É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

Uma nova abordagem para avaliar o resultado Motor de profunda do cérebro dos efeitos de estimulação no Rato Hemiparkinsonian: Escadaria e cilindro de ensaio

14.8K visualizações

⸱

DOI:

10.3791/53951

⸱

31 de maio de 2016

 ,  ,  ,  , 

Neste artigo

Resumo

A estimulação cerebral profunda (DBS) é uma opção de tratamento eficaz para a doença de Parkinson. Estabelecemos um desenho de estudo para rastrear novos paradigmas de estimulação em ratos. O protocolo descreve o uso do teste da escada e do teste do cilindro para avaliação do resultado motor em ratos hemiparkinsonianos tratados com DBS.

Resumo

A estimulação cerebral profunda do núcleo subtalâmico é uma opção de tratamento eficaz para a doença de Parkinson. Em nosso laboratório foi estabelecido um protocolo para a tela diferentes padrões de neuroestimulação no hemiparkinsonian (unilateral lesionado) ratos. Ela consiste na criação de lesão um unilateral de Parkinson através da injecção de 6-hidroxidopamina (6-OHDA) no feixe do cérebro anterior medial direito, implantação de eléctrodos de estimulação crónica para o núcleo subtalâmico e a avaliação dos resultados do motor no fim de períodos de 24 h de neuro-estimulação externa ligada ao cabo . A estimulação foi realizada com a estimulação de corrente constante. A amplitude foi ajustado de 20% abaixo do limiar individual para efeitos colaterais. A avaliação dos resultados do motor foi feito pela avaliação do uso pata espontânea no teste do cilindro de acordo com Shallert e pela avaliação do especialista atingindo no teste de escada de acordo com Montoya. Este protocolo descreve em detalhes a formação na caixa da escada, o cylinder teste, bem como o uso de tanto em ratos hemiparkinsonian. O uso de ambos os testes é necessário, porque o teste de escada parece ser mais sensível para a deficiência de habilidade motora fina e apresenta maior sensibilidade a alterações durante neuroestimulação. A combinação do modelo de Parkinson unilateral e os dois testes comportamentais permite a avaliação de diferentes parâmetros de estimulação de uma forma padronizada.

Introdução

A estimulação cerebral profunda do núcleo subtalâmico (STN) é uma opção de tratamento eficaz para a doença 1 e outro movimento distúrbios de Parkinson. Os mecanismos subjacentes ainda são pouco compreendidas e multifactorial, mas uma característica fundamental é a modulação da actividade de rede neuronal por despolarização repetitivo de axónios na vizinhança do eléctrodo estimulante 2-4. estimulação de alta frequência (> 100 Hz) é necessário para um efeito benéfico na maioria dos objectivos do cérebro e para a maioria das indicações de DBS. Os efeitos colaterais do resultado estimulação cerebral profunda da coativação inadvertida de outras fibra....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Protocolo

Experiências com animais foram aprovados pela Universidade de Wuerzburg e as autoridades estaduais legais de Lower Franconia, de acordo com as diretrizes de proteção animal e orientações Comunidades Europeias do Conselho (número da aprovação: 55,2-2531,01 76/11). Todos os esforços foram feitos para minimizar a dor ou desconforto dos animais utilizados.

Nota: O implante de eléctrodo foi realizada como descrito em outro lugar 18.

1. Cilindro de ensaio (figura 2)

  1. Preparar um cilindro de vidro de plástico transparente (altura: 40 cm, diâmetro: 19 cm) com a limpeza do cilindro com uma solução ....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Resultados

Todos os animais foram submetidos a um pós-mortem de verificação histológica tanto a lesão dopaminérgico e a localização do eléctrodo. Apenas os animais com a colocação correcta do eléctrodo no interior da STN (Figura 6) e lesão dopaminérgico completa (> 90% de perda de neurónios dopaminérgicos na substantia nigra) foram incluídos na secção de resultados (Figura 7).

O teste do cilindro real.......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Discussão

Este artigo descreve um protocolo de treinamento detalhado para o teste do cilindro e escadaria. Este último é concebido para avaliar o comportamento apreensão complexa e movimento motora fina devido a alcançar qualificados em ratos 16,17. A medida do resultado é expresso como o número de peletes consumidos durante o ensaio, o que é uma medida objectiva. O protocolo pode ser utilizado em modelos de rato para a doença de Parkinson e outros modelos de doenças do motor. O teste de cilindro envolve uma abordagem .......

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Divulgações

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

Agradecimentos

Este trabalho foi apoiado pelo Interdisziplinäres Zentrum für Klinische Forschung (IZKF), University Clinics Würzburg, Alemanha (projeto N-215).

....

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Caixa de escada sem tampaGlas Keil, Alemanhacaixa
de cilindroGlas Keil, Alemanhapellets
de precisão sem poeira feitos sob medida, 45 mgBio ServF0021
personalizada

Referências

  1. Fasano, A., Lozano, A. M. Deep brain stimulation for movement disorders: 2015 and beyond. Current opinion in neurology. , (2015).
  2. McIntyre, C. C., Savasta, M., Kerkerian-Le Goff, L., Vitek, J. L.

Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.

Reimpressões e permissões

Explorar mais artigos

Teste da EscadaAvaliação de Desfecho MotorNúcleo SubtalâmicoLesão por 6-OHDABateria de Testes ComportamentaisEstimulação com CabosUso Espontâneo da Pata