Visualização dos Vascular e parênquima regeneração após 70% hepatectomia parcial em ratos normais

Chichi Xie; Weiwei Wei; Andrea Schenk; Lars Ole Schwen; Sara Zafarnia; Michael Schwier; Felix Gremse; Isabel Jank; Olaf Dirsch; Uta Dahmen

doi:10.3791/53935

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Artigo de método

Visualização dos Vascular e parênquima regeneração após 70% hepatectomia parcial em ratos normais

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DOI:

10.3791/53935

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13 de setembro de 2016

Chichi Xie¹ , Weiwei Wei¹ , Andrea Schenk³ , Lars Ole Schwen³ , Sara Zafarnia² , Michael Schwier³ , Felix Gremse² , Isabel Jank¹ , Olaf Dirsch⁴ , Uta Dahmen¹

¹Department of General, Visceral and Vascular Surgery, Jena University Hospital, ²Experimental Molecular Imaging, RWTH Aachen University, ³Fraunhofer Institute for Medical Image Computing MEVIS, ⁴Institute of Pathology, Klinikum Chemnitz gGmbH

Neste artigo

Resumo

As ferramentas usadas para visualizar a regeneração vascular requerem métodos para contrastar as árvores vasculares. Este filme demonstrou uma técnica de injeção delicada usada para obter o contraste ideal das árvores vasculares e ilustrar os benefícios potenciais resultantes de uma análise detalhada do espécime resultante usando μCT e cortes seriados histológicos.

Resumo

Um procedimento de injecção de silicone modificado foi usado para a visualização da árvore vascular hepática. Este procedimento consistiu na injecção in vivo do composto de silicone, através de um cateter de 26 G, para o portal ou na veia hepática. Após a injeção de silicone, órgãos foram explantados e preparado para micro-CT (μCT) digitalização ex-vivo. O procedimento de injeção de silicone é tecnicamente desafiador. Alcançar um resultado bem-sucedido requer uma vasta experiência microcirúrgica do cirurgião. Um dos desafios deste procedimento envolve a determinação da taxa de perfusão adequada para o composto de silicone. A taxa de perfusão para o composto de silicone tem de ser definido com base na hemodinâmica do sistema vascular de interesse. taxa de perfusão inadequada pode levar a uma perfusão incompleta, dilatação artificial e ruptura de árvores vasculares.

A reconstrução 3D do sistema vascular foi baseado em tomografias e foi realizada comsoftware pré-clínico, tais como HepaVision. A qualidade da árvore vascular reconstruído foi directamente relacionada com a qualidade da perfusão de silicone. Subsequentemente vasculares parâmetros computados indicativos de crescimento vascular, tais como o volume vascular total, foram calculadas com base nas reconstruções vasculares. Contrastando a árvore vascular com silicone permitido para processamento subsequente histológica do espécime após a digitalização μCT. A amostra pode ser submetida a cortes seriados, análise histológica e diapositivos de todo, e, posteriormente, para a reconstrução 3D das árvores vasculares com base em imagens histológicas. Este é o pré-requisito para a detecção de eventos moleculares e sua distribuição em relação à árvore vascular. Este procedimento de injecção de silicone modificado também pode ser usado para visualizar e reconstruir os sistemas vasculares de outros órgãos. Esta técnica tem o potencial de ser aplicados extensivamente para estudos relativos à anatomia vascular e crescimento em vários animais umamodelos de doenças nd.

Introdução

A regeneração hepática é muitas vezes determinada pela medição do aumento de peso do fígado e do volume e através da avaliação da taxa de proliferação dos hepatócitos ^16. No entanto, a regeneração hepática não só é induzir a regeneração do parênquima, mas também a regeneração vascular ^6. Portanto, o crescimento vascular devem ser investigados no que diz respeito ao seu papel na progressão da regeneração hepática. A visualização do sistema vascular hepática é crítica para avançar a nossa compreensão da regeneração vascular. Numerosos métodos indirectos foram desenvolvidas para estudar os mecanismos moleculares subjacentes à regeneração vascular h....