Hormônios gonadais, como o estrogênio, modulam a formação da memória em vários paradigmas experimentais, incluindo a memória de extinção do medo. Este protocolo descreve um conjunto de métodos para investigar a influência dos hormônios gonadais especificamente durante a extinção em fêmeas que circulam naturalmente, incluindo monitoramento do ciclo estral e administração de estrogênio exógeno.
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Artigo de método
Protocolo de Estudos de Extinção do medo condicionado em Naturally Ciclismo ratas
Neste artigo
Resumo
Resumo
A extinção do medo condicionado tem sido extensivamente estudada em roedores machos. Recentemente, tem havido um número crescente de estudos que indicam que os mecanismos neurais para certas tarefas comportamentais e comportamentos de resposta são diferentes em fêmeas e machos. Usando fêmeas em estudos de pesquisa pode representar um desafio por causa da variação de hormônios sexuais durante o ciclo estral. Este protocolo descreve procedimentos bem estabelecidos que são úteis para investigar o papel do estrogénio na extinção medo a consolidação da memória em ratos fêmeas. Fase do ciclo estral e administração de estrogênio exógeno antes do treino extinção pode influenciar recordação extinção 24 horas mais tarde. A técnica de swab vaginal para identificação fase de estro descrito aqui ajuda o exame e manipulação de ciclismo naturalmente hormônios sexuais. O uso deste modelo básico roedor pode delimitar melhor os mecanismos pelos quais o estrogênio podem modular memória extinção do medo emfêmeas.
Introdução
Diferenças sexuais inerentes são observados em vários comportamentos cognitivos e paradigmas de aprendizagem em humanos e roedores. Por exemplo, foi relatado que as mulheres geralmente têm habilidades verbais e orientada para o detalhe mais fortes, enquanto os homens têm melhores habilidades espaciais 1-3. Estas diferenças entre os sexos pode ser em parte devido à influência dos hormônios sexuais. Altos níveis de estradiol melhorar o desempenho em tarefas em que as mulheres são melhores, mas pioram o desempenho em tarefas que os homens geralmente fazem bem 4-6. Embora esta evidência é convincente, a capacidade limitada de controlar completamente....
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Protocolo
NOTA: Todos os procedimentos descritos neste protocolo ter sido aprovado pela Subcomissão de Investigação Animal Care, que serve como Cuidado e Uso Comitê de animal Institucional (IACUC) para o Hospital Geral de Massachusetts, e estão de acordo com os Institutos Nacionais de diretrizes de saúde.
1. animal Habitação e Procedimento Handling
- Após a chegada, os ratos fêmeas casa adulto Sprague Dawley cerca de 8-10 semanas de idade (pesando 200-225 g) em grupos de caixas de plástico 3-4 polegadas com cama de lascas de madeira. Mantê-los em uma dieta de acesso ad libitum à comida e água e um ciclo claro / escuro de 12 horas de luz. D....
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Resultados
Neste protocolo recordação extinção do medo, por cento congelamento foi medida como um indicador do medo. Animais que extinguiu bem e retidos a memória da formação extinção exibiu baixa medo no último dia do teste comportamental durante a chamada extinção. Ratos machos e fêmeas não apresentam diferenças significativas na expressão de medo condicionado durante o condicionamento, extinção, e recordar as fases (Figura 2). No entanto, a diferença entre os sexos se torna evidente quando os animais são analis.......
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Discussão
Extinção do medo tem sido extensivamente estudada em ratos machos com os mecanismos neurais que medeiam extinção medo condicionado identificados e avaliados sob várias manipulações. Relativamente poucos estudos analisaram ratas ou o papel das hormonas sexuais na extinção do medo. Para estudar especificamente os efeitos do estrogénio sobre a extinção do medo, naturalmente ciclagem ratas são submetidos a um paradigma comportamental de três dias. Este procedimento consiste em fases habituação / condicionado, extinção, e ex.......
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Divulgações
Os autores deste manuscrito não tem concorrentes interesses financeiros ou outros conflitos de interesse a divulgar.
Agradecimentos
Mohammed R. Milad é apoiado pelo subsídio R01 do NIMH MH097880 e fundos institucionais do Departamento de Psiquiatria do MGH.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Câmara de condicionamento do medo | Coulbourn Instruments | ||
| Graphic State | Coulbourn Instruments | ||
| Caixa de atenuação de som | Med Associates, Inc. | NIR-022MD | |
| Estradiol | Sigma-Aldrich | E1024 | Em óleo de gergelim para injeção subcutânea |
| Óleo de gergelim | Sigma-Aldrich | S3547-250ML | |
| Freezescan | Cleversys, Inc. | ||
| Coloração rápida por imersão | Jorgensen Laboratories, Inc. | J0322A1, J0322A2, J0322A3 | |
| Aplicadores com ponta de algodão | Fisher Scientific | 23-400-114 | 6 polegadas, solução salina estéril |
| a 0,9% | LabChem, Inc. | LC23460-2 Cloreto de | sódio com |
| lâminas de microscópio Selectfrost | Fisher Scientific | 12-550-003 | |
| Virex II 256 | Diversey, Inc. | 5019317 | Diluir 1:256 com água |
| Seringas Luer-Lok Tip 1ml | Becton Dickinson | 309628 | |
| Agulhas descartáveis hipodérmicas | Exelint International, Co. | 26402 | calibre 26 |
Referências
- Baron-Cohen, S., Knickmeyer, R. C., Belmonte, M. K. Sex differences in the brain: implications for explaining autism. Science. 310 (5749), 819-823 (2005).
- Voyer, D., Voyer, S., Bryden, M. P. Magnitude of sex differences in spatial abiliti....
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Reimpressões e permissões
