Artigo de método
A indução cirúrgica de isquemia de membros posteriores no camundongo é útil para examinar a angiogênese, no entanto, isso está comprometido em certas linhagens de camundongos que exibem necrose tecidual induzida por isquemia acentuada. São descritos métodos para induzir isquemia subaguda de membros usando constritores ameróides para contornar esse problema por meio da indução de oclusão arterial gradual.
doença arterial periférica (DAP) é uma das principais causas de morbilidade e mortalidade cardiovascular em países desenvolvidos, e modelos animais que reproduzem de forma fiável a doença humana são necessários para desenvolver novas terapias para esta doença. O modelo do rato de membro posterior isquemia tem sido amplamente utilizado para este fim, mas a prática padrão de indução de isquemia aguda por ligação da artéria femoral pode resultar em necrose do tecido substancial, comprometer a capacidade de os investigadores a estudar as respostas vasculares e dos tecidos do músculo esquelético para isquemia . Uma abordagem alternativa para a ligação da artéria femoral é a indução de oclusão da artéria femural gradual através da utilização de constritores AMEROID. Quando colocado em torno da artéria femoral na mesma ou em diferentes locais, como os locais de ligação da artéria femoral, estes dispositivos de oclusão da artéria mais de 1 - 3 dias, resultando em mais gradual, isquemia subaguda. Isto resulta em necrose do tecido muscular esquelético menos substancial, Which pode imitar mais de perto as respostas observadas nos PAD humano. Porque genéticos influências fundo resultados em ambos os modelos de isquemia aguda e subaguda, a consideração da estirpe de ratinhos em estudo é importante na escolha do melhor modelo. Este artigo descreve o procedimento adequado e colocação anatômica de ligaduras ou constrictors AMEROID na artéria femoral do rato para induzir subaguda ou isquemia dos membros posteriores aguda no mouse.
Doença arterial periférica (DAP) é uma das principais causas de morbidade e mortalidade cardiovascular em países desenvolvidos 1. resultados Pad de obstrução aterosclerótica das artérias periféricas, que leva a isquemia de membros com a dor de esforço ou de descanso resultante e, ocasionalmente, úlceras e gangrena que necessitam de amputação do membro não-cura. Terapias enfocadas PAD são essencialmente direccionado para endovascular 2 ou revascularização cirúrgica 3, como essencialmente não existem terapias médicas eficazes 4.
Infelizmente, a revascularização é muitas vezes de benefício limitado....
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Todos os experimentos com animais foram realizados de acordo com o protocolo aprovado pelo Comitê de Cuidado e Uso do Duque Institucional Animal. ratos machos foram utilizados neste estudo, apesar de ambos os sexos, pode ser utilizado como indicado para o objectivo científico do estudo.
1. Remoção do cabelo
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identificação adequada da vasculatura do mouse hindlimb é fundamental para garantir a reprodutibilidade das técnicas para induzir tanto subaguda e isquemia dos membros posteriores aguda, conforme descrito aqui. Além da variação inerente em estudos com animais, outros factores podem introduzir variabilidade na imagiologia de perfusão de Doppler a laser (LDPI), incluindo o tipo de anestesia, a posição do animal (comparada propenso supina), e a temperatura do corpo (ver Fig.......
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Talvez o passo mais desafiadora no presente processo é a separação da artéria femoral a partir da veia femoral. O maior diâmetro e mais finas paredes da veia femoral em comparação com aqueles da artéria aumentar a sua susceptibilidade para perfurar e rasgar durante a manipulação cirúrgica. A probabilidade de perturbar a veia pode ser reduzido, mantendo a ferida húmida utilizando uma zaragatoa estéril humedecida com PBS. É também importante para garantir que todos os fórceps são afiadas, alinhados, e livre de quebras, a .......
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Os autores não têm conflitos de interesse a divulgar.
Este estudo foi apoiado por bolsas do NIH R21HL118661, R56HL124444 e R01HL124444 para CDK, e por bolsas do NIH R00HL103797 e R01HL125695 para JMM.
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
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| Dumont #5/45 Fórceps | Fine Science Tools | 11251-35 | Dumoxel |
| Dumont Style 5 Mini Forceps | Fine Science Tools | 11200-14 | Inox |
| Extra Fine Bonn Scissors Fine Science | Tools | 14084-08 | |
| 7 - 0 Sutura de Seda | Sharpoint | DA-2527N | |
| 5 - 0 Revestido Vicryl Sutura | Ethicon | J463G | |
| Graefe Forceps | Fine Science Tools | 11053-10 | |
| Vannas Spring Scissors | Fine Science Tools | 15000-03 | |
| Lágrimas artificiais Pomada | Rugby Laboratories | 0536-6550-91 | |
| Fita Cirúrgica | 3M | 1530-0 | |
| Cotonetes Finos | Contec | SC-4 | |
| Controlador de Temperatura | Physitemp | TCAT-2DF | |
| Ameroid Constrictors | Research Instruments SW | MMC-0.25 x 1.00-SS | |
| Esterilizador | |||
| Almofada isotérmica Deltaphase | Braintree Scientific | 39DP | |
| ciência | |||
| tamponado com fosfato | Gibco | 10010-023 | |
| Moor LDPI | Moor Instruments | moorLDI2 | |
| moorLDI Software de medição | Moor Instruments | v. 6.0 | |
| Creme de Depilação | Nair |
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