Ultra-alta freqüência ultra-som é uma ferramenta de imagem ao vivo poderoso para examinar anormalidades cardíacas em pequenos animais. Sua noninvasiveness permite manter o estado fisiológico de embriões. Aqui, vamos mostrar o uso do M-modo ultra-som para medir os batimentos cardíacos de embriões em E18.5 no útero.
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Artigo de método
Na medição utero da frequência cardíaca em rato por não invasiva em modo M Ecocardiografia
Neste artigo
Resumo
Resumo
A doença cardíaca congênita (DCC) é a causa não infecciosa mais freqüente de morte ao nascer. A incidência de doença coronariana varia de 4 a 50/1, 000 nascimentos (doença e estimativas regionais lesão, Organização Mundial da Saúde, 2004). Cirurgias que muitas vezes comprometem a qualidade de vida são necessárias para corrigir defeitos do coração, lembrando-nos da importância de encontrar as causas da doença coronariana. Modelos de ratos mutantes e tecnologia de imagem ao vivo tornaram-se ferramentas essenciais para o estudo da etiologia da doença. Embora os métodos avançados permitem imagens ao vivo de corações anormais em embriões, os estados fisiológicos e hemodinâmicos destes últimos são muitas vezes comprometida devido a procedimentos cirúrgicos e / ou prolongados. Imagiologia de ultra-sons não-invasivo, no entanto, pode ser usado sem expondo cirurgicamente os embriões, mantendo assim a sua fisiologia. Aqui, nós usamos simples ultrassom modo-M para avaliar a freqüência cardíaca de embriões em E18.5 no útero. A detecção de ritmos cardíacos anormais é realmente uma boa indicator de disfunção do coração e, portanto, constitui uma primeira etapa na identificação de defeitos de desenvolvimento que podem levar a insuficiência cardíaca.
Introdução
CHD é a causa não infecciosa mais comum de morte no nascimento 1. Várias cirurgias são muitas vezes necessárias para corrigir as deficiências estruturais em indivíduos cuja qualidade de vida pode ficar comprometida 1. Crianças com CHD freqüentemente desenvolvem distúrbios neurológicos, mesmo que não tenham sido submetidos a cirurgia, indicando importante em conseqüências útero em desenvolvimento 2,3. Ambos os fatores genéticos e ambientais, como a exposição a vírus ou produtos químicos (álcool) durante a gravidez, causa CHD. Estudar os contribuintes genéticos ainda está em sua fase inicial, mas crescendo rapidamente.....
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Protocolo
Todos os procedimentos mostrados neste protocolo ter sido aprovado pelo Comitê Animal Care a IRCM.
1. O ultra-som do sistema e estação de preparação
- Inicie o sistema de imagiologia de ultra-sons e ligar a cabeça da sonda, assim como a unidade controladora da fisiologia de acordo com as instruções do fabricante (Figura 1). Escolha cardíaca Programa de medição e a cabeça da sonda que corresponde ao transdutor 30 MHz.
- Encha o revólver da cabeça da sonda com água deionizada. Evite bolhas de ar como eles interferem com resolução de imagem. Coloque a cabeça da sonda, com o lado da pega para cima no respecti....
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Resultados
O método acima foi utilizado para avaliar o impacto da presença ou ausência da furina serina-protease em células endoteliais em frequências cardíacas de embriões de ratinho no E18.5 no útero. Furina pertence à família das convertases pró-proteína (PCs) que os precursores de proteína clivam depois de resíduos básicos. Furina e seus substratos são proteínas secretoras e clivagem pode ocorrer no aparelho de Golgi, endossomas ou na superfície da célula. Substratos chave de furina incluem TGFb, e factores de TGFb se.......
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Discussão
-Ecocardiograma modo M é um método simples e eficaz para medir a freqüência cardíaca útero de embriões de camundongos. Transdutores disponíveis comercialmente fornecer resolução suficiente para visualizar pequenos corações batendo. Assim, eles permitem que a medição da frequência cardíaca de alta precisão, em comparação com outros métodos, como a medição de pulso, e pode substituir a microscopia de vídeo de alta resolução. Contudo, as ferramentas atuais não permitem a análise simultânea de todos os emb.......
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Divulgações
Não há conflito de interesse declarados.
Agradecimentos
Agradecemos Manon Laprise para treinamento em ecocardiografia e Ann Chamberland para tirar as fotos mostradas nas Figuras 1 e 2. Este trabalho foi financiado pela Canadian Institutes of Health Research concessão 44363 MOP e Canadá Presidente 950-216684.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Isoflurano | Parceiros Farmacêuticos do Canadá Inc. | CP0406v2 | 1-cloro-2,2,2-trifluoroetil difluorometil éter |
| gel de ultrassom | Parker Laboratories Inc. | Gel de | |
| Parker Laboratories Inc. | Spectra 360 | ||
| Gel oftálmico | Novartis | Tear-Gel | |
| Creme depilatório | Church Dwight Co., Inc. | Máquina | |
| Troca de gaze/algodão | Pontas | ||
| Marcador | |||
| Alta Resolução In vivo Sistema de Imagem de Ultrassom | Visual Sonics | Vevo770 | |
| Transdutor de 30 MHz | Visual Sonics | RMV707B | |
| Plataforma de Imagem e unidade controladora de fisiologia | Visual Sonics | ||
| Sistema Anestésico | Cyprane North America Inc. | ||
| Lâmpada |
Referências
- Hoffman, J. I., Kaplan, S. The incidence of congenital heart disease. J. Am. Coll. Cardiol. 39, 1890-1900 (2002).
- Miller, S. P., et al. Abnormal brain development in newborns with congenital heart disease. N. Engl. J. Med. 357, 1928-1938 (2007).
- Bru....
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Reimpressões e permissões
