Um modelo murino de Arterial Restenosis: Aspectos Técnicos do Femoral Injury Fio

Resumo

O mouse modelo de lesão fio artéria femoral de reestenose é tecnicamente desafiador. Neste protocolo, mostrar os principais detalhes técnicos essencial para a realização com êxito lesão fio para induzir neo�tima consistente para estudos de reestenose.

Resumo

A doença cardiovascular causadas por aterosclerose é a principal causa de morte no mundo desenvolvido. O estreitamento da luz do vaso, devido ao desenvolvimento da placa aterosclerótica ou a ruptura de placas estabelecidos, interrompe o fluxo normal do sangue levando a várias morbidades, tais como infarto do miocárdio e acidente vascular cerebral. Na clínica procedimentos endovasculares, como a angioplastia são comumente realizados para reabrir o lúmen. No entanto, estes tratamentos inevitavelmente danificar a parede do vaso, bem como o endotélio vascular, desencadeando uma resposta de cicatrização excessiva e o desenvolvimento de uma placa que se estende da neointima no lúmen fazendo com que a restenose do vaso (re-estreitamento). A reestenose permanece uma das principais causas do fracasso dos tratamentos endovasculares para aterosclerose. Assim, os modelos animais pré-clínicos de reestenose são de vital importância para a investigação dos mecanismos fisiopatológicos, bem como translacional abordagens para intervenções vasculares. Entre vários experime murinomodelos ntal, lesão fio artéria femoral é amplamente aceito como o mais adequado para estudos de reestenose pós-angioplastia, pois se assemelha ao procedimento de angioplastia que prejudica a ambos endotélio e da parede do vaso. No entanto, muitos pesquisadores têm dificuldade em utilizar este modelo devido ao seu alto grau de dificuldade técnica. Isto é primeiramente porque um fio de metal tem de ser inserido dentro da artéria femoral, o que é cerca de três vezes mais fino do que o fio, para gerar suficiente para induzir lesão neoíntima proeminente. Aqui, descrevemos os detalhes cirúrgicos essenciais para efetivamente superar as maiores dificuldades técnicas deste modelo. Seguindo os procedimentos apresentados, realizando a lesão de arame artéria femoral de rato torna-se mais fácil. Uma vez familiarizado, todo o processo pode ser concluído no prazo de 20 min.

Introdução

Na era da aplicação ampliada de tratamentos endovasculares para várias doenças cardiovasculares, a reestenose após a angioplastia é um dos principais problemas para os pacientes submetidos a esses tratamentos. O dano ao endotélio vascular no momento da angioplastia, em conjunto com o fundo aterosclerótico, induz proliferação excessiva de células musculares lisas na camada média, resultando em hiperplasia neointimal. ^1,2 Um modelo animal viável que recapitule a hiperplasia neointimal pós-angioplastia é, portanto, importante não apenas para a investigação dos mecanismos da doença, mas também para o desenvolvimento de terapêuticas eficazes para o tratamento de....

Protocolo

Declaração de Ética: NOTA: Todos os procedimentos estão em conformidade com o Manual sobre Cuidados e Uso de Animais de Laboratório (National Academies Press, 8ª edição, 2011), e os protocolos aprovados pelo Comitê de Uso e Cuidado Animal Institucional da Universidade de Wisconsin. Todas as cirurgias foram realizadas sob anestesia isoflurano (através de inalação, taxa de fluxo de 2 ml / min), e foram feitos todos os esforços para minimizar o sofrimento. Os animais foram sacrificados numa câmara gradualmente cheio com CO _2.

1. A indução da anestesia geral e incisão na pele

1. Use macho C57BL / 6 com idade de 12-16 semana....

Resultados

Quatro semanas após a cirurgia, dissecção da artéria femoral feridos fios e fazer espécime Bloco A parafina para analisar a formação neointima. Induzir anestesia geral, tal como descrito acima. Abra o peito imediatamente e insira uma de calibre 20 borboleta agulha para o ventrículo esquerdo. Ligue a linha para um frasco de infusão. Realizam a fixação de perfusão através de infusão de gotas de PBS, seguido por paraformaldeído a 4% (geralmente 10-20 mL, cada um). O frasco de infusão é colocado cerca de 140 centím.......

Discussão

O procedimento de lesão fio é aplicável a todas as linhagens de camundongos, desde que as suas estruturas anatômicas são semelhantes. ⁴ Neste trabalho, utilizou-se do sexo masculino camundongos C57BL / 6 com uma idade de 12-16 semanas. Como aprendemos a partir de nossos estudos preliminares, as artérias femorais de ratos mais jovens de 10 semanas são muitas vezes tão pequeno que a inserção do fio é bastante desafiador. Por outro lado, a inserção do fio nos ratos mais velhos que 16 semanas, é tecnicamente mais.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Guia de Fio de Núcleo Fixo	Cook	G02426	Diâmetro 0.015 polegada,
Pinça de Dilatação	Roboz	RS-4927	Pontas curvas e rombas
Dumont Tweesers #5	World Precision Instruments	14095	Pontas retas e afiadas
Pinça de Punção de Vaso Dumont World	Precision Instruments	503373
Tesoura McPherson-Vannas	World Precision Instruments	501234
Pinça de Mosquito	World Precision Instruments	501291
Sutura de Nylon Etílico 9-0	Ethicon	7717G	9-0, Micro ARO de Monofilamento de Nylon Preto
, Estéril 11-0, 70 micrômetros, VT4A00N07 Cirúrgico de Ponto MET		11-0, Monofilamento de Nylon Preto
3M Pele Descartável DS Multi-Shot Precisa Grampeador	3M	DS-25

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