-Dye Vital reforçada imagens de fluorescência (VFI) é um romance em técnica vivo, que combina alta resolução epitelial de imagem com contraste fluorescente tópica exógena para destacar morfologia glandular e delinear neoplasia (displasia de alto grau e câncer) no esôfago distal.
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Artigo de método
Diagnóstico de neoplasia de esôfago de Barrett usando-dye Vital Aprimorado imagens de fluorescência
Neste artigo
Resumo
Resumo
A capacidade de diferenciar metaplasia benigna no esôfago de Barrett (BE) de neoplasia in vivo permanece difícil como os dois tipos de tecido pode ser plana e indistinguível com luz branca só imagem. Como resultado, uma modalidade que destaca arquitectura glandular seria útil para discriminar neoplasia benigna do epitélio na parte distal. VFI é uma nova técnica que utiliza um agente de contraste fluorescente tópica exógena para delinear displasia de alto grau e câncer do epitélio benigno. Especificamente, as imagens fluorescentes fornecer resolução espacial de 50 a 100 ^ m e um campo de visão de 2,5 cm, o que permite visualizar endoscopists morfologia glandular. Após a excitação, metaplasia clássico de Barrett surge como contínuos, glândulas uniformemente espaçados e uma morfologia homogênea geral; em contraste, tecido neoplásico aparece cheia de obliteração completa da estrutura glandular. Aqui nós fornecemos uma visão geral doa instrumentação e enumerar o protocolo desta nova técnica. Enquanto VFI oferece um gastroenterologista com a arquitetura glandular de tecido suspeito, displasia celular não pode ser resolvida com esta modalidade. Como tal, não se pode distinguir morfologicamente metaplasia de Barrett do BE com baixo grau Displasia através desta modalidade de imagem. Por trocando uma diminuição na resolução com um maior campo de visão, este sistema de imagem pode ser usado pelo menos como um dispositivo de imagem de bandeira vermelha para alvejar e biópsia de lesões suspeitas; Ainda, se as medidas de precisão são promissores, VFI pode tornar-se a técnica de imagem padrão para o diagnóstico de neoplasia (definidas como displasia de alto grau ou cancro) na parte distal.
Introdução
Ao longo dos últimos quarenta anos, a incidência de adenocarcinoma esofágico (EAC) aumentou significativamente 1,2; ainda devido ao diagnóstico tardio, a taxa de sobrevivência de cinco anos é inferior a 20% 3. O padrão atual de vigilância endoscópica em BE, o precursor da EAC, é endoscopia luz branca com biópsias do segmento aleatórios 'fórceps quatro quandrant. Infelizmente, esta técnica muitas vezes perde neoplasia, que pode ser plana, sutil e difícil de se diferenciar em padrão de luz branca de imagem 4. Embora tenha havido sucesso no uso de microscopia confocal a laser para destacar características celulares in vivo, lesões ainda pode ser perdida devido à diminuição do campo de visão 5. Ter uma tecnologia de "ponte" que pode destacar as áreas para posterior imagem microendoscópica confocal seria marcadamente valioso.
Por conseguinte, uma modalidade de imagem de bandeira vermelha avançado que melhora a capacidade de TARGEt e biópsia neoplasia no início BE seria um instrumento para detectar a EAC, numa fase curável cedo e poderia levar a um tratamento mais eficaz e, posteriormente, melhorou as taxas de sobrevivência. VFI é uma nova técnica que combina imagens de alta resolução epitelial com exógena tópica fluorescente contraste, proflavina, para destacar a morfologia glandular e delinear neoplasia (displasia de alto grau e câncer) no esôfago distal na esperança de melhorar o diagnóstico in vivo 6. Após a excitação do proflavina, que se concentra no núcleo das células, logo após a aplicação, as imagens fluorescentes fornecer resolução espacial de 50 a 100 ^ m e um campo de visão de 2,5 cm, o que permite visualizar endoscopists morfologia glandular. Como resultado, esta abordagem permite gastroenterologistas distinguir metaplasia clássico de Barrett, que tem contínuas, glândulas uniformemente espaçados e uma morfologia homogénea em geral, a partir de BE com neoplasia, o qual tem obliteração da arquitetura glandular. Aqui nós descrevemos o protocolo desta nova técnica com um endoscópio multiespectral, e fornecer resultados representativos para demonstrar a utilidade deste dispositivo em descrever a transformação morfológica de metaplasia benigna para displasia de alto grau e câncer.
