Microfluídico Fluxo Chambers utilizando sangue reconstituído ao Modelo Hemostasia e transfusão de plaquetas<em&gt; In Vitro</em

Britt Van Aelst; Hendrik B. Feys; Rosalie Devloo; Philippe Vandekerckhove; Veerle Compernolle

doi:10.3791/53823

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Artigo de método

Microfluídico Fluxo Chambers utilizando sangue reconstituído ao Modelo Hemostasia e transfusão de plaquetas

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DOI:

10.3791/53823

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19 de março de 2016

Britt Van Aelst¹ , Hendrik B. Feys¹ , Rosalie Devloo¹ , Philippe Vandekerckhove²^,³^,⁴ , Veerle Compernolle¹^,²^,⁴

¹Transfusion Research Center, Belgium Red Cross-Flanders, ²Blood Service, Belgium Red Cross-Flanders, ³Department of Public Health and Primary Care, Catholic University of Leuven, ⁴Faculty of Medicine and Health Sciences, University of Ghent

Neste artigo

Resumo

A transfusão de plaquetas e hemostasia foi modelada usando reconstituição sanguínea e câmaras de fluxo microfluídico para investigar a função dos bancos de plaquetas de sangue. Os dados demonstram as consequências da lesão de armazenamento plaquetário na hemostasia, in vitro.

Resumo

As plaquetas sanguíneas preparadas para transfusão perdem gradualmente a função hemostática durante o armazenamento. A função plaquetária pode ser investigada usando uma variedade de experimentos in vitro (indiretos), mas nenhum deles é tão abrangente quanto as câmaras de fluxo microfluídico. Nesse protocolo, a reconstituição do sangue fresco trombocitopênico com plaquetas armazenadas no banco de sangue é utilizada para simular a transfusão de plaquetas. Em seguida, a amostra reconstituída é perfundida em câmaras de fluxo microfluídico que mimetizam a hemostasia em proteínas expostas da matriz subendotelial. Os efeitos da doação de sangue, transporte, separação de componentes, armazenamento e inativação de patógenos podem ser medidos em projetos experimentais pareados. Isso permite uma comparação confiável do impacto que cada manipulação na preparação de componentes sanguíneos tem na hemostasia. Nossos resultados demonstram o impacto do ciclo de temperatura, taxas de cisalhamento, concentração de plaquetas e duração de armazenamento na função plaquetária. Em conclusão, este protocolo analisa a função das plaquetas do banco de sangue e isso ajuda na otimização da cadeia de processamento, incluindo flebotomia, transporte, preparação de componentes, armazenamento e transfusão.

Introdução

Hemostasia requer a atividade combinada e regulado de células, proteínas, íons e tecidos em um contexto espaço-temporal restrito ^1. actividade não controlada pode conduzir a hemorragia ou trombose e morbidade ou mortalidade num espectro de distúrbios relacionados com a coagulação do sangue. Um experimento de câmara de fluxo microfluídico é uma técnica desafiadora que imita hemostasia in vitro. Esta abordagem permite a investigação da interação complexa de processos que fazem parte de hemostasia com um papel de liderança para as plaquetas do sangue.

A seguir a lesão vascular, as plaquetas aderem às proteínas de matriz s....