Pré-condicionamento isquémico remoto (RIP) é um método de tecidos condicionado contra o stress prejudicial. Nós estabelecemos um método de isquemia remoto no membro posterior, inflando um manguito de esfigmomanômetro para 5-10 min. As capacidades neuroprotectoras de PIR foi demonstrada num modelo de degeneração da retina em roedores.
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Artigo de método
Membro Remoto Pré-Condicionamento Isquêmico: A Técnica neuroprotetor em roedores
Neste artigo
Resumo
Resumo
Isquemia subletal protege os tecidos contra subsequente isquemia, mais severa a regulação positiva através de mecanismos endógenos no tecido afectado. Isquemia subletal também tem sido demonstrado que regulam positivamente os mecanismos de protecção nos tecidos remotos. Um breve período de isquemia (5-10 min) na pata traseira dos mamíferos induz respostas de auto-proteção no cérebro, pulmão, coração e retina. O efeito é conhecido por pré-condicionamento isquémico remoto (PIR). É uma maneira terapeuticamente promissora de proteger os órgãos vitais, e já está em fase de testes clínicos para o coração e cérebro lesões. Esta publicação mostra, um método minimamente invasivo controlada de fazer um galho - especificamente o membro posterior de um rato - isquêmica. Um medidor de pressão desenvolvido para uso em recém-nascidos humanos está ligado a um medidor de tensão manual e usado para aplicar pressão de 160 mmHg, em torno da parte superior do membro posterior. Uma sonda concebida para detectar a temperatura da pele é utilizado para verificar a ischemium, por registo da queda de temperatura da pele causado pela oclusão induzida por pressão das artérias das pernas, e o aumento da temperatura que segue libertação da braçadeira. Este método de RIP proporciona proteção a retina de ratos contra brilhante dano induzido por luz e degeneração.
Introdução
A sobrevivência da maior parte, talvez todos, os tecidos do rosto de stress metabólico podem ser melhoradas por condicionamento prévio com um período de isquemia subletal 1,2. Pré-condicionamento isquêmico (IP), em termos práticos é a exposição dos tecidos à isquemia sub-letal, antes de as experiências de tecido estressores mais graves, como um insulto isquêmico subseqüente. Em modelos animais, IP fornece protecção notável para o cérebro, retina, coração e pulmões 3-6. Do mesmo modo, observações em pacientes com AVC mostrou uma ligação entre os ataques isquêmicos transitórios anteriores e melhores resultados clínicos 7,8. IP também pr....
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Protocolo
Declaração de ética: O protocolo segue as diretrizes de cuidados de animais de University of Sydney, AEC # 5657. A anestesia foi aprovado pelo comitê de ética animal (Universidade de Sydney, AEC # 5657).
1. Equipamentos Preparação
- Use rastreamento em tempo real temperatura da pele. Ligue computador e hardware de aquisição de dados.
- Software de gravação de temperatura aberto e ajustar ajuste de temperatura a entre 30-35 ° C e a frequência da amostragem para cada 100 ms.
- Opcional: termômetro retal Inserir para garantir que a temperatura do núcleo permanece estável a 37,5 ° C.
2....
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Resultados
Um manguito de pressão arterial elevada para acima de 160 mmHg interrompe o fluxo sanguíneo para o membro posterior como pode ser visto claramente na Figura 1B. A falta de oxigenação do tecido resultou numa redução da temperatura do pé do animal por um protocolo de isquemia-reperfusão (Figura 2). A temperatura do pé (33 ° C) foi menor do que a temperatura do núcleo e reduzida de forma fiável durante a elevação da pressão do balonete (31 ° C), aumentando quando a braçadeira foi esvaziado.......
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Discussão
Roedor membro posterior isquemia foi induzida com sucesso com um esfigmomanômetro e algemá entregar neuroproteção para os fotorreceptores da retina. Um achado consistente com o condicionamento induzido proteção isquêmico de fotorreceptores de uma lesão leve 9,28.
Essencialmente, isquemia remoto faz com que a privação breve oxigênio aos tecidos. Assim, o pré-condicionamento isquémico remoto tem muitas semelhanças com o condicionamento isquémico ou alternativamente denominado tolerâ.......
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Divulgações
O autor não tem nada a divulgar.
Agradecimentos
O autor agradece a ajuda da Sra. Sharon Spana (Universidade de Sydney) no monitoramento, manuseio e experimentação de roedores. O autor gostaria de agradecer ao Prof. Jonathan Stone e ao Dr. Dan Johnstone pela assistência na preparação deste manuscrito. O apoio financeiro ao doutorado foi fornecido pela Universidade de Sydney e pelo Centro Australiano de Excelência em Visão.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Esfigmomanômetro aneróide manual DuraShock da série Gold | Welch Allyn | DS56 | Esfigmomanômetro manual |
| Neonato [tamanho 2] 1 tubo, pacote com 10 | Welch Allyn | 5082-102-1 | Manguito de pressão arterial de membro |
| Adaptador de trava Luer | Welch Allyn | 5082-178 | Adaptador para manguito neonatal |
| Pod termistor AD | Instruments | ML 309 | unidade de temperatura da pele |
| Sonda de temperatura da pele | AD Instruments | MLT 422/A | |
| Powerlab, hardware de aquisição de 4 canais | AD Instruments | PL 35044 | |
| Sistema de manta homeotérmica com sonda flexível | Harvard Appartus | 507222F | |
| Toalha | opcional: isquemia remota acordada | ||
| Isoflo - 100% Isoflurano (250 ml) | Abbot Animal Health | 05260-05 | opcional: isquemia remota de anestésico inalatório |
| Ketamil - cetamina 100 mg/ml (50 ml) | Troy Laboratories Pty Ltd | opcional: isquemia remota de anestésico injetável | |
| Xylium - Xylazine 100 mg/ml (50 ml) | Troy Laboratories Pty Ltd | opcional: isquemia remota de anestésico injetável |
Referências
- Meller, R., Simon, R. P. Tolerance to Ischemia-an Increasingly Complex Biology. Translational Stroke Research. 4 (1), 40-50 (2013).
- Sun, J., et al.
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Reimpressões e permissões
