A administração intranasal de recombinantes Vacinas contra Influenza em quimérico rato Modelos para estudar a imunidade mucosal

José Vicente Pérez-Girón; Sergio Gómez-Medina; Anja Lüdtke; Cesar Munoz-Fontela

doi:10.3791/52803

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Artigo de método

A administração intranasal de recombinantes Vacinas contra Influenza em quimérico rato Modelos para estudar a imunidade mucosal

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DOI:

10.3791/52803

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25 de junho de 2015

José Vicente Pérez-Girón¹ , Sergio Gómez-Medina¹ , Anja Lüdtke¹ , Cesar Munoz-Fontela¹

¹Laboratory of Emerging Viruses, Heinrich Pette Institute, Leibniz Institute for Experimental Virology

Neste artigo

Resumo

Há uma falta geral de conhecimento sobre como as vacinas funcionam. Aqui, propomos o uso combinado de genética reversa e camundongos quiméricos da medula óssea para obter informações sobre as respostas imunes iniciais do hospedeiro às vacinas, com foco especial nas células dendríticas e na imunidade das células T.

Resumo

As vacinas são uma das maiores conquistas da humanidade e salvaram milhões de vidas no último século. Paradoxalmente, pouco se sabe sobre os mecanismos fisiológicos que medeiam as respostas imunes às vacinas, talvez devido ao sucesso geral da vacinação, que reduziu o interesse nos mecanismos moleculares e fisiológicos da imunidade vacinal. No entanto, vários patógenos humanos importantes, incluindo o vírus influenza, ainda representam um desafio para a vacinação e podem se beneficiar de estratégias imunológicas.

Embora a genética reversa da gripe tenha sido aplicada com sucesso à geração de vacinas vivas atenuadas contra influenza (LAIVs), a adição de ferramentas moleculares em preparações vacinais, como componentes traçadores para acompanhar a cinética da vacinação in vivo, não foi abordada. Além disso, a recente geração de modelos de camundongos que permitem a depleção específica de leucócitos durante estudos cinéticos abriu uma janela de oportunidade para entender os mecanismos imunológicos básicos subjacentes à proteção induzida pela vacina. Aqui, descrevemos como a combinação de genética reversa e modelos quiméricos de camundongos pode ajudar a fornecer novos insights sobre como as vacinas funcionam nos níveis fisiológico e molecular, usando como exemplo uma vacina contra influenza viva atenuada (LAIV) recombinante, adaptada ao frio e viva. Utilizamos LAIVs gerados em laboratório que abrigam traçadores celulares, bem como quimeras competitivas da medula óssea (BMCs) para determinar a cinética inicial da imunidade vacinal e os principais mecanismos fisiológicos responsáveis pelo início da imunidade adaptativa específica da vacina. Além disso, mostramos como essa técnica pode facilitar estudos de função gênica em animais únicos durante as respostas imunes às vacinas. Propomos que esta técnica possa ser aplicada para melhorar as estratégias profiláticas atuais contra patógenos para os quais são necessárias contramedidas médicas urgentes, por exemplo, influenza, HIV, Plasmodium e vírus da febre hemorrágica, como o vírus Ebola.

Introdução

A geração de memória imunológica, na ausência de doença é a base fisiológica de vacinação eficiente ^1. Recentemente, sistemas de abordagens baseadas em biologia têm revelado que as vacinas de sucesso, como a vacina contra a febre amarela, induzir uma forte indução de resposta imune inata e ativação de vários subconjuntos de células dendríticas (DCs), que por sua vez, levam a multilinhagens ativação de antígeno células T específicas ^2,3. Uma vez que as DCs são a única população de células imunitárias, com a capacidade para activar células T ingénuas específicas de antigénio ^4, o estudo da sua função durante a vacinação é fundamental pa....