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Protocolo
NOTA: O consentimento informado foi obtido dos pacientes. Além disso, esta pesquisa foi realizada em conformidade com todas as diretrizes institucionais, nacionais e internacionais para o bem-estar humano.
1. Prepare Computador
- Vire laptop e conecte USB da Placa de Captura DVI2USB.
2. Prepare o Monitor
- Conecte o cabo DVI para monitorar e PinP para permitir que o endoscopista para ver vídeos a partir dessas telas ao invés do computador.
- Certifique-se que o monitor está em pé e está previsto para DVI.
- Conecte PinP a parte de trás do sistema Olympus, em seguida, pressione o botão de entrada no sistema Olympus para ver a imagem no monitor grande montada na parede.
3. Laser Diode Motorista Setting
- Verifique se o driver de diodo laser é desligado. Ele só deve ser ligado a alguns minutos antes de imagem é realizado.
- Ligue portátil, processador, controlador de diodo laser, DVI splitter, e placa de captura de Epiphan no filtro de linha.
5. Execute MDE Widefield no Desktop Laptop
- Hit 'Current Folder'.
- Digite o número e as iniciais do paciente e pressione 'Criar pasta Paciente'.
6. Prepare Cap e Filtro
- Ao manusear filtro, sempre utilizar luvas e Kimwipes para minimizar a transferência de óleo e detritos para o filtro. Gaze ou álcool cotonetes pode deixar fibras que podem interferir com a imagem.
- Coloque algumas Kimwipes sobre uma mesa para criar uma plataforma para estabelecer o filtro e tampa. Esta área desinfectada deve ser facilmente acessível para o gastroenterologista durante o procedimento.
- Deite-se o filtro e tampa e manter Kimwipes por perto para uso durante o procedimento.
7. Preparação Paciente
- Consentimento paciente em usode VFI e corante proflavina antes de chegar à suíte endo.
- Posição do paciente para o procedimento de endoscopia digestiva alta.
- Prossiga com a imagem de luz branca padrão, utilizando um microscópio digital multiespectral (MDM) 7.
8. Insira e Spray proflavina
- Depois de terminar com a imagem de luz branca, inserir e spray corante proflavina sobre o tecido de interesse. 1-5 mm deve ser suficiente, dependendo da área de tecido Barrett. Ao pulverizar o corante proflavina neste passo, tempo suficiente (pelo menos 1 minuto) é determinada por absorção de tecido suficiente antes VFI. Proflavina, que é coberto por uma aplicação nova droga investigacional da FDA (IND 102217), é um agente de contraste fluorescente que se concentra no núcleo das células, logo após a aplicação. Embora VFI não pode resolver morfologia celular individual, quando as panelas de diodo laser sobre o tecido, a luz refletida permite que o endoscopista a apreciar morpholo glandular geralgy.
9. Ligue Laser Diode
- Ligue o diodo laser. Faça isso pelo menos 2 min antes do início da imagem.
10. Prepare endoscópio para VFI
- Retire o endoscópio completamente.
- Antes de lidar com o endoscópio, garantir que o assistente tem dois pares de luvas.
- Já o endoscopista segurar o endoscópio na frente do assistente que fica ao lado da plataforma Kimwipe detalhado acima.
- Com Kimwipes, ter o assistente limpa a ponta do endoscópio. Certifique-se de limpar a superfície frontal levemente e também limpar alguns centímetros ao longo do lado do endoscópio para facilitar o manuseio.
- Após a limpeza, tem o descarte assistente do par exterior de luvas.
- Já o assistente de colocar no filtro. Insira a protuberância cilíndrica curta no filtro em seu buraco complementar no endoscópio. Manter o endoscópio vertical para auxiliar o processo.
- Segurando o filter no lugar, deslize a tampa sobre o filtro e empurrá-lo para baixo sobre a ponta do endoscópio. Certifique-se que a tampa é seguro e empurrou completamente com as bordas lave com o endoscópio. Certifique-se o lábio da tampa prolonga-se ligeiramente sobre a ponta do endoscópio. Por fim, verifique se o filtro ainda está em vigor e lave com a ponta do endoscópio.
11. Insira o endoscópio volta para o esôfago e Imagem
12. Remover endoscópio de Esôfago
- Usando Kimwipes puxe cuidadosamente a tampa e filtrar fora do endoscópio. Jogue fora a tampa e limpe o filtro para o próximo caso.
13. Filtro limpo
- Delicadamente, limpe o filtro com Kimwipes.
- Encha um copo pequeno com CyDex e mergulhe o filtro para 12 min. A cada poucos minutos virar o filtro sobre.
