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Artigo de método

Estratégias experimentais para Ponte grandes lacunas de tecido na medula espinhal ferido após aguda e lesão crônica

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DOI:

10.3791/53331

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5 de abril de 2016

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Lesões graves na medula espinhal geralmente resultam em defeitos teciduais. Duas possibilidades são descritas para preencher com sucesso essas lacunas para promover a adaptação tecidual, respostas regenerativas e melhora funcional em ratos por meio do implante de um sistema de microconectores mecânicos após lesão aguda e cinco semanas após a transecção completa da medula espinhal.

Resumo

Depois de uma lesão da medula espinal (SCI) forma-se uma cicatriz no núcleo lesão axonal que dificulta a regeneração. Transpondo o local da lesão após um insulto para a medula espinhal, ressecções de tumor, ou defeitos do tecido resultantes de acidentes traumáticos pode ajuda e facilitar a reparação dos tecidos em geral, bem como o crescimento regenerativo de fibras nervosas para dentro e para além da área afectada. Duas estratégias de tratamento experimentais são apresentados: (1) a implantação de um novo dispositivo microconnector em uma medula espinhal de ratos torácica aguda e totalmente seccionado se readaptar cortado tocos tecido da medula espinhal, e (2) enchimento de polietilenoglicol do site da SCI em ratos cronicamente lesionados após ressecção da cicatriz. A lesão medular crônica neste modelo é uma transecção medular completa, que foi infligido 5 semanas antes do tratamento. Ambos os métodos têm recentemente alcançado resultados muito promissores e promovido rebrota axonal, invasão celular benéfica e melhorias funcionaisem modelos de roedores de ferimento da medula espinal.

O sistema microconnector mecânica (MMS) é um sistema multi-canal composto de polimetilmetacrilato (PMMA) com um sistema de tubulação de saída para aplicar pressão negativa para o MMS lúmen puxando, assim, os cotos da medula espinhal nos orifícios estruturado em favo de mel. Após a sua implantação em tecido o fosso um milímetro o tecido é sugado para dentro do dispositivo. Além disso, as paredes interiores das MMS são microestruturada para uma melhor adesão do tecido.

No caso da abordagem de ferimento da medula espinal crónicas, tecido da medula espinhal - incluindo a área da lesão a cheio de cicatriz - é ressecado por uma área de 4 mm de comprimento. Após a ressecção da cicatriz microcirúrgico da cavidade resultante é preenchido com polietileno glicol (PEG 600), que se verificou proporcionar um excelente substrato para a invasão celular, revascularização, a regeneração axonal e mesmo a remielinização in vivo compacto.

Introdução

Uma lesão traumática da medula espinal, não só conduz à perda de axónios mas novos resultados em defeitos de tecidos que impedem qualquer resposta regenerativa (para revisão ver 1,2). tecido da medula espinhal muitas vezes é perdido através de degeneração secundária que conduz à formação de cistos ou furos em torno da área da lesão. A maioria das intervenções terapêuticas experimentais focar incompletos danos na medula espinhal como transecção, esmagamento ou contusão lesões parciais, com uma borda restante do tecido saudável. Para lesões completas como totais transecções resultantes de acidentes traumáticos ou intervenções cirúrgicas, tais como ressecções....

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Protocolo

diretrizes institucionais para a segurança do animal e conforto foram cumpridas, e todas as intervenções cirúrgicas e cuidados pré e pós-cirúrgico animais foram fornecido em conformidade com a lei de Proteção Animal Alemão (Secretaria de Estado, Meio Ambiente e Defesa do Consumidor da Renânia do Norte- Vestefália, LANUV NRW ).

1. transecção completa da medula espinhal torácica de ratas Wistar (220-250 g)

  1. Preparação da Medula Espinhal
    1. Utilizar anestesia por inalação de isoflurano (2-3% de isoflurano em O2 / NO 2 numa proporção de 1: 2) e injecção de bolus de carprofeno (por via subcutânea [SC] 5 mg / k....

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Resultados

Tissue Preservation, axonal rebrota e benefício funcional de MMS Implantação após aguda transecção completa da medula espinhal
Demonstrou-se que a implantação aguda dos MMS estabilizado os cotos medula espinal completamente seccionada e diminuição da contracção do tecido (Figura 2A contra B). Como visualizado por coloração com Tricromo em cortes sagitais, a coloração verde do tecido conjuntivo fibrótico da cicatriz no núc.......

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Discussão

Aqui duas abordagens cirúrgicas diferentes são apresentados para colmatar as lacunas de tecido da medula espinhal após o implante (1) aguda transecção completa e MMS e (2) lesão medular crônica e remoção da cicatriz fibrosa mais implantação de matriz PEG. Ambas as estratégias de levar a conservação de tecidos e de regeneração axonal, bem como a melhoria funcional significativa locomotora dos animais tratados. Para MMS implantação de uma fixação adequada do MMS dentro da medula espinhal pela sutura dura firme após a ciru.......

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Divulgações

Os autores não têm nada a divulgar.

Agradecimentos

German Legal Casualty Insurance (DGUV), Comissão de Pesquisa da Faculdade de Medicina da Universidade Heinrich-Heine

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
PEG 600 Ph Eur Merck/VWR 8.170.041.000
esponja de gelatina Gelastypt   Selante Nescofilm sanofi AventisPZN-8789582
 Roth2569.1
BaytrilBayer
Rimadyl (Carpofen)Pfizer
Forene (Isoflurano)Abbvie
Kodan (desinfetante de pele)
Histoacryl (cola de tecido)
Friedman-Pearson Rongeur, copo de 1 mm, reto Ferramentas Fine Science16020-14
Micro Espátula Dois-em-um - 12 cm Ferramentas de Ciência Fina10091-12
Dumont #7 Fórceps - Inox Medical Ferramentas de Ciência Fina11273-20
Dumont #5/45 Fórceps - Inox Medical Ferramentas Fine Science11253-25
Gancho para medula espinhal Ferramentas de Ciência Fina10162-12
Tesouras Grampo Fine Science Tools14078-10
 AesculapEA016R
Ethicon Vicryl 4-0
Bepanthen Augen- und NasensalbeBayer
Pinça anatômica Ferramentas de Ciência Fina11000-13
Auto-retencionador Fine Science Tools17008-07
Grampo de pele Ferramentas de Ciência Fina13008-12
Aluspray Selectavet

Referências

  1. Ramer, L. M., Ramer, M. S., Bradbury, E. J. Restoring function after spinal cord injury: towards clinical translation of experimental strategies. The Lancet. Neurology. 13 (12), 1241-1256 (2014).
  2. McDonald, J. W., Howard, M. J.

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Reimpressões e permissões

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