento endovascular em ratos e faz todo o modelo altamente reprodutível. Assim, é facilmente disponível para os estudos farmacológicos e fisiopatológicos no tipo selvagem e genéticaly alterada ratinhos.

Introdução

HAS é o subtipo tempos com o resultado menos benéfica para os pacientes: 40% dos pacientes morrem dentro de um mês após o sangramento 1 e sobreviventes raramente têm um resultado clinicamente favorável.

A grande maioria da SAHOS espontâneas (80%) são causados ​​pela ruptura de aneurismas intracranianos, que são na sua maioria localizadas ao longo da anterior e posterior da artéria, a artéria basilar, artéria cerebral média (MCA) 2 comunicando.

Tais aneurismas são difíceis de modelar em animais e, portanto, os modelos animais de SAH são realizadas quer por injecção do sangue para dentro do....

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Protocolo

Todos os procedimentos cirúrgicos foram submetidos à revisão ética e aprovado pelo governo da Alta Baviera (número de referência: 55.2-1-54-2532.3-13-13 e -2532-136-11). Os animais são macho C57BL / 6 com um peso corporal de aproximadamente 25 g.

1. Preparação animal

  1. Induzir a anestesia, colocando o mouse em uma câmara. Lave a câmara com 5% de isoflurano até que o animal perde a consciência.
  2. Injectar anestésicos pré-misturados por via intraperitoneal: o fentanil (0,05 mg / kg), o midazolam (5 mg / kg) e medetomidina (0,5 mg / kg). Verifique reflexos antes e regularmente durante o procedimento. Reinject um terço do vol....

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Resultados

Mortalidade

Uma vez que a técnica de cirurgia é dominado o procedimento não provocou quaisquer mortalidade intra-operatória. Além disso o sangramento pode ser conseguida em quase todos os animais. Mortalidade pós-operatória é de 30-40%, com a maior parte dos animais morrer no dia 1 após a cirurgia (Figura 5).

ICP valores após SAH

O ICP antes de sangramento é de cerca de 4 mmHg. Sangramento resulta em um aumento acentuado do.......

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Discussão

As opções de tratamento após SAH são escassos e pouco ineficaz. Portanto, a fisiopatologia da lesão cerebral pós-hemorrágica precisa ser mais bem compreendidos, a fim de identificar novos alvos terapêuticos e desenvolver novas abordagens terapêuticas. Padronizado e modelos animais bem reprodutíveis em animais geneticamente modificados, ou seja, ratos, são cruciais para tais investigações. O modelo CWP tornou-se um modelo amplamente utilizado para a HAS, uma vez que se assemelha a fisiopatologia em seres humanos.......

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Divulgações

Autores têm nada a revelar.

Agradecimentos

A atual pesquisa é financiada pela Fundação Solorz-Zak Research.

....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Equipment
operation microscópioLeicaKL2500
vaporizador de isofluranoHarvard Instrumentsvaporizador
Hugo SachsMinivent 845
microcapnógrafoHugo SachsTipo 340
controlador de temperaturaFHCDC Controlador
broca odontológicaPaggenLabset- N
Monitor ICPMonitor CodmanICP monitor
de pressão arterialAD InstrumentsBridge Amp FE221
bomba de seringaWorld Precision InstrumentsSP101IZ
pulsoxímetroKent ScientificMouseSTAT
LDFPerimed Periflux 5000
AD InstrumentsPower Lab 16/35
Material
cimento para fixação de sonda ICPcimentoSpeiko
para fixação de sonda LDFBob Smith Industries(Maxi Cure e Insta Set)
cateter venosoJohnson JohnsonJelco cateter intravenoso alado; REF 4076tubo de intubação modificado
para cateter femoralSmiths MedicalFine Bore Polythene Tubing; ID 0,28 mm OD 0,61 mm; REF 800/100/100filamento de 30 cm de comprimento
para perfuração de vasoEthiconProlene 5-0corte de 12 mm
de comprimento equipamento cirúrgicoFine Scientific Instrumentsfórceps médico #5, tesoura de vaso 8 cm, microclip mandíbula
respirador de de fluxo contínuode Temperatura Monitor de dados analógico Cola de carboxilato Cola de cianoacrilato de 4 mm

Referências

  1. Cahill, J., Zhang, J. H. Subarachnoid hemorrhage: is it time for a new direction. Stroke. 40, 86-87 (2009).
  2. van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. Subarachnoid haemorrhage. Lancet. 369, 306-318 (2007).
  3. Lin, C. L., et al.

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

Modelo MurinoPerfuração EndovascularMonitoramento da Pressão IntracranianaPressão de Perfusão CerebralIntubação e Ventilação MecânicaMonitoramento FisiológicoFluxometria Laser DopplerMonitoramento da Pressão ArterialIsolamento Cerebral