Renal Isquemia Reperfusão: um modelo do rato de lesão e regeneração

Resumo

O modelo de camundongo de lesão de reperfusão de isquemia renal descrito aqui compreende uma nefrectomia direita que fornece tecido de controle e pinçamento do pedículo renal esquerdo para induzir isquemia que resulta em lesão renal aguda. Este modelo usa uma abordagem de laparotomia de linha média com todas as etapas realizadas por meio de uma incisão.

Resumo

Renal lesão de isquemia e reperfusão (IRI) é uma causa comum de lesão renal aguda (IRA) em pacientes com oclusão do fluxo sanguíneo renal é inevitável durante o transplante renal. Modelos experimentais de que precisa e reproduzível recapitulam IRI renal são cruciais em dissecar a fisiopatologia da LRA e do desenvolvimento de novos agentes terapêuticos. Apresentado aqui é um modelo do rato do IRI renal que resulta em reprodutível AKI. Isto é conseguido por uma abordagem laparotomia mediana para a cirurgia com uma incisão que permite tanto uma nefrectomia direita que fornece tecido controlo e de aperto do pedículo renal esquerda para induzir isquémia do rim esquerdo. Por cuidadosa monitorização da posição de aperto e a temperatura do corpo durante o período de isquémia este modelo consegue lesão funcional e estrutural reprodutível. Os ratinhos sacrificados 24 horas após a cirurgia demonstrar a perda da função renal com a elevação do nível de creatinina no soro ou no plasma, bem como estruturasdanos nos rins tural com necrose tubular aguda evidente. A função renal melhora e a lesão tecidual aguda resolvida no decurso de 7 dias após o IRI renais tais que este modelo pode ser usado para estudar a regeneração renal. Este modelo de IRI renal tem sido utilizada para estudar a fisiopatologia molecular e celular do AKI, bem como a análise da regeneração renal subseqüente.

Introdução

Isquemia lesão de reperfusão (IRI) é um modo comum de lesão de múltiplos órgãos, incluindo o rim, coração e cérebro. Renal IRI pode levar à lesão renal aguda (LRA) em pacientes e nenhum tratamento específico está disponível. AKI como resultado da IRI tem uma patogênese complicada que envolve tanto a resposta imune inata e adaptativa ^1. Um modelo experimental de IRI renal oferece o potencial para dissecar as células-chave e mediadores envolvidos na patogênese da IRA, bem como a regeneração renal subseqüente que segue ao longo de dias subseqüentes. Além disso, os efeitos dos agentes terapêuticos sobre os processos de doença podem ser avaliadas.

Protocolo

NOTA:. Experimentos em animais foram realizados de acordo com as diretrizes e regulamentos impostos pelos Animais (Scientific Procedures) Act 1986 procedimentos foram realizados utilizando (autoclavados) instrumentos e consumíveis cirúrgicos estéreis. Embora o modelo de murino de IRI renal apresentado aqui foi realizada num macho de 8 semanas de idade Balb / c do rato pode ser executada de forma reprodutível em uma variedade de estirpes de murinos de ambos os sexos com idades compreendidas tipicamente entre 7-15 semanas, com a idade ser óptima 8 semanas. Os dados apresentados na seção de resultados representante foi obtido de ambos Balb / c e camundongos FVB. A aplic....

Resultados

Lesão tubular e recuperação pode ser avaliada por H & E ou coloração PAS de cortes de tecido seguintes IRI renal. Túbulos localizados dentro do OSOM são classificados como saudável, feridas, necrose ou a recuperação de acordo com a morfologia da célula, a integridade e o número de núcleos (Figura 1). A lesão funcional e estrutural neste modelo é dependente da duração da isquemia. Um aumento progressivo da gravidade da disfunção renal, avaliada pela concentração plasmática de creatinina e BUN, é evid.......

Discussão

Renal IRI é uma importante causa de LRA sem tratamento específico disponível. O estudo experimental de IRI renal tem sido altamente informativos com trabalhos anteriores demonstrando o papel de macrófagos, células dendríticas, linfócitos T, células-regulação, assim como outras células e mediadores na indução de tanto a lesão aguda e da fase de cicatrização ^{de 5,8 - 16.} Além disso, o IRI renal experimental foi usado para avaliar o efeito de vários agentes terapêuticos ^4,17-19.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Tesoura de tecido	Fine Science Tools	14072 - 10
pinças Micro-Adson (dentado de rato)	Fine Science Tools	11019 - 12
S& Pinça T JFA-5bTC - SuperGrip Angled	Fine Science Tools	00649-11
Afastador Colibri	Fine Science Tools	17000 - 04
Aplicador de micro clipes	Ferramentas Fine Science	18057-14
Micro serrafines	Fine Science Tools	18055-04
Fine	Science Tools	12002 - 12
Hemoclip Plus Ligating Clips Small	Weck	533837
Autoclip Wound Clip, 9mm	Harvard Apparatus	PY2 52-3748
Sutura Trançada Silk Black, Tamanho 6-0	Harvard Apparatus	723288
Standard Heat
Matt Homeotérmico Cobertor & Unidade de	Controle Aparelho
Lacri-Lube	Allergan
Vetasept Clorexidina	AnimalCare
Vetalar : Solução de cloridrato de			100 mg/ml
Domitor : cloridrato de medetomidina			1 mg/ml
Vetergesic : Cloridrato de buprenorfina			0,3 mg/ml
Antisedan : Hidrocoride			5 mg/ml

Porta-agulhas Olsen-Hegar Harvard cetamina de atipamezol