- Delicadamente, limpe o filtro com Kimwipes.
- Submergir filtro, desta vez em água estéril. Depois de 5 minutos, use um esguicho bottle e pulverizar água estéril sobre o filtro.
- Coloque filtro em algumas Kimwipes e deixe secar.
- Depois de seco, coloque em recipiente de armazenamento entre Kimwipes.
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Resultados
A Figura 1B mostra clássico Esôfago de Barrett sem displasia cercado nas fronteiras por epitélio escamoso normal. Começando com o tecido escamoso mais plana, que está localizado perifericamente e indicado pelas setas azuis, uma zona homogénea de fluorescência monótona está presente sem arquitectura glandular. As setas verdes indicam uma linha verde circular em torno do tecido escamoso. Este esboço é artefacto resultante a partir da tampa do endoscópio. Movendo-se para o tecido localizado centralmente de...
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Discussão
Com vigilância endoscópica normal, neoplasia em BE é muitas vezes perdida 8 porque metaplasia benigna pode ser indistinguível de displasia de alto grau e adenocarcinoma. Como uma ferramenta que seria melhor permitir gastroenterologistas para remediar esse erro atualmente inevitável, o corante vital reforçada imagens de fluorescência destaca morfologia glandular de um tecido proporcionando assim uma característica distinta para diferenciar os tipos de tecidos. Além disso, através de um campo de visão de até 2,...
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Divulgações
Não há nada a divulgar.
Agradecimentos
Este trabalho é apoiado pelo Instituto Nacional do Câncer do Instituto Nacional de Saúde concessão R01 CA140257-01.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Filtro* | Schott North America, Inc., Duryea, Pensilvânia | Não Aplicável | Filtro passa-longo de 495 nm |
| Tampa Halo – Médio* | Barrx Medical | CP-002A | |
| Processador* | Pentax | EPK-i | |
| ** | Não Aplicável | Não Aplicável | |
| Kimwipes | Kimberly-Clark | KimTech Science | S-8115 |
| Cidex | Advanced Sterilization Products | CIDEX OPA | |
| Hemissulfato de proflavina (0,01% p/v) | FDA (IND 102,217) | ||
| Diodo laser* | Nichia Corporation | Não aplicável | de imagem de 455 nm |
| * | Labview | Não aplicável | |
| Cateter de pulverização | Olympus | não aplicável | |
| *Especificações do equipamento na Referência 6. **Equipamento especificidades da Referência 7 |
Referências
- Modiano, N., Gerson, L. B. Barrett's Esophagus: Incidence, etiology, pathophysiology, prevention and treatment. Therapeutics and Clinical Risk Management. 3, 1035-1145 (2007).
- Brown, L. M., Devesa, S. S., Chow, W. Incidence of Adenocarcinoma of the esophagus among white Americans by sex, stage, and age. Journal of the National Cancer Institute. 100, 1184-1187 (2008).
- Siegel, R., Naishadham, D., Ahmedin, J. Cancer Statistics, 2012. A Cancer Journal for Clinicians. 62, 10-29 (2012).
- Vieth, M., Ell, C., Gossner, L., May, A., Stolte, M. Histological analysis of endoscopic resection specimens from 326 patients with Barrett's esophagus and early neoplasia. Endoscopy. 36, 776-781 (2004).
- Pohl, H., Rosch, T., Vieth, M., et al. Miniprobe confocal laser microscopy for the detection of invisible neoplasia in patients with Barrett's oesophagus. Gut. 57, 1648-1653 (2008).
- Thekkek, N., et al. Modular video endoscopy for in vivo cross-polarized and vital-dye fluorescence imaging of Barrett's-associated neoplasia. Journal of Biomedical Optics. 18, 026007(2013).
- Roblyer, D., et al. Multispectral optical imaging device for in vivo detection of oral neoplasia. Journal of Biomedical Optics. 13, 024019(2008).
- Egger, K., et al. Biopsy surveillance is still necessary in patients with Barrett's oesophagus despite new endoscopic imaging techniques. Gut. 52, 18-23 (2003).
- Thekkek, N., et al. Vital-dye enhanced fluorescence imaging of GI mucosa: metaplasia, neoplasia, inflammation. Gastrointestinal Endoscopy. 75, 877-887 (2012).
- Muldoon, T. J., Anandasabapathy, S., Maru, D., Richards-Kortum, R. High-resolution imaging in Barrett's esophagus: a novel, low-cost endoscopic microscope. Gastrointestinal Endoscopy. 68, 737-744 (2008).
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Reimpressões e permissões
